«Определение непищевых красителей Судан I, Судан II, Судан III, Судан IV и Para Red в пищевых продуктах и биологически активных добавках к пище. Методические указания. МУК 4.1.2483-09» (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 05.02.2009) <Письмо> Росздравнадзора от 05.02.2009 N 01И-51/09 «О приостановлении обращения лекарственного средства»

Документ введен в действие с 5 февраля 2009 года. Текст документа

Утверждаю
Руководитель Федеральной
службы по надзору в сфере
защиты прав потребителей
и благополучия человека,
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации
Г.Г.ОНИЩЕНКО
5 февраля 2009 г.

Дата введения:
с момента утверждения

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ НЕПИЩЕВЫХ КРАСИТЕЛЕЙ СУДАН I, СУДАН II, СУДАН III, СУДАН IV И PARA RED В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ И БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ДОБАВКАХ К ПИЩЕ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
МУК 4.1.2483-09

1. Методические указания разработаны ГУ НИИ питания РАМН (академик РАМН В.А.Тутельян, к.т.н. В.Г.Байков, к.х.н. В.В.Бессонов, Ю.В.Ведищева, к.ф.н. О.И.Передеряев, Е.П.Хромченкова).
2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол N 3 от 25.12.2008).
3. Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 05.02.2009.
4. Введены в действие с момента утверждения.
5. Введены впервые.

Введение

Красители Судан I, Судан II, Судан III, Судан IV и Para Red (Пара Ред) (далее — Судан I-IV и Para Red) в сферах экономики используются при производстве дизельного топлива, в легкой промышленности для окрашивания тканей, а также при проведении биохимических исследований для окрашивания препаратов, и относятся к непищевым красителям. Необходимость определения непищевых красителей Судан I-IV и Para Red (Пара Ред) обусловлено их использованием при фальсификации специй и пряностей, а также продуктов их переработки, БАД к пище, изготовленных с использованием специй и пряностей, и других пищевых продуктов, в состав которых входят специи и пряности, с целью придания им более интенсивной окраски.

1. Общие положения и область применения

1.1. Настоящие методические указания устанавливают методику определения возможного присутствия непищевых красителей Судан I-IV и Para Red в пищевых продуктах методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в специях, пряностях и продуктах их переработки, а также в биологически активных добавках к пище (БАД) и других пищевых продуктов (в состав которых входят специи и пряности). 1.2. Методические указания предназначены для органов и организаций Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, осуществляющих контроль качества и безопасности продовольственного сырья и пищевых продуктов, находящиеся в обращении на территории Российской Федерации, в т.ч. импортируемых в Российскую Федерацию, а также могут быть использованы другими лабораторными центрами, осуществляющими контроль качества и безопасности пищевых продуктов и аккредитованными в установленном порядке. 1.3. Присутствие непищевых красителей Судан I-IV и Para Red в пищевых продуктах в пределах обнаружения данным методом является основанием для запрещения продукции к реализации.

2. Краткая характеристика красителей Cудан I, Cудан II, Cудан III, Cудан IV и Para Red (Пара Ред)

Судан I, Судан II, Судан III, Судан IV и Para Red (Пара Ред) являются синтетическими непищевыми красителями, практически нерастворимыми в воде, хорошо растворимыми в органических растворителях (хлороформе, ацетоне, эфире), и имеющих интенсивную окраску от оранжевого до ярко-красного цвета. Структура непищевых красителей Судан I-IV и Para Red приведена на рис. 1 (не приводится).

                               R1      R2      R3     Судан I                   H       H       H     Судан II                  H       CH3     H     Судан III                 H       H       Ph-N=N-     Судан IV                  CH3     H       o-CH3-Ph-N=N-     Para Red (Пара Ред)       H       H       NO2

Рис. 1 Структура непищевых красителей Судан I-IV и Para Red (Пара Ред)

Рисунок не приводится.

3. Принцип метода определения красителей Судан I-IV и Para Red

Обнаружение и определение содержания непищевых красителей Судан I-IV и Para Red (Пара Ред) проводится методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с диодно-матричным детектированием (при длине волны 504 нм). В качестве арбитражного метода используют метод ВЭЖХ с масс-детектированием (по молекулярным и дочерним ионам, — см. таблицу 1).

