<Письмо> Роспотребнадзора от 17.08.2005 N 0100/6641-05-32 «О диагностике гриппа A/H5N1/»

ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА ПО НАДЗОРУ В СФЕРЕ ЗАЩИТЫ ПРАВ ПОТРЕБИТЕЛЕЙ И БЛАГОПОЛУЧИЯ ЧЕЛОВЕКА

ПИСЬМО

17 августа 2005 г.

N 0100/6641-05-32

О ДИАГНОСТИКЕ ГРИППА A/H5N1/

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека информирует о последних разработках в области диагностики вируса гриппа птиц. В настоящее время внедрены в практику разработанные в Санкт-Петербургском НИИ гриппа РАМН диагностикумы из вируса гриппа A(H5) для определения антител в сыворотках людей и изучения популяционного иммунитета в РТГА (диагностикумы активно взаимодействуют с референс-сыворотками к современным азиатским штаммам «птичьего» гриппа, включенными в состав наборов ВОЗ). По вопросам приобретения обращаться в НИИ гриппа РАМН по адресу: 197376, г. Санкт-Петербург, ул. Проф. Попова, 15/17, тел. (8-812)234-62-11, факс (8-812)346-12-70, e-mail: [email protected]. В Центральном НИИ эпидемиологии разработана новая диагностическая тест-система для выявления РНК вируса гриппа A(H5) методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) — «АмплиСенс Influenza virus A H5/H7», которая успешно себя зарекомендовала при исследовании биологического материала, поступившего из регионов эпизоотий птиц в Алтайском крае, Курганской, Новосибирской, Тюменской и Омской областях. Диагностические препараты целесообразно использовать для проведения быстрой диагностики в случае подозрения на заболевание гриппом A(H5) в первую очередь среди работников птицеводческих хозяйств. По вопросам приобретения тест-системы обращаться в Центральный НИИ эпидемиологии по адресу: 111123 Москва, ул. Новогиреевская, 3а, тел.(095)8 926 208 39 69 (Тулянкина Ю.).

Заместитель Руководителя
Л.П.ГУЛЬЧЕНКО

Приложение

О ПОРЯДКЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ТЕСТ-СИСТЕМ,
РАЗРАБОТАННЫХ ФГУН ЦНИИЭ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ РНК ВИРУСА ГРИППА A СУБТИПОВ H5 И H7

1. «АмплиСенс Influenza virus A H5/H7» ООО «ИнтерлабСервис» кат. N TV33-50-R0.5 (стоимость 2830 руб.) ООО «ИнтерлабСервис» кат. N TV33-50-R0.2 (стоимость 2990 руб.)

Назначение.
Тест-система «АмплиСенс Influenza virus A H5/H7» предназначена для выявления РНК вируса гриппа A и идентификации субтипов H5 и H7 методом обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции с детекцией методом электрофореза.

Комплектация.
Тест-система состоит из четырех комплектов реагентов: Комплект N 1 — «РИБО-сорб-50».
Комплект реагентов для выделения РНК из исследуемого материала, рассчитан на выделение РНК из 50 проб, включая контрольные. Комплект N 2 — «PEBEPTA-L-50» Комплект реагентов для получения к ДНК на матрице РНК, рассчитан на 60 реакций, включая контрольные. Комплект N 3 — «АмплиСенс-50-R»
Комплект реагентов для амплификации участков к ДНК (проведения ПЦР), рассчитан на 55 реакций, включая контрольные. Реагенты находятся в реакционных пробирках объемом 0,5 мл или 0,2 мл (55 штук). Комплект N 4 — «ЭФ-200»
Комплект реагентов для электрофоретического анализа амплифицированной к ДНК, рассчитан на электрофоретический анализ 240 образцов (из расчета 100 мл геля — 5 рядов по 24 лунки). Тест-система рассчитана на одновременное исследование 45 образцов или 5 исследований по 7 образцов.

Транспортирование.
При температуре от 2 до 20 град. C в течение суток (кроме комплекта N 2). Комплект N 2 транспортировать в термосе со льдом в течение суток.

Хранение.
Комплекты N 1 и N 3 хранятся при температуре от 2 до 8 град. C. Комплект N 2 хранится при температуре минус 20 град. C. Комплект N 4 хранится при температуре от 18 до 25 град. C в темном месте.

Срок годности. 6 месяцев с момента производства. Длительность хранения с момента начала использования тест-системы ограничена сроком годности.

2. «АмплиСенс Influenza virus A H5/H7-FEP» ООО «ИнтерлабСервис» кат. N TV33-50-R0.5 FEP (стоимость 3420 руб.)

Назначение.
Тест-система «АмплиСенс Influenza virus A H5/H7-FEP» предназначена для выявления РНК вируса гриппа A и идентификации субтипов H5 и H7 методом обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции с гибридизационно-флуоресцентной детекцией после окончания ПЦР.

Комплектация.
Тест-система состоит из трех комплектов реагентов: Комплект N 1 — «РИБО-сорб-50»
Комплект реагентов для выделения РНК из исследуемого материала, рассчитан на выделение РНК из 50 проб, включая контрольные. Комплект N 2 — «PEBEPTA-L-50»
Комплект реагентов для получения к ДНК на матрице РНК, рассчитан на 60 реакций, включая контрольные. Комплект N 3 — «АмплиСенс-50-FEP»
Комплект реагентов для амплификации участков к ДНК (проведения ПЦР), рассчитан на 55 реакций амплификации, включая контрольные. Реагенты находятся в реакционных пробирках объемом 0,5 мл (55 штук). Тест-система рассчитана на одновременное исследование 45 образцов или 5 исследований по 7 образцов.

