"МУК 4.2.2870-11. 4.2. Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы. Порядок организации и проведения лабораторной диагностики холеры для лабораторий территориального, регионального и федерального уровней. Методические указания" (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 25.05.2011) Приказ Департамента здравоохранения г. Москвы от 24.05.2011 N 452 "О внесении изменения в график закрытия родильных домов и акушерских отделений на профилактическую санитарно-гигиеническую обработку в 2011 году"

Документ введен в действие с 1 июня 2011 года. Текст документа

Утверждаю
Руководитель Федеральной службы
по надзору в сфере защиты
прав потребителей
и благополучия человека,
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации
Г.Г.ОНИЩЕНКО
25 мая 2011 г.

Дата введения: 1 июня 2011 г.

4.2. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ.
БИОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

ПОРЯДОК
ОРГАНИЗАЦИИ И ПРОВЕДЕНИЯ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ХОЛЕРЫ ДЛЯ ЛАБОРАТОРИЙ ТЕРРИТОРИАЛЬНОГО, РЕГИОНАЛЬНОГО И ФЕДЕРАЛЬНОГО УРОВНЕЙ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
МУК 4.2.2870-11

Разработаны Федеральным казенным учреждением здравоохранения «Ростовский-на-Дону научно-исследовательский противочумный институт» Роспотребнадзора (Ю.М.Ломов, Э.А.Москвитина, Н.Р.Телесманич, В.Д.Кругликов, И.Я.Черепахина, В.В.Балахнова, И.В.Архангельская); Федеральным казенным учреждением здравоохранения «Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб» Роспотребнадзора (В.В.Кутырев, Е.С.Казакова, И.Н.Шарова, Н.А.Осина, С.А.Щербакова, Н.И.Смирнова); Федеральным казенным учреждением здравоохранения «Иркутский научно-исследовательский противочумный институт» Роспотребнадзора (С.В.Балахонов, Л.Я.Урбанович, Л.В.Миронова, Е.С.Куликалова, А.С.Кожевникова); Федеральным казенным учреждением здравоохранения «Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт» Роспотребнадзора (В.Н.Савельев); Федеральным казенным учреждением здравоохранения «Противочумный центр» Роспотребнадзора (В.Е.Безсмертный, С.М.Иванова); Федеральным бюджетным учреждением здравоохранения «Федеральный центр гигиены и эпидемиологии» Роспотребнадзора (В.Г.Сенникова, М.В.Зароченцев, В.В.Мордвинова); Федеральным государственным учреждением науки Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии Роспотребнадзора (И.А.Дятлов, С.Ф.Бикетов, Е.И.Баранова, М.В.Храмов, Е.А.Тюрин); Федеральным государственным бюджетным учреждением «ГИСК им. Л.А.Тарасевича» Минздравсоцразвития (И.В.Борисевич, Л.В.Саяпина).
Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 25 мая 2011 г. и введены в действие с 1 июня 2011 г.
Введены впервые.
Область применения

1.1. Настоящие методические указания определяют порядок организации и проведения лабораторной диагностики холеры для лабораторий территориального, регионального и федерального уровней, формы и методы их взаимодействия, номенклатуру и объем исследования, требования к лабораториям, специалистам и персоналу, участвующим в выполнении исследований, материально-техническому обеспечению исследований, биологической безопасности проведения работ. 1.2. Настоящие методические указания предназначены для специалистов органов и учреждений, осуществляющих государственный санитарно-эпидемиологический надзор в Российской Федерации, специалистов противочумных учреждений, органов управления здравоохранением и лечебно-профилактических учреждений.

2. Нормативные ссылки

2.1. Федеральный закон от 30.03.1999 N 52-ФЗ «О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения». 2.2. Постановление Правительства Российской Федерации от 29.10.2007 N 720 «О внесении изменений в п. 5 Положения о лицензировании деятельности, связанной с использованием возбудителей инфекционных заболеваний, утвержденного Постановлением Правительства Российской Федерации от 22.01.2007 N 31». 2.3. Постановление Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 24.02.2009 N 11 «О представлении внеочередных донесений о чрезвычайных ситуациях в области общественного здравоохранения санитарно-эпидемиологического характера» (зарегистрировано в Минюсте РФ 10.04.2009 N 13745). 2.4. Приказ Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации от 07.07.2009 N 415н «Об утверждении квалификационных требований к специалистам с высшим и послевузовским медицинским и фармацевтическим образованием в сфере здравоохранения» (зарегистрирован в Минюсте РФ 09.07.2009 N 14292). 2.5. Приказ Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека от 17.03.2008 N 88 «О мерах по совершенствованию мониторинга за возбудителями инфекционных и паразитарных болезней». 2.6. Санитарные правила «Порядок учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности». СП 1.2.036-95 (утв. Постановлением Госкомсанэпиднадзора РФ от 28.08.1995 N 14). 2.7. Санитарно-эпидемиологические правила и нормативы «Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами». СанПиН 2.1.7.2790-10 (утв. Постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 09.12.2010 N 163. Зарегистрировано в Минюсте РФ 17.02.2011 N 19871). 2.8. Санитарно-эпидемиологические правила «Безопасность работы с микроорганизмами I-II групп патогенности (опасности)». СП 1.3.1285-03 (утв. Постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 15.04.2003 N 42 «О введении в действие санитарно-эпидемиологических правил СП 1.3.1285-03». Зарегистрировано в Минюсте РФ 10.05.2003 N 4545). 2.9. Санитарно-эпидемиологические правила «Порядок выдачи санитарно-эпидемиологического заключения о возможности проведения работ с возбудителями инфекционных заболеваний человека I-IV групп патогенности (опасности), генно-инженерно-модифицированными микроорганизмами, ядами биологического происхождения и гельминтами». СП 1.3.1318-03 (утв. Постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 30.04.2003 N 85 «О введении в действие санитарно-эпидемиологических правил СП 1.2.1318-03». Зарегистрировано в Минюсте РФ 19.05.2003 N 4558). 2.10. Санитарно-эпидемиологические правила «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней». СП 1.3.2322-08 (утв. Постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 28.01.2008 N 4 «Об утверждении санитарно-эпидемиологических правил СП 1.3.2322-08». Зарегистрировано в Минюсте РФ 21.02.2008 N 11197). 2.11. Санитарно-эпидемиологические правила «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней». Дополнения и изменения N 1 к СП 1.3.2322-08″. СП 1.3.2518-09 (утв. Постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 02.06.2009 N 42. Зарегистрировано в Минюсте РФ 08.07.2009 N 14280). 2.12. Санитарно-эпидемиологические правила «Санитарная охрана территории Российской Федерации». СП 3.4.2318-08 (утв. Постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 22.01.2008 N 3 «Об утверждении санитарно-эпидемиологических правил СП 3.4.2318-08». Зарегистрировано в Минюсте РФ 03.04.2008 N 11459). 2.13. Санитарно-эпидемиологические правила «Профилактика холеры. Общие требования к эпидемиологическому надзору за холерой на территории Российской Федерации». СП 3.1.1.2521-09 (утв. Постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 09.06.2009 N 43 «Об утверждении санитарно-эпидемиологических правил СП 3.1.1.2521-09″. Зарегистрировано в Минюсте РФ 09.07.2009 N 14285). 2.14. Методические указания «Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности»: МУ 1.3.2569-09. 2.15. Методические указания «Контроль диагностических питательных сред по биологическим показателям для возбудителей чумы, холеры, сибирской язвы, туляремии»: МУ 3.3.2.2124-06. 2.16. Методические указания «Лабораторная диагностика холеры»: МУК 4.2.2218-07. 2.17. Методические указания «Профилактика холеры. Организационные мероприятия. Оценка противоэпидемической готовности медицинских учреждений к проведению мероприятий на случай возникновения очага холеры»: МУ 3.1.1.2232-07. 2.18. Методические указания «Определение чувствительности возбудителей опасных бактериальных инфекций (чумы, сибирской язвы, холеры, туляремии, бруцеллеза, сапа и мелиоидоза) к антибактериальным препаратам»: МУК 4.2.2495-09. 2.19. Методические указания «Методы контроля бактериологических питательных сред»: МУК 4.2.2316-08. 2.20. Методические указания «Серологические методы в диагностике холеры»: МУК 4.2.2315-08. Дополнения к МУК 4.2.2218-07 «Лабораторная диагностика холеры».

3. Перечень сокращений

АБП — антибактериальные препараты
ИФА — иммуноферментный анализ
ЛПУ — лечебно-профилактическое учреждение МУ — методические указания
МУК — методические указания по контролю МФА — метод флуоресцирующих антител
ООИ — особо опасные инфекции
ПБА — патогенный биологический агент
ПЦР — полимеразная цепная реакция
ПЧС — противочумная станция
РАО — реакция агломерации объемная
РА — реакция агглютинации
РИВ — реакция иммобилизации вибрионов
РВА — реакция вибриоцидных антител
СанПиН — санитарные правила и нормативы СП — санитарные правила
ИХ-тест — иммунохроматографический тест

4. Общие положения

Характеристика болезни и возбудителя холеры Холера — особо опасная инфекционная болезнь с диарейным синдромом, фекально-оральным механизмом передачи возбудителя инфекции, водным, пищевым и контактным путями распространения. Возбудитель холеры — холерный вибрион относится к семейству Vibrionaceae, роду Vibrio и виду Vibrio cholerae. К виду Vibrio cholerae отнесены грамотрицательные, аспорогенные, полиморфные, слегка изогнутые или прямые палочки длиной 1,5-3,0 мкм и шириной 0,2-0,6 мкм, с одним полярно расположенным жгутиком, который длиннее тела клетки в 2-3 раза. Холерные вибрионы быстро размножаются в 1%-й пептонной воде, образуя через 6-8 ч на поверхности среды нежную пленку. Через 24 ч роста пленка становится грубой, среда слабо мутнеет. На поверхности плотного питательного агара (щелочной агар, pH 8,0) через 18-24 ч инкубации рост холерных вибрионов проявляется в формировании крупных (2-3 мм), гладких, прозрачных колоний с ровным краем, которые легко эмульгируются в физиологическом растворе. В косо проходящем свете они отсвечивают голубоватым цветом. На элективной среде TCBS на зеленом фоне среды колонии вибрионов круглые, гладкие с ровным краем, плоские, желтого цвета. При более длительной инкубации желтый цвет колоний часто переходит в зеленый цвет. Холерные вибрионы образуют индофенолоксидазу — тест дифференциации от представителей семейства Enterobacteriaceae, ферментируют глюкозу в аэробных и анаэробных условиях до кислоты без газа — тест дифференциации от представителей родов Pseudomonadaceae, декарбоксилируют лизин и орнитин, но не дигидролизуют аргинин — тесты дифференциации от представителей других семейств (Aeromonas spp., Plesiomonas spp., Enhydrobacter spp., Photobacterium spp.) и отдельных видов рода Vibrio. Помимо этого, холерные вибрионы расщепляют до кислоты без газа сахарозу, маннозу, крахмал, маннит, не расщепляют арабинозу, салицин, дульцит, инозит. В отдельных случаях ферментацию маннозы холерными вибрионами возможно определить только в анаэробных условиях. Холерные вибрионы восстанавливают нитраты в нитриты, образуют индол, разжижают желатину, продуцируют нейраминидазу, лецитиназу, триглицероллипазу. V. cholerae по наличию специфического O-антигена распределяются на серологические группы. В настоящее время известно 206 серологических O групп холерных вибрионов. Возбудителями холеры являются холерные вибрионы O1 и O139 серологических групп. Холерные вибрионы других не O1/не O139 серологических групп могут вызывать спорадические или групповые случаи диарей, не склонные к эпидемическому распространению. Холерные вибрионы O1 серогруппы по различиям в полисахаридном компоненте O-антигена делятся на три серовара: Огава, Инаба и Гикошима. Серовар Гикошима не стабилен и реверсирует в один из основных сероваров, преимущественно — Огава. Известен R-антиген холерных вибрионов, описаны штаммы, агглютинирующиеся RO сывороткой и не агглютинирующиеся сыворотками O1, Огава или Инаба. У холерных вибрионов имеется общий жгутиковый H-антиген. Холерные вибрионы в пределах O1 серогруппы делятся на два биовара: классический и эльтор, имеющие существенные фенотипические и генетические отличия. Деление на биовары основывается на чувствительности к холерным диагностическим бактериофагам — классическому и эльтор, чувствительности к 50 ед./мл полимиксина B, агглютинации куриных эритроцитов, образовании ацетилметилкарбинола в реакции Фогес-Проскауэра.

Холерные вибрионы являются носителями умеренных фагов с низкой литической активностью. Известны фаги, активные в отношении холерных вибрионов O1 и не O1, включая O139 серологическую группу, а также с более узким спектром литического действия, в пределах отдельных групп штаммов,

+ —
например ctx и ctx холерных вибрионов. Одним из основных факторов вирулентности (и эпидемической значимости) холерных вибрионов, определяющих тяжесть клинической картины при холере, является холерный энтеротоксин или СТ (от англ. — cholera toxin), синтез которого контролируется кластером генов ctxAB. Описан ряд дополнительных токсинов: Zot и Ace токсины, цитотоксический комплекс RTX, цитототонический фактор Cef, термостабильный токсин ST, NMDCY токсин, шигаподобный токсин Slt, WO7 токсин, cholix toxin. Не менее важным фактором вирулентности холерных вибрионов являются токсин-корегулируемые пили адгезии или TCP (от англ. — toxin-coregulated pilus) — ключевой фактор колонизации. За синтез пилей TCP отвечают гены tcpA-F, среди них ген tcpA — за биосинтез основной субъединицы пилей. Нетоксигенные штаммы холерных вибрионов обладают гемолитической активностью, которая включает активность нескольких компонентов: рициноподобного галактозоспецифичного лектина (hlyA) и комплекса ферментов гидролаз, ведущим из которых является липаза (lipA). Гемолитическая активность является ведущим фактором патогенности у штаммов возбудителей холеры O1 и O139 серогрупп, не имеющих ген холерного токсина. Такие штаммы могут вызывать спорадические случаи диареи различной степени тяжести, но не склонны к широкому распространению. Способность к гемолизу эритроцитов барана в тесте Грейга, коррелирующая с липазной активностью, является визуализированным тестом, свидетельствующим о том, что штамм не может вызывать тяжелую клиническую картину холеры и не способен к широкому эпидемическому распространению. Понятие эпидемической значимости базируется на определении комплекса показателей: — прямые — выявление гена холерного токсина в ПЦР и определение активности его продукции на кроликах-сосунках; — косвенные — отсутствие гемолитической, липазной активности, поздняя ферментация маннита, высокая адгезивная активность in vitro (на модели эритроцитов). Холерные вибрионы имеют две хромосомы: первую (или большую размером 2 960 т.п.н.) и вторую (или малую размером 1 070 т.п.н.). На большой хромосоме V. cholerae расположены гены патогенности: ctxAB, кодирующий биосинтез CT, гены, определяющие продукцию дополнительных холерных токсинов, гены tcpA-F, кодирующие продукцию TCP, а также гены, необходимые для репликации, транскрипции, репарации ДНК, биосинтеза клеточной стенки и O-антигена. Биосинтез O1 антигена определяет кластер генов, обозначенный как wbe. Продукция O139 антигена кодируется кластером генов, также локализованном на большой хромосоме и имеющим обозначение wbf. Выявление с помощью ПЦР генов wbe и wbf, специфичных для холерных вибрионов O1 и O139 серологических групп, позволяет определить серогруппу возбудителя холеры. На малой хромосоме, помимо генов с неустановленной функцией, локализованы структурные гены hlyA, отвечающие за синтез термолабильного гемолизина, а также остров интегронов, содержащий гены, кодирующие антибиотикоустойчивость, и участвующий в приобретении новых генов. Следует отметить, что ген hlyA присутствует в хромосоме всех штаммов V. cholerae, как способных к биосинтезу термолабильного гемолизина, так и не продуцирующих этот белок. Однако в гене hlyA холерных вибрионов классического биовара, в отличие от такового V. cholerae эльтор, имеется делеция протяженностью 11 п.н., вследствие чего продукция гемолизина вибрионами этого биовара невозможна. Штаммы холерных вибрионов O1 и O139 серогрупп, содержащие гены ctxAB и tcpA-F, вызывают холеру и являются эпидзначимыми. Эти штаммы не лизируют эритроциты барана в пробе Грейга. Эпидемически не значимые штаммы холерных вибрионов, не содержащие генов ctxAB и tcpA-F, лизируют эритроциты барана в пробе Грейга. Нетоксигенные (не содержащие гена холерного токсина) ctxAB варианты холерных вибрионов O1, также как и других серогрупп могут вызывать спорадические (единичные) или групповые (при общем источнике инфицирования) заболевания, не склонные к эпидемическому распространению. Известна изменчивость холерных вибрионов по морфологии колоний и клеток, по образованию некультивируемых и Л-форм, по агглютинабельности диагностическими O, Инаба и Огава сыворотками (вплоть до полной утраты) и агглютинабельности RO сывороткой. Нередко сочетается изменчивость по культурально-морфологическим признакам, агглютинабельности холерными сыворотками и чувствительности к фагам. Холерные вибрионы O1 и O139 серогрупп, как правило, чувствительны к набору антибактериальных препаратов. Однако широкое применение антибактериальных препаратов в очагах холеры способствовало увеличению резистентности холерных вибрионов к ним. При проведении лабораторной диагностики холеры регламентируется использование зарегистрированных диагностических препаратов и тест-систем в соответствии с прилож. 4, позволяющих выявлять определенные фено- и генотипические признаки холерных вибрионов.

5. Порядок организации и проведения лабораторной диагностики холеры для лабораторий территориального уровня

5.1. Порядок организации и проведения
лабораторной диагностики холеры для лабораторий лечебно-профилактических учреждений

5.1.1. Требования к бактериологическим лабораториям лечебно-профилактических учреждений, осуществляющим диагностические исследования на холеру

Наличие разрешительных и регламентирующих работу документов Лечебно-профилактические учреждения, лаборатории которых осуществляют диагностические исследования на холеру, должны иметь лицензию на осуществление деятельности, связанной с использованием возбудителей III-IV групп патогенности (опасности). Лаборатории ЛПУ должны иметь санитарно-эпидемиологическое заключение о возможности проведения работ с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) в соответствии с действующими санитарными правилами о порядке выдачи санитарно-эпидемиологического заключения о возможности проведения работ с возбудителями инфекционных заболеваний человека I-IV групп патогенности (опасности), генно-инженерно-модифицированными микроорганизмами, ядами биологического происхождения и гельминтами. Учет, хранение, передача и транспортирование выделенных культур холерных вибрионов (подозрительных) должны осуществляться в соответствии с действующими нормативными документами о порядке учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности. Утилизация отходов должна осуществляться в соответствии с действующими санитарными правилами по сбору, хранению и удалению отходов лечебно-профилактических учреждений. Проведение исследований на всех этапах: отбор проб, их хранение, доставка в лабораторию, регистрация, порядок исследования, выдача результатов, взаимодействие с учреждениями Роспотребнадзора должны соответствовать требованиям действующих нормативных и распорядительных документов.

Требования к специалистам и вспомогательному персоналу, участвующим в выполнении исследований на холеру Исследования на холеру могут выполнять специалисты не моложе 18 лет с высшим и средним медицинским, биологическим образованием, окончившие соответствующие курсы по специальности «Бактериология», имеющие допуск к работе с ПБА III-IV групп на основании приказа руководителя учреждения. Специалисты должны повышать квалификацию не реже одного раза в пять лет и иметь сертификат специалиста. Инженерно-технический персонал, дезинфекторы и санитарки проходят специальную подготовку по месту работы в соответствии с должностными обязанностями. Необходимый уровень подготовки специалистов с высшим медицинским (биологическим) образованием и средним медицинским образованием, повышение их квалификации по лабораторной диагностике холеры представлен в прилож. 1. Требования к знаниям и умениям специалистов ЛПУ, выполняющих бактериологические исследования на холеру, приведены в прилож. 2.