Таблица 1

Параметры масс-детектирования представлены

   Наименование     Молекулярные      Энергия    Основные дочерние                        ионы, m/z      разрушения       ионы, m/z                                                                                                      +                                            Para Red        294 (M+H )            0,9      277     156     -                                                                                                  +                                            Судан-I         249 (M+H )            1,0      232     156     -                                                                                                  +                                            Судан-II        277 (M+H )            1,2      260     156    120                                                                                                 +                                            Судан-III       352 (M+H )            1,2      197     336    156                                                                                                 +                                            Судан-IV        382 (M+H )            1,2      224     364    156   

4. Средства измерения, материалы и реактивы

• Высокоэффективный жидкостной хроматограф.
• Хроматографическая колонка C18, 5мю, 4,6×250 мм.
• Ультразвуковая баня.
• Весы лабораторные общего назначения с пределом взвешивания 100 г и погрешностью + 0,0001 г.
• Дистиллятор.
• Установка для фильтрования и дегазирования подвижной фазы.
• pH-метр лабораторный.
• Центрифуга лабораторная ОПН-8 8000 об./мин.
• Мембранный фильтр с диаметром пор 0,45 мкм.
• Пипетки 2-1-2-1 или 1-1-2-1, 2-1-2-10 или 2-2-2-10 или 3-2-2-10 по ГОСТ 29227.
• Колбы мерные К 1-50-1, К 1-50-2 по ГОСТ 1770-74.
• Вода дистиллированная.
• Ацетонитрил для жидкостной хроматографии.
• Тетрагидрофуран для жидкостной хроматографии.
• Трифторуксусная кислота квалификации «ОСЧ».
• Ацетон квалификации «ХЧ».5. Определение содержания Суданов I-IV и Para Red методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

5.1. Подготовка стандартных растворов

Навеску стандартного вещества около 0,02 г (с точностью 0,0001 г) помещают в мерную колбу на 100 мл, добавляют 30 мл 95% этанола, интенсивно встряхивают, при необходимости озвучивают на ультразвуковой бане до полного растворения вещества. После этого объем доводят до метки 95% этанолом (основной раствор). В мерную колбу на 50 мл помещают 1 мл основного раствора и доводят объем до метки 95% этанолом (рабочий раствор). Полученный рабочий раствор фильтруют через фильтр с диаметром пор 0,45 мкм. Приготовленные стандартные растворы хранят в прохладном месте в течение 1 месяца.

5.2. Подготовка проб для анализа

Около 1,0 г (точная навеска) образца помещают во флакон, объемом 20 мл с завинчивающейся крышкой, добавляют 10 мл ацетона, интенсивно встряхивают в течение 2 минут и озвучивают на ультразвуковой бане в течение 5 минут. После озвучивания образец снова встряхивают и центрифугируют на 6000 об./мин. После центрифугирования супернатант отбирают и исследуют. При необходимости отобранный супернатант фильтруют через фильтр с диаметром пор 0,45 мкм. При подготовке контрольных образцов указанным способом извлекается более 95% добавленного количества каждого из исследуемых красителей.

5.3. Приготовление подвижной фазы

При постоянном перемешивании к бидистиллированной воде добавляют по каплям трифторуксусную кислоту до pH = 2,4 и фильтруют через фильтр с диаметром пор 0,45 мкм. Подвижная фаза хранится в холодильнике при температуре 2-8 град. C не более 3 месяцев.

5.4. Проведение анализа ВЭЖХ

Идентификацию компонентов на хроматограмме осуществляют путем сравнения со временем удерживания стандарта красителя, УФ и видимого спектра. Для подтверждения рекомендуется сравнивать также молекулярные массы каждого компонента и его дочерних ионов. Идентификация красителей Судан I-IV и Para Red только по времени удерживания не будет являться достоверной, ввиду сложного матрикса исследуемых объектов, и наличия природных компонентов, обладающих сходными спектральными характеристиками и хроматографическим поведением.

5.5. Условия хроматографического анализа

Колонка 5u C18(2), 5мю, 4,6×250 мм
Приготовление подвижной фазы: бидистиллированную воду доводят трифторуксусной кислотой до pH 2,4 (мл на 1 л бидистиллированной воды). Подвижная фаза: смесь ацетонитрила (А) и бидистиллированной воды, подкисленной трифторуксусной кислотой до pH = 2,4 (Б). Оптимальным является градиентное элюирование смесью ацетонитрила (А) и бидистиллированной воды, подкисленной трифторуксусной кислотой до pH = 2,4 (Б): 0 мин. — 80% (А), 10 мин. — 98%(А) (градиент линейный), 20 мин. — 98%(А), 21 мин. — 80%(А). Регенерация колонки занимает не менее 9 мин. Общее время анализа составляет 30 минут. В случае использования только диодно-матричного детектора вместо бидистиллированной воды, подкисленной трифторуксусной кислотой до pH = 2,4 допускается использование бидистиллированной воды. Также возможно использование изократического элюирования смесью ацетонитрила — бидистиллированной воды с содержанием ацетонитрила 90-95% (в зависимости от параметров колонки). Для полной регенерации колонки следует использовать подвижную фазу на основе тетрагидрофурана, обладающего такой же элюирующей силой, как и ацетон. Скорость подачи подвижной фазы: 1,0 куб. см/мин. Детектирование: лямбда = 504 нм.
Объем вводимой пробы 5 мкл.
Порядок выхода и параметры количественного определения непищевых красителей Судан I-IV и Para Red приведены в таблице 2. Пример хроматограммы смеси стандартов Судан I-IV и Para Red представлен на рисунке 2 (не приводится). Проведение количественного определения красителей Судан I-IV и Para Red не является обязательным, т.к. их применение в пищевых продуктов не допускается, поскольку они являются не пищевыми веществами, и их присутствие в пределах обнаружения данного метода является основанием для запрещения продукции к реализации. Пределы обнаружения красителей Судан 1-4 и Пара Ред приведены в Таблице 2.