Транспортирование.
При температуре от 2 до 20 град. C в течение суток (кроме комплекта N 2). Комплект N 2 транспортировать в термосе со льдом в течение суток.

Хранение.
Комплект N 1 хранится при температуре от 2 до 8 град. C. Комплект N 2 хранится при температуре минус 20 град. C. Комплект N 3 хранится в темном месте при температуре от 2 до 8 град. C.

Срок годности. 3 месяца с момента производства. Длительность хранения с момента начала использования тест-системы ограничена сроком годности.

Материал для исследования.
Материал от людей:
— мазки из полости носа и ротоглотки;
— смывы из полости носа и ротоглотки;
— секционный материал.
Взятие мазков из полости носа.
Мазки (слизь) берут сухими стерильными зондами с ватными тампонами. Зонд с ватным тампоном вводят легким движением по наружной стенке носа на глубину 2-3 см до нижней раковины. Затем зонд слегка опускают книзу, вводят в нижний носовой ход под нижнюю носовую раковину, делают вращательное движение и удаляют вдоль наружной стенки носа. После забора материала тампон (рабочую часть зонда с ватным тампоном) помещают в стерильную одноразовую пробирку с 500 мл стерильного физиологической раствора или раствора фосфатного буфера. Конец зонда отламывают или отрезают, с расчетом, чтобы он позволил плотно закрыть крышку пробирки. Пробирку с раствором и рабочей частью зонда закрывают. Взятие мазков из ротоглотки.
Мазки из ротоглотки берут сухими стерильными зондами с ватными тампонами вращательными движениями с поверхности миндалин, небных дужек и задней стенки ротоглотки после предварительного полоскания полости рта водой. После забора материала тампон (рабочую часть зонда с ватным тампоном) помещают в стерильную одноразовую пробирку с 500 мл стерильного физиологического раствора или раствора фосфатного буфера. Конец зонда отламывают или отрезают, с расчетом, чтобы он позволил плотно закрыть крышку пробирки. Пробирку с раствором и рабочей частью зонда закрывают. Получение смывов из полости носа.
Манипуляции производят в положении больного сидя с отклоненной назад головой. Для получения смыва из полости носа в оба носовых хода поочередно с помощью зонда или одноразового шприца вводят по 3-5 мл теплого стерильного изотонического раствора натрия хлорида. Промывную жидкость из обоих носовых ходов собирают через воронку в одну стерильную пробирку. Не допускается повторное использование воронки без предварительного автоклавирования. Получение смывов из ротоглотки.
Перед манипуляцией необходимо предварительное полоскание полости рта водой. После этого проводят тщательное полоскание ротоглотки (в течение 10-15 сек.) 8-10 мл изотонического раствора натрия хлорида. Жидкость собирают через воронку в стерильную пробирку. Не допускается повторное использование воронки без предварительного автоклавирования.

Материал от животных:
— фекалии (4-5 г) от больных животных в стерильных контейнерах; — мазки из клоаки берут сухими стерильными зондами с ватными тампонами. После забора материала тампон (рабочую часть зонда с ватным тампоном) помещают в стерильную одноразовую пробирку с 500 мл стерильного физиологического раствора или раствора фосфатного буфера. Конец зонда отламывают или отрезают, с расчетом, чтобы он позволил плотно закрыть крышку пробирки. Пробирку с раствором и рабочей частью зонда закрывают; — трахеальные смывы получают с помощью стерильного физиологического раствора; — внутренние органы (фрагменты трахеи и легких, селезенка, мозг) в одноразовых стерильных контейнерах. Допускается хранение вышеперечисленного материала до проведения исследования в течение суток при температуре от 2 град. C до 8 град. C или 1 неделю — при температуре минус 20 град. C.

Подготовка исследуемого материала.
Все манипуляции, связанные с подготовкой проб, проводятся пипеточными дозаторами переменных объемов (типа «Ленпипет») с использованием одноразовых полипропиленовых пробирок на 1,5 мл (эппендорф) и 10,0 мл (ПО «Ленполимер») и наконечников с аэрозольным барьером. Одноразовая пластиковая посуда (пробирки, наконечники) должна сбрасываться в специальный контейнер, содержащий дезинфицирующий 10%-ный раствор хлорной извести, 5%-ный раствор хлорамина Б или 1Н раствор соляной кислоты. После 3-часовой выдержки раствор выливают в канализацию, а отработанный пластик выбрасывают в мусорный контейнер. Мазки и смывы используются без предварительной обработки. Внутренние органы животных и секционный материал гомогенизируют с использованием стерильных фарфоровых ступок и пестиков, затем готовят 10% суспензию на стерильном физиологическом растворе или фосфатном буфере. Суспензию переносят в пробирку на 1,5 мл и центрифугируют при 10000 оборотах в течение 30 секунд. Супернатант используют для экстракции РНК. Фекалии животных.

Для исследования используют 4-5 г фекалий. Готовят 10% суспензию на стерильном физиологическом растворе, тщательно ресуспендируют и декантируют в течение 10 мин. Надосадок переносят

3 в эппендорф и центрифугируют при 12 x 10 в течение 5 мин. Супернатант используют для экстракции РНК.