Требования к обеспечению безопасности работы персонала Каждая бактериологическая лаборатория должна иметь пакет документов, определяющих режим безопасной работы сотрудников с учетом характера работ, особенностей технологии, свойств микроорганизмов. Документы должны быть согласованы с комиссией по контролю соблюдения требований биологической безопасности, специалистами по охране труда, противопожарным мероприятиям и утверждены руководителем учреждения. Результаты проверок знаний правил техники безопасности персонала при проведении работ фиксируются в специальном журнале. Все сотрудники должны выполнять требования по обеспечению безопасности работы с материалом, подозрительным или зараженным возбудителями инфекционных болезней III-IV групп патогенности (опасности) в соответствии с действующими нормативными документами.

Порядок организации внутреннего контроля качества лабораторных исследований Контроль качества диагностических исследований на холеру в лабораториях ЛПУ включает: — контроль качества питательных сред, диагностических препаратов, дистиллированной воды, химических реактивов и дезинфицирующих средств; — своевременную поверку средств измерений, аттестацию испытательного оборудования; — контроль качества стерилизации лабораторной посуды; — контроль работы паровых и суховоздушных стерилизаторов; — контроль работы бактерицидных ламп;
— контроль температурного режима работы холодильников и термостатов; — проверка состояния воздуха производственных помещений и боксов, температурного режима, влажности; — проверка санитарного состояния помещений, включая условия уборки, дезинфекции, контроль смывов с поверхностей и оборудования. Результаты контроля фиксируют в специальных журналах.

Правила ведения документации
Ведение лабораторной документации, включая регистрационные и рабочие журналы, осуществляют в соответствии с требованиями действующих нормативно-методических документов.

Требования к материальным ресурсам, необходимым для выполнения диагностических исследований на холеру Для проведения диагностических исследований на холеру в лабораториях ЛПУ должны быть в наличии: — питательные среды, зарегистрированные в установленном порядке (прилож. 3, 8); — диагностические препараты, зарегистрированные в установленном порядке (прилож. 4, 8); — химические реактивы (прилож. 5);
— приборы, оборудование, расходные материалы (прилож. 6).

5.1.2. Номенклатура и объем исследований

В лабораториях ЛПУ проводят диагностические исследования материала от лиц, подлежащих обследованию на холеру при проведении эпидемиологического надзора в соответствии с требованиями действующих санитарных правил по профилактике холеры, в периоды обследования дифференцированно для территорий, различных по типам эпидемических проявлений холеры. В лабораториях ЛПУ проводят диагностические исследования материала в следующем объеме: 1) посев на среды накопления и дифференциально-диагностические, выделение культуры, подозрительной на холерный вибрион по морфологическим признакам; 2) идентификация культуры, подозрительной на холерный вибрион, по следующим тестам: — ферментация на полиуглеводной среде;
— определение индофенолоксидазы;
— микроскопия мазка, окрашенного по Граму; — слайд-агглютинация с холерными диагностическими сыворотками; 3) экспресс и ускоренная диагностика: методы МФА и РИВ (при исследовании материала с подозрением на холеру).

5.1.3. Порядок лабораторной диагностики холеры в лабораториях лечебно-профилактических учреждений

Отбор и транспортировка проб клинического материала При проведении бактериологического анализа на холеру исследуется клинический материал: испражнения, рвотные массы, желчь и секционный материл от умерших, причиной смерти которых явились кишечные инфекции неустановленной этиологии. Отбор, упаковка и транспортирование проб клинического материала для исследования осуществляются в соответствии с действующими методическими указаниями по лабораторной диагностике холеры. Материал от больных забирает медицинский персонал ЛПУ немедленно при выявлении больного, до начала лечения антибиотиками. Кратность отбора проб — в соответствии с действующими санитарно-эпидемиологическими правилами по эпидемиологическому надзору за холерой. В зависимости от времени забора материала и времени работы лаборатории пробы на исследование отбирают в соответствии со следующей схемой: 1. При круглосуточном режиме работы лаборатории материал забирают в нативном виде, в 5-10 мл 1%-й пептонной воды pH 8,4 +/- 0,1 (транспортная среда) или в 50 мл 1%-й пептонной воды pH 8,4 +/- 0,1 (1-я среда накопления). 2. При односменной работе лаборатории:
а) при взятии материала в 6.00-10.00 ч утра и доставке в бактериологическую лабораторию до 10 ч утра материал забирают в 5-10 мл 1%-й пептонной воды (транспортная среда) или в 50 мл 1%-й пептонной воды (1-я среда накопления); б) при взятии материала после 10 ч утра и доставке в течение рабочего дня лаборатории материал забирают в 5-10 мл 1%-й пептонной воды (транспортная среда); в) при взятии материала по окончании рабочего дня лаборатории и доставке в лабораторию до 10 ч утра следующего рабочего дня материал забирают в 5-10 мл 1%-й пептонной воды (транспортная среда); г) при взятии материала в выходные дни лаборатории и доставке материала до 10 ч утра следующего рабочего дня материал забирают в 50 мл 1%-й пептонной воды с теллуритом калия (транспортная среда). Флаконы и пробирки с 1%-й пептонной водой должны быть этикетированы с указанием названия среды и даты ее изготовления. При этом 1%-я пептонная вода хранится при температуре не выше (10 +/- 0,2) °C. От больных тяжелой формой материал направляют в лабораторию нативным и в 1%-й пептонной воде. В транспортную среду вносят 1-2 мл или 1-2 г материала на 5-6 мл среды. Обильные водянистые испражнения и рвотные массы в количестве 10-20 мл отбирают из индивидуального судна в стерильные контейнеры объемом 60-100 мл стерильными ложками или автоматической пипеткой переменного объема. У больных легкими формами — 1-2 г испражнений собирают в стерильный контейнер объемом 60-100 мл или петлю (зонд) ректальную стерильную смачивают стерильным физиологическим раствором и вводят в прямую кишку на глубину 5-6 см. Материал помещают в пробирку с транспортной средой. Желчь берут при дуоденальном зондировании в лечебном учреждении. В отдельные полимерные контейнеры объемом 60 мл собирают две порции: из желчного пузыря и желчных протоков (B и C). Материал доставляют нативным. Пробы маркируют, обрабатывают снаружи дезинфицирующим раствором, упаковывают в полиэтиленовый пакет с застежкой-молнией, заполняют бланк-направление и помещают в контейнер (кейс) для транспортировки биологического материала на исследование. При необходимости пробы сохраняют при комнатной температуре (24,0 +/- 1,0 °C) в биксе, ящике, шкафу в специально выделенной комнате, закрывающейся на замок.

Исследование клинического материала
Профилактические исследования клинического материала на холеру проводят в течение рабочего дня, диагностические исследования материала от больного с подозрением на холеру, а также в случае выделения культуры, подозрительной на холерный вибрион — в условиях круглосуточного режима работы лаборатории с включением экспресс и ускоренных методов диагностики. При исследовании материала от больных холерой (подозрительных) среды накопления с ингибиторами не используются. Методы исследования клинического материала на холеру в лабораториях ЛПУ: бактериологический и ускоренные (слайд-агглютинация, РИВ и МФА). Все изолированные от людей культуры, подозрительные на холерные вибрионы, независимо от результатов слайд-агглютинации холерными сыворотками, передаются для дальнейшей идентификации в установленном порядке.

Исследование клинического материала на холеру при круглосуточном режиме работы лаборатории

I этап исследования

Посев нативного материала (испражнения, рвотные массы и др.) и материала, доставленного в транспортной среде, в первую жидкую среду накопления (1%-ю пептонную воду) и на плотные питательные среды: щелочной агар и элективную среду типа TCBS. Материал, доставленный в 5 мл 1%-й пептонной воды, полностью засевают в 50 мл среды накопления. При доставке материала в 50 мл 1%-й пептонной воды не позже 2 ч после забора пробу помещают в термостат на 6 ч (первая среда накопления). При доставке в более поздние сроки 5 мл материала засевают в 50 мл 1%-й пептонной воды. Материал от лиц, принимавших антибиотики, активные по отношению к возбудителю холеры, засевают в большой объем жидкой накопительной среды (200-300 мл) и на 2 чашки щелочного агара. Посевы инкубируют при 37 °C в течение 24 ч, производя высев через каждые 8-10 ч на пластинки щелочного агара. Вторую среду накопления при этом не используют. Постановка ускоренных методов исследования с нативным материалом: МФА и РИВ. При получении положительного результата в двух методах выдают устный предварительный положительный ответ по предусмотренной в учреждении схеме, в соответствии с действующими методическими указаниями по лабораторной диагностике холеры.

II этап исследования
(через 6-8 ч от начала исследования)

Высев с первой среды накопления на щелочной агар, элективную среду и во вторую среду накопления (1%-ю пептонную воду). Постановка ускоренных методов исследования с материалом из I среды накопления при отрицательных результатах в МФА и РИВ на I этапе исследования. Выдача устного предварительного положительного ответа при положительном результате в двух методах по предусмотренной схеме.

III этап исследования
(через 12-16 ч от начала исследования)

Высев из второй среды накопления на щелочной агар. Просмотр посевов на щелочном агаре, засеянных на I этапе исследования, в косо проходящем свете стереоскопического микроскопа. Производят отбор подозрительных колоний на полиуглеводную среду и щелочной или другой питательный агар для накопления культур. При наличии достаточного количества подозрительных колоний ставят следующие тесты: — определение индофенолоксидазы;
— микроскопия мазка, окрашенного по Граму; — слайд-агглютинация с сыворотками холерными O1 серогруппы (при положительном результате — с Инаба, Огава), RO, при отрицательном результате — с сывороткой O139 серогруппы; — постановка МФА, РИВ.
Выдача устного предварительного положительного ответа при положительном результате в двух методах (наличие индофенолоксидазы, положительный результат слайд-агглютинации, МФА или РИВ) по предусмотренной схеме.

IV этап исследования
(через 18-24 ч от начала исследования)

Просмотр посевов на щелочном агаре и на элективной среде, сделанных на I-II этапах исследования в косо проходящем свете стереоскопического микроскопа. Отбор колоний, подозрительных на колонии холерных вибрионов, постановка тестов, предусмотренных на III этапе исследования. Отсев подозрительных на холерные вибрионы колоний на одну из полиуглеводных сред и щелочной агар для накопления культуры. Выдача устного предварительного положительного ответа об обнаружении в исследуемом материале культур, подозрительных на холерные вибрионы O1, RO или O139 серогруппы на основании результатов следующих тестов: — характерные морфологические и культуральные признаки; — положительный тест на индофенолоксидазу; — положительная реакция слайд-агглютинации с соответствующими холерными диагностическими сыворотками; — положительные результаты ускоренной диагностики методами МФА и РИВ.

V этап исследования
(через 24-36 ч от начала исследования)

Отбор культур с характерным ростом на полиуглеводной среде и щелочном агаре, постановка тестов, предусмотренных на III этапе исследования. Выдача устного предварительного положительного ответа об обнаружении в исследуемом материале культур, подозрительных на холерные вибрионы O1, RO или O139 серогруппы на основании результатов следующих тестов: — характерные морфологические и культуральные признаки; — положительный тест на индофенолоксидазу; — положительная реакция слайд-агглютинации с соответствующими холерными диагностическими сыворотками; — положительные результаты ускоренной диагностики методами МФА и РИВ. Подготовка выделенной культуры к транспортированию. Передача выделенной культуры для идентификации в установленном порядке.

2. Исследование клинического материала на холеру при односменной работе лаборатории

В течение рабочей недели для отбора проб используют 1%-ю пептонную воду без теллурита калия в объеме 5-10 мл (транспортная среда) или 50 мл (среда накопления). В качестве 1-й или 2-й среды накопления используют 1%-ю пептонную воду (pH 8,4 +/- 0,1) с теллуритом калия в конечной концентрации 1:100 000 — 1:200 000 в соответствии с результатами его контроля.

1-й вариант. Клинический материал поступил в лабораторию до 10 ч утра. Время взятия материала — 6.00-10.00 ч утра.

I этап исследования

а) материал доставлен в транспортной среде (5-10 мл 1%-й пептонной воды) или нативным (испражнения, рвотные массы и др.). Посев материала в 50 мл 1%-й пептонной воды — 1-я среда накопления. Кроме того, нативный материал засевают на плотные питательные среды: щелочной агар и элективную среду типа TCBS. б) материал доставлен не позже 2 ч после забора в 50 мл 1%-й пептонной воды. Помещают в термостат на инкубацию как 1-ю среду накопления.

II этап исследования
через 6 ч (в течение 1-го рабочего дня)

Пересев с 1-й среды накопления во 2-ю среду накопления с теллуритом калия и высев на щелочной агар и элективную среду типа TCBS.

III этап исследования
через 24-26 ч от начала исследования (в начале 2-го рабочего дня)

Высев со 2-й среды накопления на щелочной агар и элективную среду типа TCBS. Просмотр посевов на щелочном агаре и элективной среде, засеянных на I и II этапах исследования, в косо проходящем свете стереоскопического микроскопа. Отсев колоний, подозрительных на колонии холерных вибрионов, на одну из полиуглеводных сред и щелочной агар для накопления культуры. При достаточном количестве подозрительные на холерные вибрионы колонии изучают с использованием следующих тестов: — определение индофенолоксидазы;
— микроскопия мазка, окрашенного по Граму; — слайд-агглютинация с сыворотками холерными O1 серогруппы (при положительном результате — с Инаба, Огава), RO и O139 серогруппы. Выдача устного предварительного положительного ответа об обнаружении в исследуемом материале культур, подозрительных на холерные вибрионы O1, RO или O139 серогруппы на основании результатов следующих тестов: — характерные морфологические и культуральные признаки; — положительный тест на индофенолоксидазу; — положительная реакция слайд-агглютинации с соответствующими холерными диагностическими сыворотками.

IV этап исследования
через 48-50 ч от начала исследования (в течение 3-го рабочего дня)

Отбор культур с характерным ростом на полиуглеводной среде и щелочном агаре, постановка тестов, предусмотренных на III этапе исследования. Просмотр посевов на щелочном агаре и элективной среде, сделанных на I-III этапах исследования, в косо проходящем свете стереоскопического микроскопа. Отбор со щелочного агара и элективной среды подозрительных на холерные вибрионы колоний на одну из полиуглеводных сред и щелочной агар для накопления культуры. Подозрительные на холерные вибрионы колонии изучают с использованием следующих тестов: — определение индофенолоксидазы;
— микроскопия мазка, окрашенного по Граму; — слайд-агглютинация с сыворотками холерными O1 серогруппы (при положительном результате — с Инаба, Огава), RO и O139 серогруппы. Выдача предварительного положительного ответа об обнаружении в исследуемом материале культур, подозрительных на холерные вибрионы O1, RO или O139 серогруппы на основании результатов следующих тестов: — характерные морфологические и культуральные признаки; — положительный тест на индофенолоксидазу; — положительная реакция слайд-агглютинации с соответствующими холерными диагностическими сыворотками.

V этап исследования
через 72-74 ч (в течение 4-го рабочего дня)

Отбор культур с характерным ростом на полиуглеводной среде и щелочном агаре и изучение их по тестам, указанным для IV этапа исследования. Подготовка выделенной культуры к транспортированию. Передача выделенной культуры для дальнейшей идентификации в установленном порядке возможна на любом этапе.

2-й вариант. Клинический материал поступил после 10 ч утра, в течение рабочего дня лаборатории. Время взятия материала — 10.00 — до конца рабочего дня лаборатории. Материал доставлен в транспортной среде (5-10 мл 1%-й пептонной воды).

I этап исследования
(в течение 1-го рабочего дня)

Посев 5-10 мл транспортной среды с материалом в 50 мл 1%-й пептонной воды с теллуритом калия — 1-я среда накопления и высев на щелочной агар и элективную среду типа TCBS.

II этап исследования
через 24-26 ч от начала исследования (в начале 2-го рабочего дня)

Высев с 1-й среды накопления во 2-ю среду накопления без теллурита калия, на щелочной агар и элективную среду типа TCBS. Просмотр в косо проходящем свете стереоскопического микроскопа посевов на щелочном агаре и элективной среде, сделанных на I этапе исследования. Отсев подозрительных на холерные вибрионы колоний на полиуглеводную среду и щелочной или другой питательный агар для накопления культуры. Подозрительные на холерные вибрионы колонии изучают с использованием следующих тестов: — определение индофенолоксидазы;
— микроскопия мазка, окрашенного по Граму; — слайд-агглютинация с сыворотками холерными O1 серогруппы (при положительном результате — с Инаба, Огава), RO и O139 серогруппы. Выдача предварительного положительного ответа об обнаружении в исследуемом материале культур, подозрительных на холерные вибрионы O1, RO или O139 серогруппы, на основании результатов следующих тестов: — характерные морфологические и культуральные признаки; — положительный тест на индофенолоксидазу; — положительная реакция слайд-агглютинации с соответствующими холерными диагностическими сыворотками.

III этап исследования
через 30-32 ч от начала исследования (в конце 2-го рабочего дня)

Высев через 6 ч инкубации со 2-й среды накопления на щелочной агар.

IV этап исследования
через 48-50 ч от начала исследования (в течение 3-го рабочего дня)

Отбор культур с характерным ростом на полиуглеводной среде и щелочном агаре, постановка тестов, предусмотренных на II этапе исследования. Просмотр в косо проходящем свете стереоскопического микроскопа посевов на щелочном агаре и элективной среде, сделанных на II и III этапах исследования. Отсев подозрительных на холерные вибрионы колоний на полиуглеводную среду и щелочной или другой питательный агар для накопления культуры. Подозрительные на холерные вибрионы колонии изучают с использованием следующих тестов: — определение индофенолоксидазы;
— микроскопия мазка, окрашенного по Граму; — слайд-агглютинация с сыворотками холерными O1 серогруппы (при положительном результате — с Инаба, Огава), RO и O139 серогруппы. Выдача устного предварительного положительного ответа об обнаружении в исследуемом материале культур, подозрительных на холерные вибрионы O1, RO или O139 серогруппы, на основании результатов следующих тестов: — характерные морфологические и культуральные признаки; — положительный тест на индофенолоксидазу; — положительная реакция слайд-агглютинации с соответствующими холерными диагностическими сыворотками.

V этап исследования
через 72-74 ч (в течение 4-го рабочего дня)

Отбор культур с характерным ростом на полиуглеводной среде и щелочном агаре. Изучение по тестам, предусмотренным на IV этапе. Подготовка выделенной культуры к транспортированию. Передача выделенной культуры для дальнейшей идентификации в установленном порядке возможна на любом этапе.

3-й вариант. Время взятия материала — по окончании рабочего дня лаборатории. Клинический материал доставлен в лабораторию до 10 ч утра следующего рабочего дня.

I этап исследования (1-й рабочий день)

Материал доставлен в транспортной среде (5-10 мл 1%-й пептонной воды без теллурита калия). Посев материала в 50 мл 1%-й пептонной воды (1-я среда накопления), на щелочной агар и элективную среду типа TCBS.

II этап исследования
через 6 ч от начала исследования (в течение 1-го рабочего дня)

Пересев с 1-й среды накопления во 2-ю среду накопления (1%-я пептонная вода с теллуритом калия), высев на щелочной агар и элективную среду типа TCBS.