Таблица 2

Пределы обнаружения непищевых красителей Судан I-IV и Пара Ред в специях, пряностях, продуктах их переработки и БАД к пище

N Наименование Предел обнаружения на Предел обнаружения

         красителя      диодной матрице,    на масс-детекторе,                              мг/кг                 мг/кг                                                                         1.  Para Red               0,5                  0,5                                                                           2.  Судан-I                0,5                  0,5                                                                           3.  Судан-II               0,5                  0,5                                                                           4.  Судан-III              0,5                  0,5                                                                           5.  Судан-IV               0,5                  0,5          

Количественное определение <*>

<*> Проведение количественного определения красителей Судан I-IV и Para Red не является обязательным, т.к. их применение в пищевых продуктов не допускается.

Количественное определение проводят абсолютной градуировкой. Содержание красителей Судан I-IV и Para Red проводят по следующей формуле:

                                    S2 x C1 x V                         C, мг/кг = -----------,                                      S1 x m

где:
C, мг/кг — содержание красителя, мг/кг. C1 — концентрация красителя в стандартном растворе, мкг/мл. S1 — площадь пика красителя в стандартном растворе. S2 — площадь пика красителя в определяемом образце. V — объем раствора образца, мл.
m — масса навески, г.

Таблица 3

Основные метрологические показатели

N Наименование Граница относительной Стандартное отклонение

                   погрешности (+/- дельта) повторяемости (сигма ) %                         в % при Р = 0,95                        r                                                                           1.  Para Red               2,1                      3,2                                                                                   2.  Судан-I                3,6                      3,5                                                                                   3.  Судан-II               2,8                      3,8                                                                                   4.  Судан-III              3,3                      4,9                                                                                   5.  Судан-IV               3,9                      4,3             

Таблица 4

Параметры определения непищевых красителей Судан I-IV и Para Red

   N   Наименование       Время                             удерживания,                             мин.                                             1.  Para Red             6,2                                              2.  Судан-I              7,5                                              3.  Судан-II             10,9                                             4.  Судан-III            12,9                                             5.  Судан-IV             15,5       

Рис. 2. Пример хроматограммы смеси стандартов Судан I-IV и Para Red

Рисунок не приводится.

ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА ПО НАДЗОРУ В СФЕРЕ
ЗДРАВООХРАНЕНИЯ И СОЦИАЛЬНОГО РАЗВИТИЯ

ПИСЬМО

5 февраля 2009 г.

N 01И-51/09

О ПРИОСТАНОВЛЕНИИ ОБРАЩЕНИЯ ЛЕКАРСТВЕННОГО СРЕДСТВА

Федеральная служба по надзору в сфере здравоохранения и социального развития на основании информации, поступившей от Территориального Управления Росздравнадзора по Курганской области о выявлении неблагоприятных побочных реакций при применении лекарственного препарата «Милдронат, раствор для инъекций 0,5 г (ампулы) 5 мл N 10» серии 260808, производства ЗАО «Фарм Фирма Сотекс», Россия, приостанавливает обращение указанной серии лекарственного средства на территории Российской Федерации. Федеральная служба по надзору в сфере здравоохранения и социального развития предлагает субъектам обращения лекарственных средств провести проверку наличия указанной серии лекарственного средства, о результатах которой проинформировать территориальный орган Росздравнадзора. Территориальным органам Росздравнадзора провести мероприятия в соответствии с Порядком, предусмотренным письмом Росздравнадзора от 08.02.2006 N 01И-92/06 «Об организации работы территориальных управлений Росздравнадзора с информацией о недоброкачественных и фальсифицированных лекарственных средствах».

Руководитель
Н.В.ЮРГЕЛЬ