III этап исследования
через 24-26 ч от начала исследования (в начале 2-го рабочего дня)

Высев со 2-й среды накопления на щелочной агар. Просмотр в косо проходящем свете стереоскопического микроскопа посевов на щелочном агаре и элективной среде, засеянных на I и II этапах исследования. Отсев подозрительных на холерные вибрионы колоний на полиуглеводную среду и на щелочной или другой питательный агар для накопления культуры. Подозрительные на холерные вибрионы колонии изучают с использованием следующих тестов: — микроскопия мазка, окрашенного по Граму; — определение индофенолоксидазы;
— слайд-агглютинация с сыворотками холерными O1 серогруппы (при положительном результате — с Инаба, Огава), RO и O139 серогруппы. При положительном результате в двух методах — выдача устного предварительного положительного ответа по предусмотренной схеме.

IV этап исследования
через 48-50 ч от начала исследования (в течение 3-го рабочего дня)

Отбор культур с характерным ростом на полиуглеводной среде и щелочном агаре, постановка тестов, предусмотренных на III этапе исследования. Просмотр в косо проходящем свете стереоскопического микроскопа посевов на щелочном агаре и элективной среде. Отсев на полиуглеводную среду и щелочной или другой питательный агар для накопления культуры, подозрительной на холерные вибрионы. Определение индофенолоксидазы.
Микроскопия мазка, окрашенного по Граму. Слайд-агглютинация с сыворотками холерными O1 серогруппы (при положительном результате — с Инаба, Огава), RO и O139 серогруппы. Выдача предварительного положительного ответа об обнаружении в исследуемом материале культур, подозрительных на холерные вибрионы O1, RO или O139 серогруппы на основании результатов следующих тестов: — характерные морфологические и культуральные признаки; — положительный тест на индофенолоксидазу; — положительная реакция слайд-агглютинации с соответствующими холерными диагностическими сыворотками.

V этап исследования
через 72-74 ч от начала исследования (в течение 4-го рабочего дня)

Отбор культур с характерным ростом на полиуглеводной среде и щелочном агаре. Изучение культур по тестам предыдущего этапа. Подготовка выделенной культуры к транспортированию. Передача выделенной культуры для дальнейшей идентификации в установленном порядке возможна на любом этапе.

4-й вариант. Время взятия материала — выходные дни лаборатории. Клинический материал поступил до 10 ч утра следующего рабочего дня.

I этап исследования
(1-й рабочий день)

Материал доставлен в транспортной среде (50 мл 1%-й пептонной воды с теллуритом калия). Посев 5-10 мл среды с материалом в 50 мл 1%-й пептонной воды — 1-я среда накопления.

II этап исследования
через 6 ч от начала исследования (в течение 1-го рабочего дня)

III этап исследования
через 24-26 ч от начала исследования (в начале 2-го рабочего дня)

Высев со 2-й среды накопления на щелочной агар. Просмотр в косо проходящем свете стереоскопического микроскопа посевов на щелочном агаре и элективной среде типа TCBS. Отсев колоний, подозрительных на колонии холерного вибриона, на полиуглеводную среду и щелочной или другой питательный агар для накопления культуры. При достаточном количестве подозрительных на холерные вибрионы колоний ставят тесты: — определение индофенолоксидазы;
— микроскопия мазка, окрашенного по Грамму; — слайд-агглютинация с сыворотками холерными O1 серогруппы (при положительном результате — с Инаба, Огава), RO и O139 серогруппы. Выдача устного предварительного положительного ответа по предусмотренной схеме.

IV этап исследования
через 48-50 ч от начала исследования (в течение 3-го рабочего дня)

Отбор культур с характерным ростом на полиуглеводной среде и щелочном агаре, постановка тестов, предусмотренных на III этапе исследования. Просмотр посевов в косо проходящем свете стереоскопического микроскопа на щелочном агаре и на элективной среде, засеянных на II и III этапах исследования. Отсев колоний, подозрительных на колонии холерного вибриона, на полиуглеводную среду и на щелочной или другой питательный агар для накопления культуры. Определение индофенолоксидазы.
Микроскопия мазка, окрашенного по Граму. Слайд-агглютинация с сыворотками холерными O1 серогруппы (при положительном результате — с Инаба, Огава), RO и O139 серогруппы. Выдача предварительного положительного ответа по предусмотренной схеме.

V этап исследования
через 72-74 ч от начала исследования (в течение 4-го рабочего дня)

Отбор культур с характерным ростом на полиуглеводной среде и щелочном агаре. Изучение культуры по тестам, предусмотренным на IV этапе. Передача выделенной культуры для дальнейшей идентификации в установленном порядке возможна на любом этапе.

5.1.4. Оформление результатов исследования

Регистрация результатов анализа в лаборатории ЛПУ производится по учетным формам в соответствии с действующими МУК по лабораторной диагностике холеры. Выдача ответов для историй болезней — по унифицированным формам.

5.1.5. Порядок взаимодействия лечебно-профилактических учреждений с учреждениями Роспотребнадзора

Информация о выделенной в лаборатории ЛПУ культуре холерного вибриона передается в соответствии со схемой выдачи результатов исследований (прилож. 9). Культуры холерных вибрионов направляют в лаборатории ООИ ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъекте, при ее отсутствии в лаборатории Регионального центра по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I-II групп патогенности или Центра индикации и диагностики опасных инфекционных болезней (территориальное противочумное учреждение). Передачу и транспортирование осуществляют в соответствии с действующими санитарными правилами по порядку учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности.

5.2. Порядок организации и проведения лабораторной диагностики холеры для филиалов ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в муниципальном образовании (городе, административном районе) в субъекте
Российской Федерации

5.2.1. Требования к лабораториям филиалов ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в муниципальном образовании (городе, административном районе) в субъекте Российской Федерации, осуществляющим бактериологические исследования на холеру

Наличие разрешительных и регламентирующих работу документов ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъекте, на базе филиалов которого функционируют бактериологические лаборатории, должен иметь лицензию на осуществление деятельности, связанной с использованием возбудителей III-IV групп патогенности (опасности). Бактериологические лаборатории филиалов ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в муниципальном образовании в субъекте Российской Федерации должны иметь санитарно-эпидемиологическое заключение о возможности проведения работ с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) в соответствии с действующими санитарными правилами о порядке выдачи санитарно-эпидемиологического заключения о возможности проведения работ с возбудителями инфекционных болезней человека I-IV групп патогенности (опасности). Лаборатории филиалов ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в муниципальном образовании в субъекте Российской Федерации должны быть аккредитованы на техническую компетентность в установленном порядке в соответствии с действующей законодательной базой Российской Федерации. Учет, хранение, передача и транспортирование выделенных культур, подозрительных на холерные вибрионы, должны осуществляться в соответствии с действующими санитарными правилами по порядку учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности. Утилизация отходов должна осуществляться в соответствии с действующими санитарными правилами по санитарно-эпидемиологическим требованиям к обращению с медицинскими отходами. Проведение исследований на всех этапах: отбор проб, их хранение, доставка в лабораторию, регистрация, порядок исследования, выдача результатов, взаимодействие с учреждениями Роспотребнадзора должны соответствовать требованиям действующих нормативных и распорядительных документов.

Требования к специалистам и персоналу, участвующим в выполнении исследований на холеру Исследования на холеру могут выполнять специалисты не моложе 18 лет с высшим и средним медицинским, биологическим образованием, окончившие курсы по специальности «Бактериология», имеющие допуск к работе с ПБА III-IV групп на основании приказа руководителя учреждения. Инженерно-технический персонал, дезинфекторы и санитарки проходят специальную подготовку по месту работы в соответствии с должностными обязанностями. Специалисты, осуществляющие деятельность, связанную с использованием возбудителей инфекционных болезней, должны повышать квалификацию не реже одного раза в 5 лет и иметь сертификат специалиста. Необходимый уровень подготовки специалистов с высшим медицинским (биологическим) образованием и средним медицинским образованием и повышение их квалификации по лабораторной диагностике холеры представлены в прилож. 1. Требования к знаниям и умениям специалистов, выполняющих бактериологические исследования на холеру, приведены в прилож. 2.

Требования к обеспечению безопасности работы персонала Каждая лаборатория должна иметь пакет документов, определяющих режим безопасной работы сотрудников с учетом характера работ, особенностей технологии, свойств микроорганизмов. Документы должны быть согласованы с комиссией по контролю соблюдения требований биологической безопасности, специалистами по охране труда, противопожарным мероприятиям и утверждены руководителем учреждения. Результаты проверок знаний правил техники безопасности персонала при проведении работ фиксируются в специальном журнале. Все сотрудники должны выполнять требования по обеспечению безопасности работы с материалом, подозрительным или зараженным возбудителями инфекционных болезней III-IV групп патогенности (опасности) в соответствии с действующими нормативными документами.

Порядок организации внутреннего контроля качества лабораторных исследований Контроль качества диагностических исследований на холеру в лабораториях филиалов ФБУЗ ЦГиЭ в субъекте Российской Федерации включает: — контроль качества питательных сред, диагностических препаратов и тест-систем, дистиллированной воды, дезинфицирующих средств, химических реактивов; — своевременную поверку средств измерений, аттестацию испытательного оборудования; — контроль качества стерилизации фильтровальных установок, лабораторной посуды; — контроль качества стерилизации паровых и суховоздушных стерилизаторов; — контроль работы бактерицидных ламп;
— контроль температурного режима работы холодильников и термостатов; — проверку состояния воздуха производственных помещений и боксов, температурного режима, влажности; — проверку санитарного состояния помещений, включая условия уборки, дезинфекции, контроль смывов с поверхностей и оборудования. Результаты контроля фиксируют в специальных журналах.

Правила ведения документации
Ведение лабораторной документации, включая регистрационные и рабочие журналы, осуществляют в соответствии с требованиями действующих методических документов.

Требования к материальным ресурсам, необходимым для выполнения диагностических исследований на холеру Для проведения диагностических исследований на холеру в лабораториях должны быть в наличии: — питательные среды, зарегистрированные в установленном порядке и прошедшие контроль качества (прилож. 3, 8); — диагностические препараты и тест-системы, зарегистрированные в установленном порядке (прилож. 4, 8); — химические реактивы (прилож. 5);
— приборы, оборудование, расходные материалы (прилож. 6).

5.2.2. Номенклатура и объем исследований

Лаборатории филиалов ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в муниципальном образовании в субъекте Российской Федерации при осуществлении эпидемиологического надзора проводят плановые профилактические исследования на холеру в сроки, определенные для территорий, различных по типам эпидемических проявлений холеры, в действующих санитарных правилах: — материала от лиц, подлежащих лабораторному обследованию; — проб из объектов окружающей среды.
В лабораториях филиалов ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в муниципальном образовании (городе, административном районе), в субъекте проводят диагностические исследования материала в следующем объеме: 1) посев на среды накопления и дифференциально-диагностические, выделение культуры, подозрительной на возбудителя холеры; 2) идентификация культуры, подозрительной на возбудителя холеры, по следующим тестам: — микроскопия мазка, окрашенного по Граму; — выявление индофенолоксидазы;
— слайд-агглютинация с холерными диагностическими сыворотками; 3) экспресс- и ускоренная диагностика: методы МФА и РИВ.

5.2.3. Порядок лабораторной диагностики холеры в лабораториях филиалов ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в муниципальном образовании (городе, административном районе) в субъекте Российской Федерации

5.2.3.1. Порядок исследования клинического материала

Отбор проб клинического материала При проведении бактериологического анализа на холеру исследуется клинический материал: испражнения, рвотные массы, желчь. Отбор, упаковка проб клинического материала для исследования, транспортировка, форма направления — в соответствии с действующими МУК по лабораторной диагностике холеры. Материал от больных с дисфункцией кишечника забирает медицинский персонал ЛПУ в соответствии с разделом 5.1.3.
Исследование клинического материала Методы исследования клинического материала на холеру в лабораториях филиалов ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в муниципальных образованиях (городах и административных районах субъекта, объединенных по территориальному признаку)»: бактериологический и ускоренные (слайд-агглютинация, МФА и РИВ). Профилактические исследования клинического материала на холеру проводят в течение рабочего дня, диагностические исследования материала от больного с подозрением на холеру, а также в случае выделения культуры, подозрительной на холерный вибрион, — в условиях круглосуточного режима работы лаборатории с включением экспрессных и ускоренных методов диагностики. При исследовании материала от больных холерой (подозрительных) среды накопления с ингибиторами не используются. Порядок исследования материала от лиц, подлежащих обследованию при эпидемиологическом надзоре за холерой, при круглосуточной работе лаборатории осуществляется в соответствии с изложенным в п. 5.1.3 (1. Исследование клинического материала на холеру при круглосуточном режиме работы лаборатории). Порядок исследования на холеру материала от лиц, подлежащих обследованию при эпидемиологическом надзоре, при односменной работе лаборатории осуществляется в зависимости от времени забора и доставки материала в лабораторию — варианты 1-4, изложенные в п. 5.1.3 (2. Исследование клинического материала при осуществлении эпидемиологического надзора за холерой при односменной работе лаборатории). Все изолированные от людей культуры, подозрительные на холерные вибрионы, независимо от результатов слайд-агглютинации холерными сыворотками передаются для дальнейшей идентификации в установленном порядке. Регистрация результатов анализа и выдача ответов производится по учетным формам, предусмотренным в действующих методических указаниях по лабораторной диагностике холеры.

5.2.3.2. Порядок исследования на холеру проб из объектов окружающей среды

Отбор и транспортирование проб из объектов окружающей среды Отбор и доставка для исследования проб воды из поверхностных водоемов, хозяйственно-бытовых и сточных вод, содержимого выгребных туалетов, ила, гидробионтов, мух, смывов с объектов окружающей среды, пищевых продуктов и другие и форма направления — в соответствии с действующими методическими указаниями по лабораторной диагностике холеры.
Исследование проб воды из поверхностных водоемов

I этап исследования

Посевы проб воды из поверхностных водоемов с целью первичного накопления холерных вибрионов в зависимости от времени доставки (варианты). 1-й вариант — к пробе воды добавляют раствор основного пептона до 1%-й концентрации; определяют pH; подщелачивают 10%-м раствором едкого натра до pH 8,4 +/- 0,1 (1-я среда накопления). Время инкубации в 1-й среде накопления — 8-10 ч. 2-й вариант — в воду добавляют раствор основного пептона до 1%-й концентрации и теллурит калия из рабочего разведения 1:1000 до конечной концентрации 1:100000 или 1:200000 в соответствии с результатами его контроля; устанавливают pH 8,4 +/- 0,1 (1-я среда накопления). Время инкубации в 1-й среде накопления — 18-24 ч. 3-й вариант — производят фильтрование воды через мембранные фильтры N 2 или 3, смыв с фильтров сеют в 1-ю среду накопления (1%-я пептонная вода pH 8,4 +/- 0,1) и на щелочной агар.

II этап исследования

1-й вариант — через 8-10 ч от начала исследования: — пересев с 1-й среды накопления во 2-ю (1%-ю пептонную воду с теллуритом калия и без него; при этом время инкубации в среде без теллурита калия — 6 ч, а с теллуритом калия — 18-20 ч) и на щелочной агар. 2-й вариант — через 18-24 ч от начала исследования: — пересев с 1-й среды накопления во 2-ю (1%-ю пептонную воду без теллурита калия; при этом время инкубации в среде без теллурита калия — 6-8 ч) и на щелочной агар. 3-й вариант — через 12-18 ч от начала исследования: — пересев с 1-й среды накопления во 2-ю среду накопления и на щелочной агар. При интенсивном бактериальном загрязнении проб используют 3-ю среду накопления.

III этап исследования

Высев со 2-й среды накопления на щелочной агар.

IV этап исследования

Отбор колоний, подозрительных на колонии холерного вибриона, со щелочного агара в косо проходящем свете стереоскопического микроскопа. Отсев колоний, подозрительных на колонии холерного вибриона, на одну из полиуглеводных сред и щелочной агар для накопления чистой культуры. В случае проведения срочного анализа и при достаточном количестве подозрительных колоний: — определение индофенолоксидазы;
— микроскопия мазка, окрашенного по Граму; — слайд-агглютинация с сыворотками холерными O1 серогруппы (при положительном результате — с Инаба, Огава), RO, O139 серогруппы; — возможно использование методов МФА и РИВ. В этом случае выдача устного предварительного положительного ответа по предусмотренной схеме об обнаружении в исследуемых пробах культур, подозрительных на холерные вибрионы O1, RO или O139 серогруппы, на основании результатов следующих тестов: — характерные морфологические и культуральные признаки; — положительный тест на индофенолоксидазу; — положительная реакция слайд-агглютинации с соответствующими холерными диагностическими сыворотками; — положительные результаты ускоренной диагностики методами МФА и РИВ.

V этап исследования

Отбор культуры с характерным ростом на полиуглеводной среде и щелочном агаре. Определение индофенолоксидазы.
Микроскопия мазка, окрашенного по Граму. Слайд-агглютинация с сыворотками холерными O1 серогруппы (при положительном результате — с Инаба, Огава), RO, O139 серогруппы. Возможно использование методов МФА и РИВ. Выдача устного предварительного положительного ответа по предусмотренной схеме об обнаружении в исследуемых пробах культур, подозрительных на холерные вибрионы O1, RO или O139 серогруппы, на основании результатов следующих тестов: — характерные морфологические и культуральные признаки; — положительный тест на индофенолоксидазу; — положительная реакция слайд-агглютинации с соответствующими холерными диагностическими сыворотками; — положительные результаты ускоренной диагностики методами МФА и РИВ. Подготовка выделенной культуры к транспортированию. Срочная передача выделенной культуры для дальнейшей идентификации в установленном порядке. Неагглютинирующиеся холерными сыворотками O1 серогруппы, RO и O139 серогруппы культуры идентифицируют на месте по биохимическим признакам с целью уточнения родовой и видовой принадлежности или по согласованию передают в лабораторию ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии».

3. Исследование хозяйственно-бытовых сточных вод Подготовка проб сточной воды. Фильтрация сточной воды (1 л) через фильтр для освобождения от механических примесей (при необходимости). При заборе сточных вод марлевыми тампонами их помещают в емкости с накопительной средой (1%-й раствор пептона); устанавливают pH 8,4 +/- 0,1 (1-я среда накопления). Время инкубации 1-й среды накопления — 8-10 ч, в случае добавления теллурита калия — 18-24 ч. Далее этапы исследования хозяйственно-бытовых сточных вод осуществляются в соответствии с изложенными в п. 5.2.3.2 пп. 2 (Порядок исследования проб воды из поверхностных водоемов).

5.2.4. Оформление результатов исследования

Регистрация результатов анализа в лабораториях филиалов ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в муниципальном образовании в субъекте Российской Федерации производится по учетным формам в соответствии с действующими методическими указаниями по лабораторной диагностике холеры.

5.2.5. Порядок взаимодействия филиалов ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в муниципальном образовании (городе, административном районе) в субъекте Российской Федерации с учреждениями Роспотребнадзора

Информация о культуре холерного вибриона, выделенной в лаборатории филиала ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в муниципальном образовании в субъекте Российской Федерации из объектов окружающей среды передается в соответствии со схемой выдачи результатов исследований на холеру (прилож. 10). Культура холерного вибриона направляется в лабораторию ООИ ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъекте Российской Федерации, а при ее отсутствии в Региональный центр по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I-II групп патогенности или Центр индикации и диагностики возбудителей опасных инфекционных болезней (региональное противочумное учреждение). Доставку осуществляют в соответствии с действующими СП по порядку учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности.

5.3. Порядок организации и проведения лабораторной диагностики холеры для лабораторий ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъекте Российской Федерации

5.3.1. Порядок организации и проведения лабораторной диагностики холеры для лабораторий ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъекте Российской Федерации, в структуре которых отсутствуют отделы
и лаборатории особо опасных инфекций

Лаборатории ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъектах Российской Федерации, в структуре которых отсутствуют отделы и лаборатории особо опасных инфекций (имеющие санитарно-эпидемиологическое заключение на право работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности), при осуществлении эпидемиологического надзора за холерой проводят плановые профилактические исследования на холеру материала от лиц, подлежащих обследованию, и проб из объектов окружающей среды до этапа выделения культуры в следующем объеме:

Посев на среды накопления и элективную среду типа TCBS, выделение культуры, подозрительной на холерный вибрион;
Идентификация культуры, подозрительной на холерный вибрион, по следующим тестам: — микроскопия мазка, окрашенного по Граму; — выявление индофенолоксидазы; — слайд-агглютинация с холерными диагностическими сыворотками;
Экспресс- и ускоренная диагностика: методы МФА и РИВ. Порядок организации и проведения лабораторной диагностики холеры для лабораторий ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъектах Российской Федерации, в структуре которых отсутствуют отделы или лаборатории особо опасных инфекций, соответствует порядку для лабораторий филиалов ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в муниципальных образованиях в субъектах Российской Федерации (раздел 5.2).

5.3.2. Порядок организации и проведения лабораторной диагностики холеры для лабораторий особо опасных инфекций ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъекте Российской Федерации

5.3.2.1. Требования к лабораториям особо опасных инфекций ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъекте Российской Федерации, осуществляющим бактериологические исследования на холеру

Наличие разрешительных и регламентирующих работу документов ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъекте Российской Федерации, на базе которого функционируют лаборатории ООИ, должны иметь лицензию на осуществление деятельности, связанной с использованием возбудителей II-IV групп патогенности (опасности). Лаборатории ООИ должны иметь санитарно-эпидемиологическое заключение о возможности проведения работ с микроорганизмами II-IV групп патогенности (опасности) в соответствии с действующими санитарными правилами о порядке выдачи санитарно-эпидемиологического заключения о возможности проведения работ с возбудителями инфекционных заболеваний человека I-IV групп патогенности (опасности). Лаборатории ООИ ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъекте Российской Федерации должны быть аккредитованы на техническую компетентность в установленном порядке в соответствии с действующей законодательной базой Российской Федерации. Учет, хранение, передача и транспортирование выделенных культур холерных вибрионов должны осуществляться в соответствии с действующими санитарными правилами по порядку учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности. Утилизация отходов должна осуществляться в соответствии с действующими санитарными правилами по санитарно-эпидемиологическим требованиям к обращению с медицинскими отходами. Проведение исследований на всех этапах: отбор проб, их хранение, доставка в лабораторию, регистрация, порядок исследования, выдача результатов, взаимодействие с учреждениями Роспотребнадзора должны соответствовать требованиям действующих нормативных и распорядительных документов.

Требования к специалистам и персоналу, участвующим в выполнении исследований на холеру Исследования на холеру могут выполнять специалисты не моложе 18 лет с высшим и средним медицинским, биологическим образованием, окончившие курсы специализации по особо опасным инфекциям, имеющие допуск к работе с ПБА II-IV групп на основании приказа руководителя учреждения. Инженерно-технический персонал, дезинфекторы и санитарки проходят специальную подготовку по месту работы в соответствии с должностными обязанностями. Специалисты, осуществляющие деятельность, связанную с использованием возбудителей инфекционных болезней, должны повышать квалификацию не реже одного раза в 5 лет и иметь сертификат специалиста. Необходимый уровень подготовки специалистов с высшим медицинским (биологическим) образованием и средним медицинским образованием, повышение их квалификации по лабораторной диагностике холеры представлен в прилож. 1. Требования к знаниям и умениям специалистов лаборатории ООИ ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии», выполняющих бактериологические исследования на холеру, приведены в прилож. 2.

Требования к обеспечению безопасности работы персонала Каждая лаборатория должна иметь пакет документов, определяющих режим безопасной работы сотрудников с учетом характера работ, особенностей технологии, свойств микроорганизмов. Документы должны быть согласованы с комиссией по контролю требований биологической безопасности, специалистами по охране труда, противопожарным мероприятиям и утверждены руководителем учреждения. Результаты проверок знаний правил техники безопасности персонала при проведении работ фиксируются в специальном журнале. Все сотрудники должны выполнять требования по обеспечению безопасности работы с материалом, подозрительным и зараженным возбудителями инфекционных болезней II-IV групп патогенности (опасности), в соответствии с действующими нормативными документами.

Порядок организации внутреннего контроля качества лабораторных исследований Контроль качества диагностических исследований на холеру в лабораториях ООИ ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» включает: — контроль качества питательных сред, диагностических препаратов и тест-систем, эталонных штаммов, дисков с антибактериальными препаратами, дистиллированной воды, дезинфицирующих средств, химических реактивов; — контроль эффективности мембранных фильтров; — своевременную поверку средств измерений, аттестацию испытательного оборудования; — контроль качества стерильности фильтровальных установок, лабораторной посуды; — контроль качества стерилизации паровых и суховоздушных стерилизаторов; — контроль работы бактерицидных ламп;
— контроль температурного режима работы холодильников и термостатов; — проверку состояния воздуха производственных помещений и боксов, температурного режима, влажности; — проверку санитарного состояния помещений, включая условия уборки, дезинфекции, контроль смывов с поверхностей и оборудования. Результаты контроля фиксируют в специальных журналах.

Требования к материальным ресурсам, необходимым для выполнения диагностических исследований на холеру Для проведения диагностических исследований на холеру в лабораториях должны быть в наличии: — питательные среды, зарегистрированные в установленном порядке (прилож. 3, 8); — диагностические препараты, тест-системы, антибактериальные препараты, зарегистрированные в установленном порядке (прилож. 4, 7, 8); — химические реактивы (прилож. 5);
— приборы, оборудование, расходные материалы (прилож. 6).

5.3.2.2. Номенклатура и объем исследований

Лаборатории ООИ ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъектах Российской Федерации проводят: — исследование материала от больных и умерших с подозрением на холеру; — профилактические исследования материала от лиц, подлежащих обследованию на холеру в соответствии с требованиями эпиднадзора (по согласованию); — исследования проб из объектов окружающей среды; — идентификацию культур холерных вибрионов по полной схеме с определением эпидемической значимости в ПЦР по наличию генов ctxA и tcpA и антибиотикограммы диско-диффузионным методом; — контроль качества питательных сред.

5.3.2.3. Порядок диагностических исследований на холеру в лабораториях особо опасных инфекций ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъекте Российской Федерации

Порядок исследования клинического материала осуществляется в соответствии с изложенным в п. 5.2.3.1. Порядок бактериологического анализа на холеру проб из объектов окружающей среды соответствует п. 5.2.3.2. В порядок бактериологического исследования на холеру (клинического материала и проб из объектов окружающей среды) дополнительно включены тесты идентификации культур холерных вибрионов, выделенных на различных этапах, а также культур, поступивших из ЛПУ и филиалов ФБУЗ: — изучение культуральных, морфологических свойств и подвижности микробных клеток; — определение типа расщепления глюкозы (тест Хью-Лейфсона); — определение ферментации углеводов и многоатомных спиртов (сахарозы, маннозы, арабинозы и маннита); — определение декарбоксилазной и дигидролазной активности по отношению к аминокислотам (аргинин, лизин, орнитин); — постановка развернутой реакции агглютинации с холерными агглютинирующими сыворотками O1, Инаба, Огава, RO и реакции слайд-агглютинации с холерной сывороткой O139 серогруппы;

оценка эпидемической значимости культуры комплексным методом — по гемолитической активности в пробе Грейга, чувствительности к холерным
+ — эльтор фагам ctx и ctx (кроме холерных вибрионов O139), в ПЦР на наличие генов ctxA и tcpA, в реакции объемной агломерации с полимерным антилипазным иммуноглобулиновым диагностикумом (PAO);
- определение принадлежности к биовару холерных вибрионов O1 серогруппы (определение чувствительности к диагностическим бактериофагам классическому и эльтор, постановка реакции гемагглютинации с куриными эритроцитами, определение чувствительности к 50 ед/мл полимиксина B, постановка реакции Фогес-Проскауэра);
- определение чувствительности к антибиотикам диско-диффузионным методом;
- ИХ-тест на определение O1 серогруппы (при положительном результате — ИХ-тест на определение серовара Инаба, Огава) или O139 серогруппы.

5.3.2.4. Оформление результатов исследования

Регистрация результатов анализа в лаборатории ООИ ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» производится по учетным формам в соответствии с действующими методическими указаниями по лабораторной диагностике холеры.

5.3.2.5. Порядок взаимодействия
лабораторий особо опасных инфекций ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъекте Российской Федерации с учреждениями Роспотребнадзора

Информация о выделенных или идентифицированных культурах холерного вибриона передается в соответствии со схемой выдачи результатов исследований на холеру (прилож. 11) и направляется в Референс-центр по мониторингу за холерой. Культуры холерного вибриона, выделенные от людей, из объектов окружающей среды и идентифицированные в лаборатории ООИ ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъекте Российской Федерации, направляют в Региональный центр по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I-II групп патогенности или Центр индикации и диагностики возбудителей опасных инфекционных болезней (региональное противочумное учреждение). Срок доставки эпидемически значимых культур — не более 5 суток, остальные культуры доставляются не позднее одного месяца. Передачу и транспортирование осуществляют в соответствии с действующими санитарными правилами по порядку учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности.

6. Порядок организации и проведения лабораторной диагностики холеры для лабораторий регионального уровня

6.1. Порядок организации и проведения лабораторной диагностики холеры для лабораторий Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных и паразитарных болезней II-IV групп патогенности в федеральных округах

Лаборатории Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных и паразитарных болезней II-IV групп патогенности осуществляют: — диагностические исследования материала от больных и умерших с подозрением на холеру; — профилактические исследования материала от лиц, подлежащих обследованию на холеру в соответствии с требованиями эпидемиологического надзора (по согласованию); — исследования проб из объектов окружающей среды в соответствии с требованиями эпидемиологического надзора; — идентификацию культур холерных вибрионов по полной схеме; — контроль качества питательных сред.
Порядок организации и проведения лабораторной диагностики холеры для лабораторий Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных и паразитарных болезней II-IV групп патогенности в федеральных округах соответствует п. 5.3.2 «Порядок организации и проведения лабораторной диагностики холеры для лабораторий особо опасных инфекций ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъекте Российской Федерации». Культуры холерных вибрионов O1 и O139 серогрупп, выделенные от людей, из объектов окружающей среды и идентифицированные в лаборатории Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных и паразитарных болезней II-IV групп патогенности, передают в Региональный центр по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I-II групп патогенности или Центр индикации и диагностики возбудителей опасных инфекционных болезней (региональное противочумное учреждение). Срок доставки эпидемически значимых культур — не более 5 суток, остальные культуры доставляются не позднее одного месяца. Передачу и транспортирование осуществляют в соответствии с действующими СП по порядку учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности.

6.2. Порядок организации и проведения лабораторной диагностики холеры для лабораторий Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I-II групп патогенности и Центров индикации и диагностики возбудителей опасных
инфекционных болезней

6.2.1. Требования к лабораториям Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I-II групп патогенности и Центров индикации и диагностики возбудителей опасных инфекционных болезней

Наличие разрешительных и регламентирующих работу документов Учреждения, на базе которых функционируют Региональные центры по мониторингу за возбудителями инфекционных и паразитарных болезней I-II групп патогенности и Центры индикации и диагностики возбудителей опасных инфекционных болезней, должны иметь лицензию на деятельность, связанную с использованием возбудителей I-II групп патогенности (опасности). Лаборатории Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I-II групп патогенности и Центров индикации и диагностики возбудителей опасных инфекционных болезней должны иметь санитарно-эпидемиологическое заключение о возможности проведения работ с микроорганизмами I-II групп патогенности (опасности) в соответствии с действующими санитарными правилами о порядке выдачи санитарно-эпидемиологического заключения о возможности проведения работ с возбудителями инфекционных заболеваний человека I-IV групп патогенности (опасности). Лаборатории Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I-II групп патогенности и Центров индикации и диагностики возбудителей опасных инфекционных болезней должны быть аккредитованы на техническую компетентность в установленном порядке в соответствии с действующей законодательной базой Российской Федерации. Учет, хранение, передача и транспортирование выделенных культур холерных вибрионов должны осуществляться в соответствии с действующими санитарными правилами по порядку учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности. Утилизация отходов должна осуществляться в соответствии с действующими санитарными правилами по санитарно-эпидемиологическим требованиям к обращению с медицинскими отходами. Проведение исследований на всех этапах: отбор проб, их хранение, доставка в лабораторию, регистрация, порядок исследования, выдача результатов, взаимодействие с учреждениями Роспотребнадзора должны соответствовать требованиям действующих нормативных и распорядительных документов.

Требования к специалистам и персоналу, участвующим в выполнении исследований на холеру Исследования на холеру могут выполнять специалисты не моложе 18 лет с высшим и средним медицинским, биологическим образованием, окончившие курсы первичной специализации по ООИ по специальности «Бактериология», имеющие допуск к работе с ПБА I-II групп на основании приказа руководителя учреждения. Инженерно-технический персонал и дезинфекторы проходят специальную подготовку по месту работы в соответствии с должностными обязанностями. Специалисты, осуществляющие деятельность, связанную с использованием возбудителей инфекционных заболеваний, должны повышать квалификацию не реже одного раза в 5 лет и иметь сертификат специалиста. Необходимый уровень подготовки специалистов с высшим медицинским (биологическим) образованием и средним медицинским образованием, повышение их квалификации по лабораторной диагностике холеры представлен в прилож. 1.

Требования к обеспечению безопасности работы персонала Каждая лаборатория должна иметь пакет документов, определяющих режим безопасной работы сотрудников с учетом характера работ, особенностей технологии, свойств микроорганизмов. Документы должны быть согласованы с комиссией по контролю соблюдения требований биологической безопасности, специалистами по охране труда, противопожарным мероприятиям и утверждены руководителем учреждения. Результаты проверок знаний правил техники безопасности персонала при проведении работ фиксируются в специальном журнале. Все сотрудники должны выполнять требования по обеспечению безопасности работы с материалом, подозрительным или зараженным возбудителями инфекционных болезней I-II групп патогенности (опасности) в соответствии с действующими нормативными документами.

Порядок организации внутреннего контроля качества лабораторных исследований Контроль качества диагностических исследований на холеру в лабораториях Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных и паразитарных болезней I-II групп патогенности и Центров индикации и диагностики возбудителей опасных инфекционных болезней включает: — контроль качества питательных сред, диагностических препаратов и тест-систем, эталонных штаммов, дисков с антибактериальными препаратами, дистиллированной воды, дезинфицирующих средств, химических реактивов; — контроль эффективности мембранных фильтров; — своевременную поверку средств измерений, аттестацию испытательного оборудования; — контроль качества стерильности фильтровальных установок, лабораторной посуды; — контроль качества стерилизации паровых и суховоздушных стерилизаторов; — контроль работы бактерицидных ламп;
— контроль температурного режима работы холодильников и термостатов; — проверку состояния воздуха производственных помещений и боксов, температурного режима, влажности; — проверку санитарного состояния помещений, включая условия уборки, дезинфекции, контроля смывов с поверхностей и оборудования. Результаты контроля фиксируют в специальных журналах.

Требования к материальным ресурсам, необходимым для выполнения диагностических исследований на холеру Для проведения диагностических исследований на холеру в лабораториях должны быть в наличии: — питательные среды, зарегистрированные в установленном порядке (прилож. 3, 8); — диагностические препараты, тест-системы, антибактериальные препараты, зарегистрированные в установленном порядке (прилож. 4, 7, 8); — химические реактивы (прилож. 5);
— приборы, оборудование, расходные материалы (прилож. 6).

6.2.2. Номенклатура и объем исследований

Лаборатории Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I-II групп патогенности и Центров индикации и диагностики возбудителей опасных инфекционных болезней проводят: — исследования материала от больных и умерших с подозрением на холеру; — исследования проб из объектов окружающей среды; — идентификацию культур холерных вибрионов, выделенных в прикрепленных субъектах, по полной схеме с определением эпидемиологической значимости; — определение чувствительности холерных вибрионов к антибактериальным препаратам; — серологическое обследование больных холерой, вибриононосителей и других контингентов населения — по эпидпоказаниям; — проверку качества питательных сред и ингибиторов сопутствующей микрофлоры.

6.2.3. Порядок диагностических исследований на холеру в лабораториях Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I — II групп патогенности и Центров индикации и диагностики возбудителей опасных инфекционных болезней

Порядок исследования клинического материала и проб из объектов окружающей среды соответствует п. 5.2.3. Идентификация культур холерных вибрионов осуществляется по полной схеме, изложенной в действующих методических указаниях по лабораторной диагностике холеры. В порядок бактериологического исследования на холеру дополнительно включены исследования сывороток крови больных (переболевших) холерой, вибриононосителей, а также других контингентов населения (по эпидпоказаниям) на наличие агглютининов и вибриоцидных антител. При определении агглютининов в сыворотке крови ставят: — реакцию агглютинации с живыми культурами холерных вибрионов, выделенных от больных (вибриононосителей) в очаге в макро- или микрообъеме. При определении вибриоцидных антител в сыворотке крови ставят: — реакцию вибриоцидных антител (РВА) на основе чашечного метода (Finkelstein); — РВА на основе ферментации углеводов.

6.2.4. Оформление результатов исследования

Регистрация результатов анализа в лаборатории Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I-II групп патогенности и Центров индикации и диагностики возбудителей опасных инфекционных болезней производится по учетным формам в соответствии с действующими методическими указаниями по лабораторной диагностике холеры.

6.2.5. Порядок взаимодействия лабораторий Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I-II групп патогенности и Центров индикации и диагностики возбудителей опасных инфекционных болезней с учреждениями Роспотребнадзора

Информация о выделенных и/или идентифицированных культурах холерного вибриона передается в соответствии с действующей нормативной документацией и направляется в Референс-центр по мониторингу за холерой и в Национальный Центр верификации диагностической деятельности Роспотребнадзора, осуществляющий функцию Государственной коллекции возбудителей особо опасных бактериальных инфекций I-II групп патогенности. Штаммы холерных вибрионов, выделенные от людей, из объектов окружающей среды, идентифицированные в лабораториях Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I-II групп патогенности и в Центрах индикации и диагностики опасных инфекционных болезней, направляют в Референс-центр по мониторингу за холерой. Срок доставки эпидемически значимых культур — не более 5 суток, остальные культуры доставляются не позднее одного месяца. Передачу и транспортирование осуществляют в соответствии с действующими санитарными правилами по порядку учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности.

7. Порядок организации и проведения лабораторной диагностики холеры для лабораторий федерального уровня

7.1. Порядок организации и проведения лабораторной диагностики холеры для Референс-центра по мониторингу за холерой

7.1.1. Требования к лабораториям Референс-центра по мониторингу за холерой

Наличие разрешительных и регламентирующих работу документов Учреждение, на базе которого функционирует Референс-центр по мониторингу за холерой, должно иметь лицензию на деятельность, связанную с использованием возбудителей I-II групп патогенности (опасности). Лаборатории Референс-центра по мониторингу за холерой должны иметь санитарно-эпидемиологические заключения о возможности проведения работ с микроорганизмами I-II групп патогенности (опасности) в соответствии с действующими санитарными правилами о порядке выдачи санитарно-эпидемиологического заключения о возможности проведения работ с возбудителями инфекционных заболеваний человека I-IV групп патогенности (опасности). Лаборатории Референс-центра по мониторингу за холерой должны быть аккредитованы на техническую компетентность в установленном порядке в соответствии с действующей законодательной базой Российской Федерации. Учет, хранение, передача и транспортирование выделенных подозрительных культур холерных вибрионов должны осуществляться в соответствии с действующими санитарными правилами по порядку учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности. Утилизация отходов должна осуществляться в соответствии с действующими санитарными правилами по санитарно-эпидемиологическим требованиям к обращению с медицинскими отходами. Проведение исследований на всех этапах: отбор проб, их хранение, доставка в лабораторию, регистрация, порядок исследования, выдача результатов, взаимодействие с учреждениями Роспотребнадзора должны соответствовать требованиям действующих нормативных и распорядительных документов.

Требования к специалистам и персоналу, участвующим в выполнении исследований на холеру Исследования на холеру могут выполнять специалисты не моложе 18 лет с высшим и средним медицинским, биологическим образованием, окончившие курсы первичной специализации по ООИ по специальности «Бактериология», имеющие допуск к работе с ПБА I-II групп на основании приказа руководителя учреждения. Инженерно-технический персонал, дезинфекторы и санитарки проходят специальную подготовку по месту работы в соответствии с должностными обязанностями. Специалисты, осуществляющие деятельность, связанную с использованием возбудителей инфекционных заболеваний, должны повышать квалификацию не реже одного раза в 5 лет и иметь сертификат специалиста. Необходимый уровень подготовки специалистов с высшим медицинским (биологическим) образованием и средним медицинским образованием, повышение их квалификации по лабораторной диагностике холеры представлен в прилож. 1.

Требования к обеспечению безопасности работы персонала Каждая лаборатория должна иметь пакет документов, определяющих режим безопасной работы сотрудников с учетом характера работ, особенностей технологии, свойств микроорганизмов. Документы должны быть согласованы с комиссией по контролю соблюдения требований биологической безопасности, специалистами по охране труда, противопожарным мероприятиям и утверждены руководителем учреждения. Результаты проверок знаний правил техники безопасности персонала при проведении работ фиксируются в специальном журнале. Все сотрудники должны выполнять требования по обеспечению безопасности работы с материалом, подозрительным или зараженным возбудителями инфекционных болезней I-II групп патогенности (опасности) в соответствии с действующими нормативными документами.

Порядок организации внутреннего контроля качества лабораторных исследований Контроль качества диагностических исследований на холеру в лабораториях Референс-центра по мониторингу за холерой включает: — контроль качества питательных сред, диагностических препаратов и тест-систем, эталонных штаммов, дисков с антибактериальными препаратами, дистиллированной воды, дезинфицирующих средств, химических реактивов; — контроль эффективности мембранных фильтров; — своевременную поверку средств измерений, аттестацию испытательного оборудования; — контроль качества стерильности фильтровальных установок, лабораторной посуды; — контроль качества стерилизации паровых и суховоздушных стерилизаторов; — контроль температурного режима работы холодильников и термостатов; — контроль работы бактерицидных ламп;
— проверку состояния воздуха производственных помещений и боксов, температурного режима, влажности; — проверку санитарного состояния помещений, включая условия уборки, дезинфекции, контроля смывов с поверхностей и оборудования. Результаты контроля фиксируют в специальных журналах.

Требования к материальным ресурсам, необходимым для выполнения диагностических исследований на холеру Для проведения диагностических исследований на холеру в лабораториях должны быть в наличии: — питательные среды, зарегистрированные в установленном порядке, и экспериментальные серии (прилож. 3, 8); — диагностические препараты, тест-системы, антибактериальные препараты, зарегистрированные в установленном порядке, и экспериментальные серии (прилож. 4, 7, 8); — химические реактивы (прилож. 5);
— приборы, оборудование, расходные материалы (прилож. 6).

7.1.2. Номенклатура и объем исследований

Лаборатории Референс-центра по мониторингу за холерой: — проводят полную идентификацию и изучение биологических, молекулярно-биологических, биохимических свойств возбудителей холеры, в т.ч. культур с атипичными свойствами и вновь выявленных холерных вибрионов, явившихся причиной эпидемической вспышки; — определяют чувствительность холерных вибрионов к антибактериальным препаратам, изучают механизмы резистентности; — проводят серологическое обследование больных холерой, вибриононосителей и других контингентов населения — по эпидпоказаниям; — проводят исследование клинического материала и проб окружающей среды — по эпидпоказаниям.

7.1.3. Организация и обеспечение диагностической деятельности при мониторинге за холерой

Материалом для исследования служат культуры холерных вибрионов, в т.ч. культуры с атипичными свойствами, выделенные в лабораториях территориального и регионального уровней; вновь выявленные холерные вибрионы, явившиеся причиной вспышки; клинический материал, сыворотки крови больных холерой, вибриононосителей и других контингентов — по эпидпоказаниям. При исследовании культур возбудителей холеры, в том числе культур с атипичными свойствами и вновь выявленных холерных вибрионов, явившихся причиной вспышки, используют биологические и современные высокотехнологичные методы бактериологического, иммуносерологического и молекулярно-генетического анализа, а также серологические методы при исследовании сывороток крови больных холерой, вибриононосителей и других контингентов населения, обследуемых по эпидемическим показаниям. Порядок исследования клинического материала, проб из объектов окружающей среды на холеру соответствует п. 5.2.3. Идентификация поступивших культур осуществляется по полной схеме: — изучение морфологии микробных клеток; — определение подвижности выделенной культуры в препарате висячей или раздавленной капли с последующим просмотром препаратов под микроскопом с фазово-контрастным устройством; — определение наличия индофенолоксидазы; — исследование методом флюоресцирующих антител; — определение типа расщепления глюкозы в среде Хью-Лейфсона; — определение способности ферментировать углеводы и многоатомные спирты; — определение декарбоксилазной и дигидролазной активности по отношению к отдельным аминокислотам (лизин, аргинин, орнитин); — постановка развернутой реакции агглютинации с холерными агглютинирующими сыворотками O1, Инаба, Огава, RO и реакции слайд-агглютинации с холерной сывороткой O139 серогруппы; — определение биовара холерных вибрионов O1 серогруппы (определение чувствительности к диагностическим бактериофагам классическому и эльтор, постановка гемагглютинации с куриными эритроцитами, определение чувствительности к 50 ед./мл полимиксина B, постановка реакции Фогес-Проскауэра);

определение эпидемической значимости культуры комплексным методом: по гемолитической активности в пробе Грейга, чувствительности к холерным
+ — эльтор ctx и ctx фагам ( кроме холерных вибрионов O139 серогруппы), в ПЦР на наличие генов ctxA и tcpA, по определению холерогенности на модели кроликов-сосунков, по результатам реакции объемной аггломерации с использованием полимерного иммуноглобулинового антилипазного диагностикума (РАО); — определение чувствительности к антибиотикам (диско-диффузионным методом, методом серийных разведений в агаре и бульоне); — постановка дополнительные тестов, определяющих принадлежность к роду Vibrio и виду Vibrio cholerae или другим видам патогенных вибрионов (определение протеолитических свойств; выявление диастатической активности; определение образования индола; определение образования сероводорода; выявление способности к биолюминесценции; определение галофильности вибрионов; определение способности вибрионов к росту при различных температурах; определение образования нитратредуктазы; определение образования бета-галактазидазы). Расширенная характеристика культур с помощью молекулярно-биологических методов: по генам, ассоциированным с вирулентностью, проведение секвинирования, рестрикции, ген-амплификации, VNTR-типирование. При идентификации культур холерных вибрионов с атипичными свойствами использование дополнительных серологических, иммунологических, биохимических и других методов для подтверждения принадлежности культур к роду Vibrio и виду Vibrio cholerae: — ПЦР с использованием дополнительных специфических праймеров; — реакции агглютинации с кроличьими холерными агглютинирующими сыворотками; — реакции слайд-агглютинации с использованием моноклональных антител: — реакции преципитации в геле; — адсорбции агглютининов по Кастеллани; — реакции агглютинации с убитыми кипячением культурами. Применение серологических методов исследования в соответствии с действующими нормативными документами. В сыворотках больных холерой, вибриононосителей и других контингентов населения, обследуемых по эпидпоказаниям, выявляют агглютинины, вибриоцидные антитела. При определении агглютининов в сыворотке крови ставят: — реакцию агглютинации с живыми культурами холерных вибрионов, выделенных от больных (вибриононосителей) в очаге в макро- или микрообъеме. При определении вибриоцидных антител в сыворотке крови ставят: — реакцию вибриоцидных антител (РВА) на основе чашечного метода (Finkelstein); — РВА на основе ферментации углеводов. Возможно применение препаратов, предназначенных для серологической диагностики.

7.1.4. Порядок взаимодействия лабораторий Референс-центра по мониторингу за холерой с учреждениями Роспотребнадзора

Информация о выделенных и/или идентифицированных культурах холерного вибриона передается в соответствии с действующими нормативными документами и направляется в Центр верификации диагностической деятельности Роспотребнадзора, осуществляющий функцию Государственной коллекции возбудителей особо опасных бактериальных инфекций I-II групп патогенности. Культуры холерного вибриона, идентифицированные в лабораториях Референс-центра по мониторингу за холерой, передают в Национальный Центр верификации диагностической деятельности Роспотребнадзора, осуществляющий функцию Государственной коллекции возбудителей особо опасных бактериальных инфекций I-II групп патогенности. Передачу и транспортирование осуществляют в соответствии с действующими санитарными правилами по порядку учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности.

7.2. Порядок и организация
лабораторной диагностики холеры Национального Центра верификации диагностической деятельности

7.2.1. Требования к лабораториям Национального Центра верификации диагностической деятельности

Наличие разрешительных и регламентирующих работу документов, требования к специалистам и персоналу, участвующим в выполнении исследований на холеру, требования к обеспечению безопасности работы персонала, порядок организации внутреннего контроля лабораторных исследований, правила ведения документации и требования к материальным ресурсам, необходимым для выполнения диагностических исследований на холеру, аналогичны п. 7.1.1.

7.2.2. Номенклатура и объем исследований

Лаборатории Национального Центра верификации диагностической деятельности проводят: — верификацию результатов диагностики холеры и идентификации культур, полученных из Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I-II групп патогенности, Центров индикации и диагностики опасных инфекционных болезней Роспотребнадзора, Референс-центра по мониторингу за холерой; — выполняют диагностические исследования материала от больных холерой и умерших от этого заболевания — по эпидпоказаниям; — осуществляют хранение коллекционных штаммов, охраноспособное и авторское депонирование.

7.2.3. Организация и обеспечение
диагностической деятельности

Порядок исследования клинического материала, проб из объектов окружающей среды на холеру соответствует п. 5.2.3. Идентификацию культур осуществляют по полной схеме, дополнительно проводят: — секвенирование фрагментов генов 16S-23S рДНК и других видоспецифичных локусов; — определение генотипов штаммов холерных вибрионов. На основании результатов расширенной характеристики штаммов холерных вибрионов составляют паспорта на штаммы, хранящиеся в Национальном Центре верификации диагностической деятельности, осуществляющем функции Государственной коллекции.

7.2.4. Порядок взаимодействия лабораторий Национального Центра верификации диагностической деятельности с учреждениями Роспотребнадзора

Национальный Центр верификации диагностической деятельности Роспотребнадзора направляет результаты проведенных исследований в Региональные центры по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I-II групп патогенности, Центры индикации и диагностики возбудителей опасных инфекционных болезней, Референс-центр по мониторингу за холерой.

Приложение 1

ПОДГОТОВКА КАДРОВ
ПО ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКЕ ХОЛЕРЫ В БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИХ ЛАБОРАТОРИЯХ РАЗЛИЧНЫХ УРОВНЕЙ

N Перечень Уровни подготовки п/п бактериологических

         лабораторий с    профессиональная    повышение       другие виды   рабочие места в         учетом уровней    переподготовка в   квалификации     подготовки    лаборатории или                            противочумных        по ООИ        (семинары по   отделе особо                             учреждениях (не     (72-500 ч)     лабораторной       опасных                                 менее 500 ч)                      диагностике      инфекций                                                                     холеры)                                                                                                                                           врачи лаборанты  врачи  лаборанты врачи лаборанты врачи лаборанты                                                                                                                                Территориальный уровень                                                                                                                                 1  ЛПУ                   -       -       +/-      +/-      +       +       +       +                                                                                                    2  Филиалы ФБУЗ ЦГиЭ     -       -       +/-      +/-      +       +       +       +                                                                                                    3  ФБУЗ ЦГиЭ без         -       -       +/-      +/-      +       +       +       +           лаборатории ООЧ                                                                                                                                                                      4  ФБУЗ ЦГиЭ             +       +        +        +      +/-     +/-      -       -           с лабораториями ООЧ

Региональный уровень

   5  Региональные центры   +       +        +        +      +/-     +/-      -       -           по мониторингу II -                                                                         IV групп                                                                                    патогенности                                                                                                                                                                         6  Региональные центры   +       +        +        +      +/-     +/-      -       -           по мониторингу I -                                                                          II групп                                                                                    патогенности                                                                                                                                                                         7  Центры индикации и    +       +        +        +      +/-     +/-      -       -           диагностики                                                                                                                                                                                                            Федеральный уровень                                                                                                                                   8  Референс-центр по     +       +        +        +      +/-     +/-      -       -           мониторингу за                                                                              холерой                                                                                                                                                                              9  Национальный Центр    +       +        +        +      +/-     +/-      -       -           верификации

«+» Обязательный уровень подготовки. «-» Подготовка для такого уровня не требуется. «+/-» Подготовка для такого уровня рекомендуется.

Приложение 2

ТРЕБОВАНИЯ
К ПРОФЕССИОНАЛЬНЫМ НАВЫКАМ СПЕЦИАЛИСТОВ, ОСУЩЕСТВЛЯЮЩИХ ЛАБОРАТОРНУЮ ДИАГНОСТИКУ ХОЛЕРЫ

Требования к знаниям и умениям специалистов лечебно-профилактических учреждений, выполняющих бактериологические исследования на холеру 1.1. Врачи-бактериологи и биологи должны знать: — основные положения эпидемиологического надзора за холерой, в том числе в части, касающейся обследования больных на холеру; — нормативные документы, регламентирующие проведение исследований на холеру; — требования биологической безопасности при работе с материалом, подозрительным на зараженность возбудителями III-IV групп патогенности, а также требования биологической безопасности при работе с материалом, подозрительным на зараженность возбудителем холеры;
- этапы подготовительной работы (подготовка питательных сред, диагностических препаратов, реактивов);
- требования к доставке клинического материала, регистрации, его хранению, уничтожению;
- порядок исследования материала в условиях односменной и круглосуточной работы лаборатории;
- порядок исследования материала в зависимости от времени отбора и доставки его в лабораторию;
- этапы лабораторного исследования на холеру;
- методы ускоренной диагностики холеры;
- культуральные, морфологические, иммуносерологические и биохимические свойства холерных вибрионов;
- сроки выдачи предварительного положительного результата исследования;
- правила и сроки передачи выделенных (подозрительных) культур. 1.2. Врачи-бактериологи и биологи должны уметь выполнять диагностическое исследование клинического материала на холеру:
- отбирать колонии со щелочного агара и среды TCBS с характерным для вибрионов ростом;
- выполнять микроскопию мазков, окрашенных по Граму, на всех этапах исследования;
- определять индофенолоксидазу;
- ставить с подозрительными на холерный вибрион колониями реакцию слайд-агглютинации с холерными сыворотками O1, Огава, Инаба, RO и O139 и учитывать результаты;
- выполнять микроскопию и оценку результатов мазков, обработанных флюоресцирующими иммуноглобулинами (МФА);
- выполнять реакцию иммобилизации вибрионов (РИВ) под влиянием специфических холерных сывороток;
- вести необходимую документацию. 1.3. Лаборанты, медицинские лабораторные техники и медицинские технологи должны знать:
- правила работы с материалом, подозрительным на зараженность возбудителями III-IV групп патогенности;
- этапы подготовительной работы (подготовку посуды, питательных сред, диагностических препаратов, реактивов;
- этапы лабораторного исследования на холеру;
- культуральные, морфологические свойства холерных вибрионов, отношение вибрионов к углеводам в полиуглеводных средах. 1.4. Лаборанты, медицинские лабораторные техники и медицинские технологи должны уметь:
- готовить к работе необходимые питательные среды (прилож. 3);
- готовить ингредиенты для окраски мазков по Граму;
- готовить разведения сывороток для постановки реакции слайд-агглютинации и иммунофлюоресценции;
- выполнять первичные посевы исследуемого материала и пересевы со сред обогащения;
- готовить мазки, фиксировать их, окрашивать по Граму, а также флюоресцирующими иммуноглобулинами;
- ставить пробу на индофенолоксидазу;
- проводить с подозрительными на холерный вибрион колониями реакцию слайд-агглютинации с холерными сыворотками O1, Огава, Инаба, RO и O139;
- ставить реакцию иммобилизации с холерными сыворотками;
- готовить отработанный материал для автоклавирования.
Требования к знаниям и умениям специалистов ФБУЗ «ЦГиЭ» и их филиалов, выполняющих бактериологические исследования на холеру 2.1. Врачи-бактериологи и биологи должны знать: — основные положения эпидемиологического надзора за холерой, в т.ч. в части, касающейся сроков, объемов и контингентов, подлежащих обследованию на холеру, сроков, объемов и вида исследуемых проб из объектов окружающей среды; — нормативные документы, регламентирующие проведение исследований на холеру; — требования биологической безопасности при работе с материалом, подозрительным на зараженность возбудителями III-IV групп патогенности, а также требования биологической безопасности при работе с материалом, подозрительным на зараженность возбудителем холеры;
- этапы подготовительной работы (подготовка питательных сред, диагностических препаратов, реактивов);
- требования к доставке клинического материала и проб из объектов внешней среды, регистрации, хранению, уничтожению;
- порядок исследования материала в условиях односменной и круглосуточной работы лаборатории;
- порядок исследования материала в зависимости от времени отбора и доставки его в лабораторию;
- этапы лабораторного исследования на холеру;
- методы ускоренной диагностики холеры;
- культуральные, морфологические, иммуносерологические и биохимические свойства холерных вибрионов;
- сроки выдачи предварительного положительного результата исследования;
- правила и сроки передачи выделенных (подозрительных) культур. 2.2. Врачи-бактериологи и биологи должны уметь выполнять диагностическое исследование клинического материала на холеру:
- отбирать колонии со щелочного агара и среды TCBS с характерным для вибрионов ростом;
- выполнять микроскопию мазков, окрашенных по Граму, на всех этапах исследования;
- определять индофенолоксидазу;
- ставить с подозрительными на холерный вибрион колониями реакцию слайд-агглютинации с холерными сыворотками O1, Огава, Инаба, RO и O139;
- выполнять микроскопию и оценку результатов мазков, обработанных флюоресцирующими иммуноглобулинами (МФА);
- выполнять реакцию иммобилизации вибрионов (РИВ) под влиянием специфических холерных сывороток;
- вести необходимую документацию. 2.3. Лаборанты, медицинские лабораторные техники и медицинские технологи должны знать:
- правила работы с материалом, подозрительным на зараженность возбудителями III-IV групп патогенности;
- этапы подготовительной работы (подготовку посуды, питательных сред, диагностических препаратов, реактивов;
- этапы лабораторного исследования на холеру;
- культуральные, морфологические свойства холерных вибрионов, отношение вибрионов к углеводам в полиуглеводных средах. 2.4. Лаборанты, медицинские лабораторные техники и медицинские технологи должны уметь:
- осуществлять отбор проб воды из поверхностных водоемов, сточных вод и других объектов окружающей среды;
- готовить к работе необходимые питательные среды (прилож. 3);
- готовить ингредиенты для окраски мазков по Граму;
- готовить разведения сывороток для постановки реакции слайд-агглютинации и иммунофлюоресценции (при наличии люминесцентного микроскопа);
- выполнять первичные посевы исследуемого материала и пересевы со сред обогащения;
- готовить мазки, фиксировать их, окрашивать по Граму, а также флюоресцирующими иммуноглобулинами;
- ставить пробу на индофенолоксидазу;
- проводить с подозрительными на холерный вибрион колониями реакцию слайд-агглютинации с холерными сыворотками O1, Огава, Инаба, RO и O139;
- ставить реакцию иммобилизации с холерными сыворотками;
- готовить отработанный материал для автоклавирования.
Требования к знаниям и умениям специалистов лабораторий ООИ ФБУЗ «ЦГиЭ», выполняющих бактериологические исследования на холеру 3.1. Врачи-бактериологи и биологи должны знать: — основные положения эпидемиологического надзора за холерой, в том числе в части, касающейся обследования больных на холеру; — нормативные документы, регламентирующие проведение исследований на холеру; — требования биологической безопасности при работе с материалом, подозрительным на зараженность возбудителями II-IV групп патогенности, а также требования биологической безопасности при работе с материалом, подозрительным на зараженность возбудителем холеры; — этапы подготовительной работы (подготовка питательных сред, диагностических препаратов, реактивов); — требования к доставке клинического материала, регистрации, его хранению, уничтожению; — порядок исследования материала в условиях односменной и круглосуточной работы лаборатории; — порядок исследования материала в зависимости от времени отбора и доставки его в лабораторию; — этапы лабораторного исследования на холеру; — методы ускоренной диагностики холеры; — культуральные, морфологические, иммуносерологические и биохимические свойства холерных вибрионов; — сроки выдачи предварительного положительного результата исследования; — правила и сроки передачи выделенных (подозрительных) культур; — методы контроля качества питательных сред и ингибиторов посторонней микрофлоры;
- методы определения чувствительности к диагностическим фагам
  + — классическому и эльтор, холерным эльтор фагам ctx и ctx ; — методы оценки эпидемической значимости холерных вибрионов; — методы определения антибиотикочувствительности холерных вибрионов. 3.2. Врачи-бактериологи и биологи должны уметь выполнять диагностическое исследование материала на холеру: — проводить исследование материала от больных и умерших с подозрением на холеру, от лиц, подлежащих бактериологическому обследованию на холеру, проб воды из стационарных и других точек отбора и других объектов окружающей среды, предусмотренных действующими санитарными правилами;
- идентифицировать выделенные культуры холерных вибрионов O1 и O139 серогрупп по сокращенной и полной схеме с определением эпидзначимости холерных вибрионов по наличию генов ctxA и tcpA, гемолитической активности
  + — и чувствительности к фагам ctx и ctx ; — определять антибиотикочувствительность выделенных культур; — устанавливать таксономическую принадлежность холерных вибрионов не O1/не O139 серогрупп и других представителей рода Vibrio и семейства Vibrionaceae; — вести необходимую документацию. 3.3. Лаборанты, медицинские лабораторные техники и медицинские технологи должны знать: — правила работы с материалом, подозрительным на зараженность возбудителями III-IV групп патогенности;
  - этапы подготовительной работы (подготовку посуды, питательных сред, диагностических препаратов, реактивов);
  - этапы лабораторного исследования на холеру;
  - культуральные, морфологические и антигенные свойства холерных вибрионов, отношение вибрионов к углеводам в полиуглеводных средах;
  - методы полной и сокращенной идентификации холерных вибрионов O1 и O139 серогрупп;
  - методы идентификации культур холерных вибрионов не O1/не O139 серогрупп и других представителей рода Vibrio и семейства Vibrionaceae;
  - методы определения качества питательных сред и ингибиторов роста посторонней микрофлоры. 3.4. Лаборанты, медицинские лабораторные техники и медицинские технологи должны уметь:
  - готовить к работе необходимые питательные среды (прилож. 3);
  - готовить ингредиенты для окраски мазков по Граму;
  - готовить разведения сывороток для постановки реакции слайд-агглютинации и иммунофлюоресценции (при наличии люминесцентного микроскопа);
  - выполнять первичные посевы исследуемого материала и пересевы со сред обогащения;
  - готовить мазки, фиксировать их, окрашивать по Граму, а также флюоресцирующими иммуноглобулинами;
  - ставить пробу на индофенолоксидазу;
  - проводить с подозрительными на холерный вибрион колониями реакцию слайд-агглютинации и объемную реакцию агглютинации с холерными сыворотками O1, Огава, Инаба, RO и O139;
  - ставить реакцию иммобилизации с холерными сыворотками;
  - готовить отработанный материал для автоклавирования.
Требования к знаниям и умениям специалистов Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I-II групп патогенности, Центров индикации и диагностики возбудителей опасных инфекционных болезней, Референс-центра по мониторингу за холерой и Национального Центра верификации диагностической деятельности, выполняющих бактериологические исследования на холеру 4.1. Врачи-бактериологи и биологи должны знать: — основные положения эпидемиологического надзора за холерой; — вопросы организации лабораторных исследований на холеру; — требования биологической безопасности при работе с зараженным и подозрительным на заражение микроорганизмами II группы патогенности материалом; — таксономию и классификацию представителей семейства Vibrionaceae; — морфологические, культуральные, биохимические свойства холерных вибрионов; — серологические методы изучения свойств холерных вибрионов;
- определение чувствительности к диагностическим фагам классическому и
  + — эльтор, холерным фагам эльтор ctx и ctx ; — методы определения эпидемической значимости холерных вибрионов; — определение чувствительности к антибиотикам, химиопрепаратам и дезинфектантам; — этапы лабораторного исследования на холеру, сроки выдачи ответов, правила и сроки передачи выделенных культур; — требования к доставке материала, его хранению, регистрации, уничтожению, подготовке к передаче и транспортированию; — этапы подготовительной работы (подготовку питательных сред для выделения и идентификации холерных вибрионов, диагностических препаратов, реактивов); — методы серологической диагностики холеры у людей; — критерии оценки качества питательных сред, используемых для диагностики холеры, ингибиторов посторонней микрофлоры; — нормативные документы, используемые при проведении лабораторных исследований на холеру. 4.2. Врачи-бактериологи и биологи должны уметь: — провести полное исследование по схеме лабораторной диагностики холеры материала от больных и умерших с подозрением на холеру, проб из объектов окружающей среды; — идентифицировать выделенные культуры холерных вибрионов O1 и O139 серогрупп по сокращенной и полной схеме; — определить эпидемическую значимость культур; — определить чувствительность к антибиотикам выделенных культур; — провести серологическую диагностику материала от больных холерой, вибриононосителей и других контингентов — по эпидпоказаниям; — установить таксономическую принадлежность холерных вибрионов не O1/не O139 серогрупп и других представителей рода Vibrio и семейства Vibrionaceae; — осуществлять контроль качества питательных сред и ингибиторов посторонней микрофлоры; — вести необходимую документацию. 4.3. Лаборанты, медицинские лабораторные техники и медицинские технологи должны знать: — морфологические, культуральные и основные биохимические свойства холерных вибрионов; — этапы лабораторного исследования на холеру; — методы полной и сокращенной идентификации холерных вибрионов O1 и O139 серогрупп; — методы идентификации культур холерных вибрионов не O1/не O139 серогрупп и других представителей рода Vibrio и семейства Vibrionaceae; — методы серологической диагностики холеры; — правила работы с материалом, зараженным или подозрительным на заражение возбудителем холеры; — этапы подготовительной работы (подготовку посуды, красок, питательных сред для выделения и идентификации холерных вибрионов, диагностических препаратов, реактивов); — методы определения качества питательных сред и ингибиторов посторонней микрофлоры. 4.4. Лаборанты, медицинские лабораторные техники и медицинские технологи должны уметь: — приготовить или подготовить к работе питательные среды для выделения и идентификации холерных вибрионов (прилож. 3); — приготовить основные ингредиенты для окраски мазков по Граму; — приготовить реактивы для постановки пробы на оксидазу, выявления образования ацетилметилкарбинола, индола, сероводорода, нитратредуктазы, бета-галактозидазы; — подготовить разведения сывороток для постановки слайд- и развернутой реакции агглютинации и иммунофлуоресценции; — произвести первичные посевы и пересевы поступившего материала; — сделать мазки, зафиксировать их и окрасить; — поставить пробу на индофенолоксидазу; — поставить слайд- и развернутую реакцию агглютинации с холерными сыворотками; — поставить реакцию иммобилизации с холерными сыворотками; — провести определение качества питательных сред и теллурита калия; — подготовить отработанный материал для автоклавирования; — участвовать: — в идентификации выделенной культуры по полной и сокращенной схеме; — в определении эпидемической значимости выделенной культуры по регламентированным для этих лабораторий тестам; — в определении антибиотикочувствительности выделенных культур; — в исследовании сывороток крови больных холерой и вибриононосителей в системе серологических реакций.

Приложение 3

ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ,
ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ПРИ ПРОВЕДЕНИИ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ХОЛЕРЫ

   N     Питательные      Территориальный уровень        Региональный уровень       Федеральный     п/п       среды                                                                     уровень                                                                                                                               ЛПУ  филиалы ФБУЗ    ФБУЗ    региональ- региональ- центры  рефе-  нацио-                                ФБУЗ   ЦГиЭ    ЦГиЭ (с ные центры ные центры индика- ренс-  нальный                               ЦГиЭ   (без    лабора- по монито- по монито- ции и   центр  центр                                        лабора- ториями рингу за   рингу за   диагно- по мо- верифи-                                      торий   ООИ)    возбудите- возбудите- стики   нито-  кации                                        ООИ)            лями II-   лями I-            рингу                                                               IV групп   II групп           за хо-                                                              патогенно- патогенно-         лерой                                                               сти        сти                                                                                                                                    1          2          3      4       5       6        7          8         9      10     11                                                                                                         1   Основной          -      +       +       +        +          +         +      +       +           раствор пептона                                                                                                                                                                                 2   1%-я пептонная    +      +       +       +        +          +         +      +       +           вода                                                                                                                                                                                            3   Щелочной агар     +      +       +       +        +          +         +      +       +                                                                                                         4   TCBS              +      +       +       +        +          +         +      +       +                                                                                                         5   СЭДХ              +      +       +       +        +          +         +      +       +                                                                                                         6   Полиуглеводные    +      +       +       +        +          +         +      +       +           среды                                                                                                                                                                                           7   Среда Хью-        -      +       +       +        +          +         +      +       +           Лейфсона                                                                                                                                                                                        8   Среда Гисса с     -      +       +       +        +          +         +      +       +           сахарозой                                                                                                                                                                                       9   Среда Гисса с     -      +       +       +        +          +         +      +       +           маннозой                                                                                                                                                                                        10  Среда Гисса с     -      +       +       +        +          +         +      +       +           арабинозой                                                                                                                                                                                      11  Среда Гисса с     -      +       +       +        +          +         +      +       +           лактозой                                                                                                                                                                                        12  Среда Гисса с     -      +       +       +        +          +         +      +       +           глюкозой                                                                                                                                                                                        13  Среда Гисса с     -      +       +       +        +          +         +      +       +           инозитом                                                                                                                                                                                        14  Среда Гисса с     -      +       +       +        +          +         +      +       +           маннитом                                                                                                                                                                                        15  Среда Гисса с     -      -       -       +        +          +         +      +       +           крахмалом                                                                                                                                                                                       16  Бульон Мартена    -      -       -       +        +          +         +      +       +           pH 7,6                                                                                                                                                                                          17  Среда для         -      +       +       +        +          +         +      +       +           определения                                                                                       декарбоксилазы                                                                                    лизина                                                                                                                                                                                          18  Среда для         -      +       +       +        +          +         +      +       +           определения                                                                                       декарбоксилазы                                                                                    орнитина                                                                                                                                                                                        19  Среда для         -      +       +       +        +          +         +      +       +           определения                                                                                       дигидролазы                                                                                       аргинина                                                                                                                                                                                        20  Бульон Кларка     -      -       -       +        +          +         +      +       +                                                                                                         21  Среда с           -      -       -       +        +          +         +      +       +           желатиной                                                                                                                                                                                       22  Питательный       -      -       -       +        +          +         +      +       +           агар pH 7,2                                                                                                                                                                                     23  Бульон            -      -       -       +        +          +         +      +       +           Хоттингера pH                                                                                     7,2                                                                                                                                                                                             24  Бульон            -      -       -       +        +          +         +      +       +           Хоттингера с                                                                                      0,1%                                                                                              азотнокислого                                                                                     калия (KNO3)                                                                                      pH 7,2                                                                                                                                                                                          25  Питательный       -      -       -       +        +          +         +      +       +           агар с 10%                                                                                        лактозы                                                                                                                                                                                         26  Агар Мартена      -      -       -       +        +          +         +      +       +           0,3 - 0,5 - 0,7%                                                                                  pH 7,6                                                                                                                                                                                          27  Питательная       -      -       -       +        +          +         +      +       +           среда для                                                                                         определения                                                                                       чувствительно-                                                                                    сти к                                                                                             антибактериаль-                                                                                   ным препаратам

Приложение 4

ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫ, ТЕСТ-СИСТЕМЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ПРИ ПРОВЕДЕНИИ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ХОЛЕРЫ

   N    Диагностические   Территориальный уровень     Региональный уровень       Федеральный      п/п     препараты,                                                               уровень              тест-системы,                                                                                   биологические      ЛПУ  фи-   ФБУЗ  ФБУЗ  региональ- региональ- центры рефе-    нацио-             препараты            лиалы ЦГиЭ  ЦГиЭ  ные центры ные центры инди-  ренс-    нальный                                 ФБУЗ  (без  (с    по монито- по монито- кации  центр по центр                                   ЦГиЭ  лабо- лабо- рингу за   рингу за   и ди-  монито-  верифи-                                       рато- рато- возбудите- возбудите- агно-  рингу за кации                                         рий   риями лями II-IV лями I-    стики  холерой                                                ООИ)  ООИ)  групп      II групп                                                                             патогенно- патогенно-                                                                           сти        сти                                                                                                                                   1           2            3     4     5     6       7          8        9       10      11                                                                                                       1  Иммуноглобулины     + <> + <> + <>   +       +          +        +       +        +          диагностические                                                                                 флуоресцирующие                                                                                 холерные                                                                                        адсорбированные,                                                                                лошадиные                                                                                                                                                                                    2  Сыворотка             +     +     +     +       +          +        +       +        +          диагностическая                                                                                 холерная O1                                                                                     адсорбированная                                                                                 сухая для РА                                                                                                                                                                                 3  Сыворотка             +     +     +     +       +          +        +       +        +          диагностическая                                                                                 холерная Огава                                                                                  адсорбированная                                                                                 сухая для РА                                                                                                                                                                                 4  Сыворотка             +     +     +     +       +          +        +       +        +          диагностическая                                                                                 холерная Инаба                                                                                  адсорбированная                                                                                 сухая для РА                                                                                                                                                                                 5  Сыворотка             +     +     +     +       +          +        +       +        +          диагностическая                                                                                 холерная RO                                                                                     адсорбированная                                                                                 сухая для РА                                                                                                                                                                                 6  Сыворотка             +     +     +     +       +          +        +       +        +          диагностическая                                                                                 холерная O139                                                                                   адсорбированная                                                                                 сухая для РА на                                                                                 стекле                                                                                                                                                                                       7  Бактериофаги          -     -     -     +       +          +        +       +        +          диагностические                                                                                 холерные                                                                                        классический и                                                                                  эльтор                                                                                                                                                                                       8  Бактериофаги          -     -     -     +       +          +        +       +        +          диагностические                                                                                 холерные                                                                                        ctx+ и ctx-                                                                                                                                                                                  9  Микротест-система     -     +     +     +       +          +        +       +        +          для ускоренного                                                                                 определения групп                                                                               вибрионов по                                                                                    Хейбергу (МТС-Х)                                                                                                                                                                            10  Микрообъемная         -     +     +     +       +          +        +       +        +          тест-система для                                                                                биохимической                                                                                   идентификации                                                                                   вибрионов                                                                                                                                                                                   11  Системы               -     +     +     +       +          +        +       +        +          индикаторные                                                                                    бумажные для                                                                                    идентификации                                                                                   микроорганизмов:                                                                                Система 1 - для                                                                                 идентификации                                                                                   вибрионов                                                                                                                                                                                   12  Комплемент сухой      -     -     -     +       +          +        +       +        +                                                                                                      13  Эритроциты барана     -     -     -     +       +          +        +       +        +          (свежие или                                                                                     консервированные)                                                                                                                                                                           14  Эритроциты куриные    -     -     -     +       +          +        +       +        +          или морской свинки                                                                              (свежие или кон-                                                                                сервированные)                                                                                                                                                                              15  Тест-система    для   -     -     -     +       +          +        +       +        +          выявления ДНК                                                                                   V. cholerae                                                                                           +        +                                                                                (ctx A  и tcp A )                                                                                                                                                                           16  Набор реактивов       -     -     -     +       +          +        +       +        +          для проведения                                                                                  электрофореза                                                                                   продуктов ПЦР                                                                                                                                                                               17  Набор для             -     -     -     +       +          +        +       +        +          выделения ДНК на                                                                                основе метода                                                                                   нуклеосорбции                                                                                                                                                                               18  Универсальный         -     -     -     +       +          +        +       +        +          набор для                                                                                       амплификации ДНК                                                                                                                                                                            19  Тест-система          +     +     +     +       +          +        +       +        +          ОКСИ-тест                                                                                                                                                                                   20  Диагностикум          -     -     -     +       +          +        +       +        +          антилипазный                                                                                    иммуноглобулиновый                                                                              полимерный сухой                                                                                для выявления                                                                                   гемолитических                                                                                  штаммов холерных                                                                                вибрионов                                                                                                                                                                                   21  ИХА-тест на O1        -     -     -     +       +          +        +       +        +                                                                                                      22  ИХА-тест на O139      -     -     -     +       +          +        +       +        +

<> При наличии люминесцентного микроскопа

Приложение 5

ХИМИЧЕСКИЕ РЕАКТИВЫ,
ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ПРИ ПРОВЕДЕНИИ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ХОЛЕРЫ

   N    Реактивы и краски  Территориальный уровень      Региональный уровень        Федеральный      п/п                                                                                 уровень                                                                                                                                     ЛПУ  фи-   ФБУЗ  ФБУЗ   региональ-  региональ- центры рефе-    нацио-                                   лиалы ЦГиЭ  ЦГиЭ   ные центры  ные центры инди-  ренс-    нальный                                  ФБУЗ  (без  (с ла- по монито-  по монито- кации  центр по центр                                    ЦГиЭ  лабо- бора-  рингу за    рингу за   и диа- монито-  верифи-                                        рато- тория- возбудите-  возбудите- гнос-  рингу за кации                                          рий   ми     лями II-    лями I-    тики   холерой                                                 ООИ)  ООИ)   IV групп    II групп                                                                               патогенно-  патогенно-                                                                             сти         сти                                                                                                                                      1            2            3     4     5     6         7          8        9       10      11                                                                                                                  Краски                                                                                                                                                                                        1   Бромтимоловый         -     -     -     +         +          +        +       +        +           синий                                                                                                                                                                                             2   Генцианвиолет         +     +     +     +         +          +        +       +        +                                                                                                          3   Феноловый красный     +     +     +     +         +          +        +       +        +                                                                                                          4   Фуксин основной       +     +     +     +         +          +        +       +        +

Сахара и многоатомные

спирты

5 Арабиноза — + + + + + + + +

6 Инозит — + + + + + + + +

7 Глюкоза + + + + + + + + +

8 Маннит — + + + + + + + +

9 Манноза — + + + + + + + +

10 Лактоза + + + + + + + + +

11 Сахароза + + + + + + + + +

Аминокислоты

12 Лизин — + + + + + + + +

13 Орнитин — + + + + + + + +

14 Аргинин — + + + + + + + +

Реактивы

15 альфа-нафтиламин — — — + + + + + +

16 альфа-нафтол + + + + + + + + +

   17  Диметил-              +     +     +     +         +          +        +       +        +           парафенилендиамин                                                                                  дигидрохлорид                                                                                      (или тетраметил-                                                                                   парафенилендиамин,                                                                                 или аминодиметил-                                                                                  анилин гидрохлорид                                                                                 (оксалат)                                                                                                                                                                                         18  Железо                +     +     +     +         +          +        +       +        +           серно-кислое                                                                                       закисное                                                                                                                                                                                          19  Йод                   +     +     +     +         +          +        +       +        +           кристаллический                                                                                                                                                                                   20  Калий                 -     -     -     +         +          +        +       +        +           азотно-кислый                                                                                                                                                                                     21  Калий едкий           -     -     -     +         +          +        +       +        +                                                                                                          22  Калий йодистый        +     +     +     +         +          +        +       +        +                                                                                                          23  Калий                 -     -     -     +         +          +        +       +        +           фосфорно-кислый                                                                                    двузамещенный                                                                                      (K2HPO4)                                                                                                                                                                                          24  Калий                 +     +     +     +         +          +        +       +        +           фосфорно-кислый                                                                                    однозамещенный                                                                                     (KH2PO4)                                                                                                                                                                                          25  Калия нитрат          +     +     +     +         +          +        +       +        +                                                                                                          26  Калия теллурит        +     +     +     +         +          +        +       +        +                                                                                                          27  Кислота борная        -     -     -     +         +          +        +       +        +                                                                                                          28  Кислота карболовая    +     +     +     +         +          +        +       +        +                                                                                                          29  Кислота лимонная      -     -     -     +         +          +        +       +        +                                                                                                          30  Кислота уксусная      -     -     -     +         +          +        +       +        +                                                                                                          31  Кислота соляная       -     -     -     +         +          +        +       +        +                                                                                                          32  Кислота               -     -     -     +         +          +        +       +        +           сульфаниловая                                                                                                                                                                                     33  Кислота щавелевая     -     -     -     +         +          +        +       +        +                                                                                                          34  Натрий                -     -     -     +         +          +        +       +        +           двууглекислый                                                                                                                                                                                     35  Натрий едкий          +     +     +     +         +          +        +       +        +                                                                                                          36  Натрий                -     -     -     +         +          +        +       +        +           лимонно-кислый                                                                                     (цитрат)                                                                                                                                                                                          37  Натрий углекислый     +     +     +     +         +          +        +       +        +           (карбонат)                                                                                                                                                                                        38  Натрий                -     -     -     +         +          +        +       +        +           фосфатно-кислый                                                                                                                                                                                   39  Натрий хлористый      +     +     +     +         +          +        +       +        +                                                                                                          40  Натрия сульфат        +     +     +     +         +          +        +       +        +                                                                                                          41  Натрия сульфит        +     +     +     +         +          +        +       +        +                                                                                                          42  Натрия тиосульфат     +     +     +     +         +          +        +       +        +                                                                                                          43  Свинец                -     -     -     +         +          +        +       +        +           уксусно-кислый                                                                                                                                                                                    44  O-нитрофенил-бета-    -     -     -     +         +          +        +       +        +           Д-галактопиранозид                                                                                 (ONPG)                                                                                                                                                                                            45  Парадиметиламино-     -     -     -     +         +          +        +       +        +           бензальдегид                                                                                                                                                                                      46  Риванол               -     -     -     +         +          +        +       +        +                                                                                                                  Прочие                                                                                                                                                                                        47  Вода                  +     +     +     +         +          +        +       +        +           дистиллированная                                                                                                                                                                                  48  Глицерин              +     +     +     +         +          +        +       +        +                                                                                                          49  Желатина              -     -     -     +         +          +        +       +        +                                                                                                          50  Крахмал               -     -     -     +         +          +        +       +        +           растворимый                                                                                                                                                                                       51  Масло вазелиновое     -     -     -     +         +          +        +       +        +                                                                                                          52  Масло иммерсионное    +     +     +     +         +          +        +       +        +                                                                                                          53  Масло иммерсионное    +     +     +     +         +          +        +       +        +           нефлуоресцирующее                                                                                                                                                                                 54  Песок кварцевый       -     +     +     +         +          +        +       +        +

Прочие медикаменты и

дезсредства

55 Спирт этиловый + + + + + + + + +

56 Хлороформ — — — — — — — + +

   57  Хлорамин или другие   +     +     +     +         +          +        +       +        +           регламентированные                                                                                 дезинфектанты

Приложение 6

ПРИБОРЫ, ОБОРУДОВАНИЕ, РАСХОДНЫЕ МАТЕРИАЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ПРИ ПРОВЕДЕНИИ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ХОЛЕРЫ

   N       Приборы        Территориальный уровень     Региональный уровень     Федеральный     п/п   и оборудование                                                           уровень                                                                                                                            ЛПУ  фи-   ФБУЗ  ФБУЗ    регио-    регио-    центры рефе-  нацио-                                 лиалы ЦГиЭ  ЦГиЭ (с нальные   нальные   инди-  ренс-  нальный                                ФБУЗ  (без  лабора- центры по центры по кации  центр  центр                                  ЦГиЭ  лабо- ториями монито-   монито-   и ди-  по мо- верифи-                                      рато- ООИ)    рингу за  рингу за  агно-  нито-  кации                                        рий           возбуди-  возбуди-  стики  рингу                                               ООИ)          телями    телями           за хо-                                                            II-IV     I-II             лерой                                                             групп па- групп па-                                                                          тогенно-  тогенно-                                                                           сти       сти                                                                                                                             1           2           3     4     5      6        7         8       9      10      11                                                                                                   1   Автоклав            +     +     +      +        +         +       +       +      +                                                                                                    2   Аппарат для         -     -     -      +        +         +       +       +      +           инактивирования                                                                              сывороток                                                                                                                                                                             3   Боксы               +     +     +      +        +         +       +       +      +           биологической                                                                                безопасности II                                                                              класса                                                                                                                                                                                4   Весы                +     +     +      +        +         +       +       +      +                                                                                                    5   Гидропульт          +     +     +      +        +         +       +       +      +                                                                                                    6   Дистиллятор         +     +     +      +        +         +       +       +      +           электрический                                                                                                                                                                         7   Лабораторный        +     +     +      +        +         +       +       +      +           pH-метр                                                                                                                                                                               8   Лупа ручная         +     +     +      +        +         +       +       +      +           1 x 10, 1 x 2,5                                                                                                                                                                       9   Микроскоп           +     +     +      +        +         +       +       +      +           бинокулярный                                                                                                                                                                          10  Микроскоп           +     +     +      +        +         +       +       +      +           люминесцентный                                                                                                                                                                        11  Микроскоп           +     +     +      +        +         +       +       +      +           с устройством                                                                                косого освещения                                                                                                                                                                      12  Облучатель          -     +     +      +        +         +       +       +      +           бактерицидный                                                                                                                                                                         13  Осветители к        +     +     +      +        +         +       +       +      +           микроскопам                                                                                                                                                                           14  Пипетки             +     +     +      +        +         +       +       +      +           автоматические                                                                                                                                                                        15  Стерилизаторы       +     +     +      +        +         +       +       +      +           электрические                                                                                разных размеров                                                                                                                                                                       16  Сухожаровой шкаф    +     +     +      +        +         +       +       +      +           стерилизационный                                                                                                                                                                      17  Термостат           +     +     +      +        +         +       +       +      +                                                                                                    18  Устройство          +     +     +      +        +         +       +       +      +           фазово-                                                                                      контрастное                                                                                                                                                                           19  Холодильник         +     +     +      +        +         +       +       +      +           бытовой                                                                                                                                                                               20  Центрифуга          +     +     +      +        +         +       +       +      +           лабораторная                                                                                                                                                                          21  Бикс                +     +     +      +        +         +       +       +      +           металлический                                                                                                                                                                         22  Ножницы             +     +     +      +        +         +       +       +      +                                                                                                    23  Скальпель           +     +     +      +        +         +       +       +      +                                                                                                    24  Пинцет              +     +     +      +        +         +       +       +      +           анатомический                                                                                                                                                                         25  Петледержатели      +     +     +      +        +         +       +       +      +                                                                                                    26  Петли бактерио-     +     +     +      +        +         +       +       +      +           логические                                                                                                                                                                            27  Петли ректальные    +     +     +      +        +         +       +       +      +           для забора                                                                                   материала                                                                                                                                                                             28  Пробки              +     +     +      +        +         +       +       +      +           целлюлозные                                                                                  разного размера                                                                                                                                                                       29  Пробки резиновые    +     +     +      +        +         +       +       +      +           разного размера                                                                                                                                                                       30  Стандарт            -     -     -      +        +         +       +       +      +           мутности для                                                                                 приготовления                                                                                микробной взвеси                                                                             N 5 и N 10                                                                                                                                                                            31  Фильтры             -     +     +      +        +         +       +       +      +           мембранные N 2 и                                                                             N 3                                                                                                                                                                                   32  Фильтры Зейтца      -     +     +      +        +         +       +       +      +           30 мм                                                                                        с устройством                                                                                для фильтрации                                                                                                                                                                        33  Часы песочные       +     +     +      +        +         +       +       +      +                                                                                                    34  Чашки Петри         +     +     +      +        +         +       +       +      +           одноразовые                                                                                                                                                                           35  Штативы на 40 и     +     +     +      +        +         +       +       +      +           20 гнезд

Оборудование для ПЦР

       диагностики                                                                                 и генетических                                                                                исследований                                                                                                                                                                          1   Автоматический      -     -     -      +        +         +       +       +      +           флюориметр типа                                                                              "Джин"                                                                                                                                                                                2   Видеосистема        -     -     -      +        +         +       +       +      +           результатов                                                                                  электрофореза                                                                                                                                                                         3   Источник            -     -     -      +        +         +       +       +      +           постоянного тока                                                                                                                                                                      4   Компьютер           -     -     -      +        +         +       +       +      +                                                                                                    5   Комплект для        -     -     -      +        +         +       +       +      +           проведения                                                                                   электрофореза                                                                                                                                                                         6   Программируемый     -     -     -      +        +         +       +       +      +           термоциклер                                                                                  (амплификатор)                                                                                                                                                                        7   Пробирки            -     -     -      +        +         +       +       +      +           пропиленовые                                                                                 разного объема                                                                                                                                                                        8   Твердотельный       -     -     -      +        +         +       +       +      +           термостат                                                                                                                                                                             9   Ультрафиолетовый    -     -     -      +        +         +       +       +      +           трансиллюминатор                                                                             310 - 320 нм                                                                                 фильтр 20 x 20 см                                                                                                                                                                     10  Фотоаппарат         -     -     -      +        +         +       +       +      +           цифровой с                                                                                   комплектом                                                                                   светофильтров                                                                                                                                                                         11  Центрифуга          -     -     -      +        +         +       +       +      +           лабораторная                                                                                 настольная                                                                                                                                                                            12  Микроцентрифуга     -     -     -      +        +         +       +       +      +           лабораторная                                                                                 настольная 1200 g                                                                                                                                                                     13  Амплификатор для    -     -     -      +        +         +       +       +      +           проведения                                                                                   амплификации в                                                                               режиме реального                                                                             времени                                                                                                                                                                               14  ПЦР-бокс            -     -     -      +        +         +       +       +      +                                                                                                    15  Комплект            -     -     -      +        +         +       +       +      +           автоматических                                                                               пипеток                                                                                                                                                                               16  Секвенатор          -     -     -      -        -         -       -       -      +                                                                                                       Оборудование

для отбора проб

   1   Комплект            +     +     +      +        +         +       +       +      +           медицинский                                                                                  (укладка                                                                                     универсальная                                                                                для забора мате-                                                                             риала от людей и                                                                             из объектов                                                                                  окружающей среды                                                                             для исследования                                                                             на особо опасные                                                                             инфекционные                                                                                 болезни)

Стекло лабораторное

   1   Банки стеклянные    +     +     +      +        +         +       +       +      +           с притертой                                                                                  пробкой разного                                                                              размера                                                                                                                                                                               2   Бутыли емкостью     -     +     +      +        +         +       +       +      +           1 л                                                                                                                                                                                   3   Пипетки градуи-     +     +     +      +        +         +       +       +      +           рованные на 1,                                                                               2, 5, 10 мл                                                                                                                                                                           4   Пипетки             +     +     +      +        +         +       +       +      +           пастеровские                                                                                                                                                                          5   Пробирки            -     -     -      +        +         +       +       +      +           агглютинационные                                                                                                                                                                      6   Пробирки бакте-     +     +     +      +        +         +       +       +      +           риологические                                                                                                                                                                         7   Пробирки            -     -     -      +        +         +       +       +      +           центрифужные                                                                                                                                                                          8   Поплавки            -     -     -      +        +         +       +       +      +                                                                                                    9   Стаканы             +     +     +      +        +         +       +       +      +           фарфоровые или                                                                               граненые                                                                                                                                                                              10  Стекло              +     +     +      +        +         +       +       +      +           предметное                                                                                                                                                                            11  Стекло с лункой     +     +     +      +        +         +       +       +      +                                                                                                    12  Стекло покровное    +     +     +      +        +         +       +       +      +                                                                                                    13  Ступки              +     +     +      +        +         +       +       +      +           фарфоровые                                                                                                                                                                            14  Спиртовки           +     +     +      +        +         +       +       +      +                                                                                                    15  Флаконы разного     +     +     +      +        +         +       +       +      +           объема                                                                                                                                                                                16  Цилиндры мерные     +     +     +      +        +         +       +       +      +                                                                                                    17  Шпатели             -     -     -      +        +         +       +       +      +

Приложение 7

АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫЕ ПРЕПАРАТЫ,
ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ПРИ ПРОВЕДЕНИИ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ХОЛЕРЫ

   N   Антибактериальные  Территориальный уровень      Региональный уровень      Федеральный    п/п      препараты                                                               уровень             и растворители                                                                                   для них        ЛПУ  фи-   ФБУЗ  ФБУЗ   региональ- региональ- центры рефе-  нацио-                                 лиалы ЦГиЭ  ЦГиЭ   ные центры ные центры инди-  ренс-  наль-                                  ФБУЗ  (без  (с ла- по монито- по монито- кации  центр  ный                                    ЦГиЭ  лабо- бора-  рингу за   рингу за   и ди-  по мо- центр                                        рато- тория- возбуди-   возбудите- агно-  нито-  вери-                                        рий   ми     телями     лями       стики  рингу  фика-                                        ООИ)  ООИ)   II-IV      I-II              за хо- ции                                                       групп па-  групп па-         лерой                                                            тогенно-   тогенно-                                                                           сти        сти                                                                                                                              1           2            3     4     5     6        7          8        9      10     11                                                                                                    1   Диметилсульфоксид    -     -     -     -        -          -        -      +      +           (растворитель для                                                                             АБП)                                                                                                                                                                                    2   Доксициклин          -     -     -     -        -          -        -      +      +                                                                                                     3   Тетрациклин          -     -     -     -        -          -        -      +      +                                                                                                     4   Левомицетин          -     -     -     -        -          -        -      +      +                                                                                                     5   Налидиксовая         -     -     -     -        -          -        -      +      +           кислота                                                                                                                                                                                 6   Ципрофлоксацин       -     -     -     -        -          -        -      +      +                                                                                                     7   Фуразолидон          -     -     -     -        -          -        -      +      +                                                                                                     8   Ампициллин           -     -     -     -        -          -        -      +      +                                                                                                     9   Цефотаксим           -     -     -     -        -          -        -      +      +                                                                                                     10  Рифампицин           -     -     -     -        -          -        -      +      +                                                                                                     11  Стрептомицин         -     -     -     -        -          -        -      +      +                                                                                                     12  Гентамицин           -     -     -     -        -          -        -      +      +                                                                                                     13  Канамицин            -     -     -     -        -          -        -      +      +                                                                                                     14  Сульфаметоксазол/    -     -     -     -        -          -        -      +      +           триметоприм или                                                                               сульфамонометак-                                                                              син/триметоприм                                                                                                                                                                         15  Полимиксин "M"       -     -     -     +        +          +        +      +      +           или "B"                                                                                                                                                                                 16  Диски с антибак-     -     -     -     +        +          +        +      +      +           териальными                                                                                   препаратами:                                                                                  доксициклин                                                                                   тетрациклин                                                                                   левомицетин                                                                                   налидиксовая                                                                                  кислота                                                                                       ципрофлоксацин                                                                                фуразолидон                                                                                   ампициллин                                                                                    цефотаксим                                                                                    рифампицин                                                                                    стрептомицин                                                                                  гентамицин                                                                                    канамицин                                                                                     сульфаметоксазол/                                                                             триметоприм или                                                                               сульфамонометак-                                                                              син/триметоприм

Приложение 8

ПЕРЕЧЕНЬ
ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ, ТЕСТ-СИСТЕМ И ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД ДЛЯ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ХОЛЕРЫ <*>

<*> Из практического руководства «Лабораторная диагностика опасных инфекционных болезней». М., 2009. — дополненное.

    N   Наименование препарата  Регистрационный      Номер удостоверения             Разработчик            п/п                               номер         нормативной документации                                                               удостоверения                                                                                                                                                                        1             2                    3                     4                            5                                                                                                                                             Зарегистрированные препараты, тест-системы и питательные среды                                                                                                                                  1   Иммуноглобулины         ФСР 2007/00 877  ТУ 8961-015-01 898 109-2007  ФГУЗ РосНИПЧИ "Микроб"             диагностические                                                       410005, г. Саратов, ул.            флуоресцирующие                                                       Университетская, д. 46             холерные                                                              Тел.: (8452) 26-21-31              адсорбированные                                                       Факс: (8452) 51-52-12              лошадиные, лиофилизат                                                 E-mail: [email protected]             для диагностических                                                   Веб-сайт: www.microbe.ru           целей                                                                                                                                                                                                         2   Сыворотки               ФСР 2007/00 467  ТУ 8938-010-01 898 109-2007             -"-                     диагностические                                                                                          холерные Огава и Инаба                                                                                   адсорбированные сухие                                                                                    для реакции                                                                                              агглютинации (РА)                                                                                                                                                                                             3   Сыворотка               ФСР 2007/00 468  ТУ 8938-009-01 898 109-2007             -"-                     диагностическая                                                                                          холерная O1                                                                                              адсорбированная сухая                                                                                    для реакции                                                                                              агглютинации (РА)                                                                                                                                                                                             4   Сыворотка               ФСР 2007/00 469  ТУ 8938-011-01 898 109-2007             -"-                     диагностическая                                                                                          холерная RO                                                                                              адсорбированная сухая                                                                                    для реакции                                                                                              агглютинации (РА)                                                                                                                                                                                             5   Тест-система для        ФСР 2007/00 100  ТУ 8895-006-01 898 109-2007             -"-                     выявления ДНК Vibrio                                                                                                    +                                                                                         cholerae (ctx A  )                                                                                       методом полимеразной                                                                                     цепной реакции (ГенХол)                                                                                                                                                                                       6   Бактериофаги            2007/01 532      ТУ 8637-014-01 898 109-2007             -"-                     диагностические                                                                                          холерные классический и                                                                                  эльтор, лиофилизат для                                                                                   диагностических целей                                                                                                                                                                                         7   Фаг дифференциально-    2007/00 466      ТУ 8937-013-01 898 109-2007             -"-                     диагностический (ДДФ)                                                                                    вида V. cholerae,                                                                                        лиофилизат для                                                                                           диагностических целей                                                                                                                                                                                         8   Бактериофаги            ФСР 2007/00 880  ТУ 8937-002-01 898 109-2007             -"-                     диагностические                                                                                                             +                                                                                     холерные эльтор CTX  и                                                                                      -                                                                                                     CTX , раствор для                                                                                        диагностических целей                                                                                             +      -                                                                                        (фаги ctx  и ctx )                                                                                                                                                                                            9   Микротест-система для   99/86/3          ФСП 42-0504-7632-06          Филиал ФГУП "Микроген" в           ускоренного определения                                               г. Махачкала НПО                   групп вибрионов по                                                    "Питательные среды"                Хейбергу (МТС-X)                                                                                                                                                                                             10   Микротест-система для   99/86/2          ФСП 42-0504-7631-06                     -"-                     биохимической                                                                                            идентификации вибрионов                                                                                  (МТС-V)                                                                                                                                                                                                      11   Системы индикаторные    ЛС-000 308       ФСП 42-0504 382-704          Филиал ФГУП НПО                    бумажные для                                                          "Микроген" в г. Нижний             идентификации                                                         Новгород Нижегородское             микроорганизмов (СИБ).                                                предприятие по                     Набор диагностический N                                               производству бактерийных           1 для идентификации                                                   препаратов "Имбио"                 вибрионов                                                                                                                                                                                                    12   Пептон основной сухой   ЛС-001 072       ФСП 42-05 042 128-04         Филиал ФГУП "Микроген" в                                                                                 г. Махачкала НПО                                                                                         "Питательные среды"                                                                                                                    13   Пептон основной сухой   0014/01-2002 г.  ФСП 42-0010-2040-01          ОАО "Биомед" им.                                                                                         И.И. Мечникова                                                                                           Московская обл.,                                                                                         п. Петрово-Дальнее

14 Питательная среда для ФСР 2009/05472 ТУ 9385-038-78095326-2008 ФГУН ГНЦ ПМБ

        накопления холерного                                                  142279, Московская                 вибриона сухая "Пептон                                                область,                           основной сухой"                                                       Серпуховский район, п.                                                                                   Оболенск                                                                                                 Тел.: (4967) 36-00-09                                                                                    Тел./факс: (4967) 36-00-20                                                                               E-mail: [email protected]                                                                                Веб-сайт:                                                                                                www.obolensk.org                                                                                                                       15   Питательная среда для   ЛС-001 094       ФСП 42-0504-2132-04          Филиал ФГУП "Микроген" в           выделения и                                                           г. Махачкала НПО                   культивирования                                                       "Питательные среды"                холерного вибриона                                                                                       (щелочной агар) сухая                                                                                                                                                                                        16   Питательная среда для   002 122/01-2003  ФСП 42-0010-2989-02          ОАО "Биомед" им. И.И.              выделения и             г.                                            Мечникова                          культивирования                                                       Московская обл.,                   холерного вибриона                                                    п. Петрово-Дальнее                 сухая (щелочной агар)

17 Питательная среда для ФСР 2009/05473 ТУ 9385-039-78095326-2008 ФГУН ГНЦ ПМБ

        выделения и                                                           142279, Московская                 культивирования                                                       область,                           холерного вибриона                                                    Серпуховский район, п.             сухая "Щелочной агар"                                                 Оболенск                                                                                                 Тел.: (4967) 36-00-09                                                                                    Тел./факс: (4967) 36-00-20                                                                               E-mail: [email protected]                                                                                Веб-сайт: www.obolensk.org                                                                                                             18   Набор реагентов для     ФСР 2011/10006   ТУ 9398-111-78095326-201                -"-                     бактериологических                                                                                       исследований                                                                                             "Питательная среда для                                                                                   первичной идентификации                                                                                  энтеробактерий сухая"                                                                                    (Железо-глюкозо-                                                                                         лактозный агар с                                                                                         мочевиной)                                                                                                                                                                                                   19   Питательная среда для   ФСР 2008/03494   ТУ 9398-049-78095326-2008               -"-                     идентификации                                                                                            энтеробактерий сухая                                                                                     (Среда Гисса-ГРМ с                                                                                       лактозой)                                                                                                                                                                                                    20   Питательная среда для   ФСР 2008/03494   ТУ 9398-049-78095326-2008               -"-                     идентификации                                                                                            энтеробактерий сухая                                                                                     (Среда Гисса-ГРМ с                                                                                       сахарозой)                                                                                                                                                                                                   21   Питательная среда для   ФСР 2008/03494   ТУ 9398-049-78095326-2008               -"-                     идентификации                                                                                            энтеробактерий сухая                                                                                     (Среда Гисса-ГРМ с                                                                                       глюкозой)                                                                                                                                                                                                    22   Питательная среда для   ФСР 2008/03494   ТУ 9398-049-78095326-2008               -"-                     идентификации                                                                                            энтеробактерий сухая                                                                                     (Среда Гисса-ГРМ с                                                                                       мальтозой)                                                                                                                                                                                                   23   Питательная среда для   ФСР 2008/03494   ТУ 9398-049-78095326-2008               -"-                     идентификации                                                                                            энтеробактерий сухая                                                                                     (Среда Гисса-ГРМ с                                                                                       маннитом)                                                                                                                                                                                                    24   Набор реагентов для     ФС 01012006/     ТУ 9398-013-78095326-2006               -"-                     контроля микробной      4122-06                                                                          загрязненности                                                                                           (трехсахарный агар с                                                                                     солями железа - для                                                                                      выявления сероводорода                                                                                   и определения                                                                                            ферментации лактозы,                                                                                     глюкозы, сахарозы)                                                                                       "Питательная среда N 13                                                                                  ГРМ"                                                                                                                                                                                                         25   Питательная среда для   ФСР 2008/02818   ТУ 9398-048-78095326-2007               -"-                     первичной идентификации                                                                                  энтеробактерий сухая                                                                                     (среда Ресселя-ГРМ)                                                                                                                                                                                          26   Бактериофаги            ФСР 2008/03009   ТУ 8637-019-01 898 109-2007  ФГУЗ РосНИПЧИ "Микроб"             диагностические                                                       410005, г. Саратов, ул.            холерные ТЭПВ-1,                                                      Университетская, д. 46             ТЭПВ-2, ТЭПВ-3,                                                       Тел.: (8452) 26-21-31              ТЭПВ-4, ТЭПВ-5, ТЭПВ-6,                                               Факс: (8452) 51-52-12              ТЭПВ-7, раствор для                                                   E-mail: [email protected]             диагностических целей                                                 Веб-сайт: www.microbe.ru                                                                                                               27   Сыворотка               ФСР 2008/03209   ТУ 9389-018-01 898 109-2008             -"-                     диагностическая                                                                                          холерная не O1 группы                                                                                    O139 адсорбированная                                                                                     кроличья для реакции                                                                                     агглютинации (РА) на                                                                                     стекле, лиофилизат для                                                                                   диагностических целей                                                                                                                                                                                            Незарегистрированные и разрабатываемые препараты и тест-системы (используются лабораториями                           территориального и регионального уровней только после регистрации)                                                                                                                               28   Питательная среда для                    ТУ 9398-062-78 095 326-2007  ФГУН ГНЦ ПМБ                       выделения возбудителя                                                 142279, Московская                 холеры сухая (типа                                                    область,                           TCBS)                                                                 Серпуховский район, п.                                                                                   Оболенск                                                                                                 Тел.: (4967) 36-00-09                                                                                    Тел./факс: (4967) 36-00-20                                                                               E-mail: [email protected]                                                                                Веб-сайт: www.obolensk.org                                                                                                             29   Набор реагентов для                                                              -"-                     иммунохроматографичес-                                                                                   кой идентификации                                                                                        микробных клеток                                                                                         возбудителя холеры (ИХ                                                                                   тест-полоска V.                                                                                          cholerae O1)                                                                                                                                                                                                 30   Иммунохроматографичес-                                                           -"-                     кая тест-система для                                                                                     экспресс-выявления и                                                                                     идентификации                                                                                            возбудителя холеры (ИХ                                                                                   тест-система V.                                                                                          cholerae O139)                                                                                                                                                                                               31   Иммунохроматографичес-                                                           -"-                     кая тест-система для                                                                                     экспресс-выявления и                                                                                     идентификации                                                                                            возбудителя холеры (ИХ                                                                                   тест-система V.                                                                                          cholerae Инаба)                                                                                                                                                                                              32   Иммунохроматографи-                                                              -"-                     ческая тест-система                                                                                      для экспресс-выявления                                                                                   и идентификации                                                                                          возбудителя холеры (ИХ                                                                                   тест-система V.                                                                                          cholerae Огава)                                                                                                                                                                                              33   Набор реагентов для                      ТУ 9398-058-01897593-2010    ФГУЗ РосНИПЧИ "Микроб"             выявления ДНК Vibrio                                                  410005, г. Саратов, ул.            cholerae и                                                            Университетская, д. 46             идентификации                                                         Тел.: (8452) 26-21-31              патогенных штаммов                                                    Факс: (8452) 51-52-12              Vibrio cholerae в                                                     E-mail: [email protected]             биологическом материале                                               Веб-сайт: www.microbe.ru           и объектах окружающей                                                 ФГУН ЦНИИ эпидемиологии,           среды методом                                                         ООО "Интерлабсервис"               полимеразной цепной                                                   119021, г. Москва,                 реакции (ПЦР) с                                                       Олсуфьевский переулок, д.          гибридизационно-                                                      8, стр. 1                          флуоресцентной                                                        Тел.: (495) 664-28-84              детекцией "АмплиСенс                                                  Факс: (495) 6642889                Vibrio cholerae - FL"                                                 E-mail:                                                                                                  [email protected]                                                                                  Веб-сайт:                                                                                                www.interlabservice.ru                                                                                                                 34   Набор реагентов для                                                   ФГУЗ РосНИПЧИ "Микроб"             выявления и ускоренной                                                410005, г. Саратов, ул.            идентификации Vibrio                                                  Университетская, д. 46             cholerae методом                                                      Тел.: (8452) 26-21-31              полимеразной цепной                                                   Факс: (8452) 51-52-12              реакции с                                                             E-mail: [email protected]             электрофоретическим                                                   Веб-сайт: www.microbe.ru           учетом результатов "Ген                                                                                  Vibrio cholera -                                                                                         идентификация - РЭФ"                                                                                                                                                                                         35   Иммуноферментная тест-                                                           -"-                     система для определения                                                                                  токсигенных штаммов                                                                                      холерного вибриона                                                                                                                                                                                           36   Диагностикум                                                          ФГУЗ "РостНИПЧИ"                   антилипазный                                                          344002, г. Ростов-на-              иммуноглобулиновый                                                    Дону, ул. Горького, 117            полимерный сухой для                                                  т. (863) 240-27-03                 выявления                                                             т/ф (863) 234-13-76                гемолитических штаммов                                                [email protected]                        холерных вибрионов                                                                                                                                                                                           37   Иммуноглобулины                                                                  -"-                     диагностические                                                                                          холерные моноклональные                                                                                  сухие для выявления                                                                                      холерных вибрионов O1 и                                                                                  O139 серогрупп                                                                                                                                                                                               38   Питательная среда для                                                            -"-                     выделения холерного                                                                                      вибриона элективно-                                                                                      дифференциальная сухая                                                                                   (СЭДХ)                                                                                                                                                                                                       39   Жидкая питательная                                                               -"-                     среда для                                                                                                культивирования                                                                                          холерного вибриона -                                                                                     ХДС-бульон на основе                                                                                     панкреатического                                                                                         перевара пекарских                                                                                       дрожжей (ПППД)                                                                                                                                                                                               40   Питательная среда для                                                            -"-                     культивирования                                                                                          холерного вибриона-ХДС-                                                                                  агар (ПППД)                                                                                                                                                                                                  41   Жидкая питательная                                                               -"-                     среда холерная                                                                                           накопительная (ХДС-Н)                                                                                                                                                                                        42   Сыворотки                                                             ФГУЗ ИркутскНИПЧИ                  диагностические                                                       664047, г. Иркутск, ул.            холерные Огава и Инаба                                                Трилиссера, 78                     адсорбированные сухие                                                 Тел./факс: (3952) 22-01-35         для реакции                                                           E-mail:                            агглютинации (РА)                                                     [email protected]                                                                                    Веб-сайт:                                                                                                www.irkutsk.ru/chumin/                                                                                                                 43   Сыворотка                                                                        -"-                     диагностическая                                                                                          холерная O1                                                                                              адсорбированная и                                                                                        неадсорбированная сухая                                                                                  для реакции                                                                                              агглютинации (РА)                                                                                                                                                                                            44   Питательная среда для                                                            -"-                     выделения и                                                                                              культивирования                                                                                          холерного вибриона                                                                                       (щелочной агар) сухая                                                                                                                                                                                        45   Тест-система для                                                      ФГУ                                выявления ДНК Vibrio                                                  "48 ЦНИИ МО РФ", г. Киров                        +                                                                                          cholerae (ctxA  и                                                                                            +                                                                                                    tcpA ) методом ПЦР

Приложение 9

СХЕМА
ПЕРЕДАЧИ ИНФОРМАЦИИ ПРИ ВЫДЕЛЕНИИ КУЛЬТУР, ПОДОЗРИТЕЛЬНЫХ НА ХОЛЕРНЫЕ ВИБРИОНЫ O1, O139 СЕРОГРУПП В БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРИИ
ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКИХ УЧРЕЖДЕНИЙ

Зав. бактериологической лабораторией (врач) ЛПУ

Главный врач ЛПУ

\/ \/

  Органы управления здравоохранением <          Территориальный отдел                 в городах, районах               > Управления Роспотребнадзора                                                         по субъекту                              .                                                                           .                                                                           \/                                      \/                 ....................................                                        .Органы управления здравоохранением.......> Управление Роспотребнадзора <   .  в субъекте Российской Федерации .                по субъекту         ... ....................................                                      .                  .                                       .                .                  .                                       .                .                  .                                       \/               .                  .                            .......................     .                  .                            . Территориальное ПЧУ .     .                  .                            .(станция, ПЧЦ, НИПЧИ).     .                  .                            .......................     .                  .                                                        .                  \/                   ..................................  .     ............................      .  Федеральная служба по надзору .  .     .Минздравсоцразвития России.<......в сфере защиты прав потребителей.<..     ............................      .     и благополучия человека    .                                       .................................. ........> Передача информации о предварительном положительном результате при проведении исследований по эпидпоказаниям

Приложение 10

СХЕМА
ПЕРЕДАЧИ ИНФОРМАЦИИ ПРИ ВЫДЕЛЕНИИ КУЛЬТУР, ПОДОЗРИТЕЛЬНЫХ НА ХОЛЕРНЫЕ ВИБРИОНЫ O1, O139 СЕРОГРУПП В БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРИИ ФИЛИАЛА ФБУЗ «ЦЕНТР ГИГИЕНЫ И ЭПИДЕМИОЛОГИИ» В МУНИЦИПАЛЬНОМ ОБРАЗОВАНИИ В СУБЪЕКТЕ (ГОРОДЕ, АДМИНИСТРАТИВНОМ РАЙОНЕ)

Зав. бактериологической лабораторией филиала «ФБУЗ ЦГиЭ»

в муниципальном образовании в субъекте

          Главный врач филиала "ФБУЗ ЦГиЭ"           Отдел Управления             <      в муниципальном образовании    >      Роспотребнадзора по                           в субъекте               субъекту Российской Федерации

                   Главный врач                                             ФБУЗ "ЦГиЭ в субъекте"                                                                                             \/                                                      \/                                                                                Органы управления           \/        Управление Роспотребнадзора   ..     здравоохранением в                > по субъекту Российской Федерации  .  муниципальном образовании                                                .                                                        .                  .               .                                        .                  .               .                                        \/                 .               \/                            .......................       . .............................               . Территориальное ПЧУ .       . .     Органы управления     .               .(станция, ПЧЦ, НИПЧИ).       . .здравоохранением в субъекте.               .......................       . .   Российской Федерации    .                                             . .............................                                             .         .                             ..................................  .         \/    .....................   .  Федеральная служба по надзору .  .         .....>.Минздравсоцразвития.<...в сфере защиты прав потребителей.<..               .      России       .   .     и благополучия человека    .               .....................   .................................. ........> Передача информации о предварительном положительном результате при проведении исследований по эпидпоказаниям

Приложение 11

СХЕМА
ПЕРЕДАЧИ ИНФОРМАЦИИ ПРИ ВЫДЕЛЕНИИ КУЛЬТУР ХОЛЕРНОГО ВИБРИОНА O1, O139 СЕРОГРУПП В БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРИИ ООИ ФБУЗ «ЦЕНТР ГИГИЕНЫ
И ЭПИДЕМИОЛОГИИ» В СУБЪЕКТЕ

                  Зав. бактериологической лабораторией                        ООИ "ФБУЗ ЦГиЭ" в субъекте

          <         Главный врач       >    Управление Роспотребнадзора                    "ФБУЗ ЦГиЭ" в субъекте    по субъекту Российской Федерации

          Органы управления                     Территориальное ПЧУ  <        здравоохранением в муниципальном             (станция, ПЧЦ, НИПЧИ)                     образовании

                  \/                                                            .............................      ..................................       .     Органы управления     .      .  Федеральная служба по надзору .       .здравоохранением в субъекте.      .в сфере защиты прав потребителей.<      .   Российской Федерации    .      .     и благополучия человека    .    .............................      ..................................

                        ............................                                >.Минздравсоцразвития России.<                                ............................

ПРАВИТЕЛЬСТВО МОСКВЫ

ДЕПАРТАМЕНТ ЗДРАВООХРАНЕНИЯ ГОРОДА МОСКВЫ

ПРИКАЗ
от 24 мая 2011 г. N 452

О ВНЕСЕНИИ ИЗМЕНЕНИЯ В ГРАФИК ЗАКРЫТИЯ РОДИЛЬНЫХ ДОМОВ И АКУШЕРСКИХ ОТДЕЛЕНИЙ НА ПРОФИЛАКТИЧЕСКУЮ САНИТАРНО-ГИГИЕНИЧЕСКУЮ ОБРАБОТКУ В 2011 ГОДУ

В связи с отключением Мосводоканалом горячего водоснабжения в районе Вешняки, на основании письма главного врача ГКБ N 15 им. О.М.Филатова от 04.04.2011 N 531 приказываю: 1. Изменить срок планового закрытия родильного отделения ГКБ N 15 им. О.М.Филатова, определенный приказом Департамента здравоохранения города Москвы от 16.12.2010 N 2145 "Об утверждении графика закрытия родильных домов и акушерских стационаров городских больниц на профилактическую санитарно-гигиеническую обработку в 2011 году", и закрыть родильное отделение ГКБ N 15 им. О.М.Филатова с 13.06.2011 по 10.07.2011. 2. Главному врачу ГКБ N 15 им. О.М.Филатова Е.Е.Тюлькиной обеспечить контроль за проведением полной санитарной обработки помещений, инвентаря и оборудования, санации медицинского персонала родильного отделения и открытии его в указанный срок. 3. Главному врачу Станции скорой и неотложной медицинской помощи им. А.С.Пучкова В.В.Фетисову учесть настоящий приказ в оперативной работе. 4. Контроль исполнения настоящего приказа возложить на заместителя руководителя Департамента здравоохранения А.А.Корсунского.

Руководитель
Департамента здравоохранения
Л.М.ПЕЧАТНИКОВ

Роспотребнадзора от 27.05.2011 N 01/6430-1-32 «О маляриологической ситуации в Российской Федерации в 2010 году»

СвязанныеСообщения

Добавить комментарий Отменить ответ

Товары

Товары

Свежие записи

Добро пожаловать!

Восстановите ваш пароль

Роспотребнадзора от 27.05.2011 N 01/6430-1-32 «О маляриологической ситуации в Российской Федерации в 2010 году»

СвязанныеСообщения

Добавить комментарий Отменить ответ

Товары

Товары

Метки

Свежие записи

Добро пожаловать!

Восстановите ваш пароль