Приказ Минздрава СССР от 15.09.1987 N 1035 «Об утверждении «Инструкции по учету крови при ее заготовке и переработке в учреждениях и организациях здравоохранения» «СанПиН 42-123-4423-87. Нормативы и методы микробиологического контроля продуктов детского питания, изготовленных на молочных кухнях системы здравоохранения» (утв. Главным государственным санитарным врачом СССР 31.08.1987) Приказ Минздрава СССР от 10.08.1987 N 943 «О широком использовании ультразвуковой диагностики патологии новорожденных и недоношенных детей» (вместе с «Методическими указаниями «Организация работы кабинетов ультразвукового обследования новорожденных и недоношенных детей городских и областных больниц»)
Инструкция, утвержденная данным документом, вступила в силу с 1 января 1988 года. Текст документа
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ СССР
ПРИКАЗ
от 15 сентября 1987 г. N 1035
ОБ УТВЕРЖДЕНИИ «ИНСТРУКЦИИ
ПО УЧЕТУ КРОВИ ПРИ ЕЕ ЗАГОТОВКЕ И ПЕРЕРАБОТКЕ В УЧРЕЖДЕНИЯХ И ОРГАНИЗАЦИЯХ ЗДРАВООХРАНЕНИЯ»
С целью обеспечения строгого контроля за использованием крови, ее компонентов, препаратов и кровезаменителей при их заготовке и переработке в учреждениях и организациях здравоохранения Утверждаю:
Согласованные с Министерством финансов СССР 26 августа 1987 г. N 41-31: «Инструкцию по учету крови при ее заготовке и переработке в учреждениях и организациях здравоохранения»; форму 12-МЗ — «Ведомость на выдачу донорам талонов на питание и справок об освобождении от работы»; форму 13-МЗ — «Ведомость на выдачу донорам денежной компенсации»; форму 14-МЗ — «Справка учета движения»; форму 15-МЗ — «Извещение (авизо)».
ПРИКАЗЫВАЮ:
1. Министерствам здравоохранения союзных республик, Академии медицинских наук СССР, III и IV главным управлениям при Минздраве СССР: 1.1. В месячный срок размножить и довести утвержденную настоящим приказом инструкцию до учреждений и организаций здравоохранения, осуществляющих заготовку и переработку крови. 1.2. Организовать изучение инструкции соответствующими работниками. 1.3. Обеспечить применение утвержденных настоящим приказом форм первичного учета. 1.4. Обеспечить контроль за соблюдением инструкции, утвержденной настоящим приказом. 2. Учреждениям и организациям союзного подчинения принять инструкцию к исполнению и провести мероприятия, предусмотренные п.п. 1.2.-1.4. 3. Ввести в действие «Инструкцию по учету крови при ее заготовке и переработке в учреждениях и организациях здравоохранения» с 1 января 1988 года. 4. Считать утратившими силу формы NN 12-15, 27-38-МЗ, утвержденные приказом Минздрава СССР от 25 марта 1974 г. N 241 «Об утверждении специализированных (внутриведомственных) форм первичного бухгалтерского учета для учреждений, состоящих на Государственном бюджете СССР». 5. Контроль за исполнением настоящего приказа возложить на Управление бухгалтерского учета, отчетности и финансового контроля Минздрава СССР (т. Запорожцев Л.Н.).
Заместитель министра
Г.Н.ХЛЯБИЧ
Согласовано
с Министерством финансов СССР
26 августа 1987 г.
N 41-31
Утверждено
приказом Министерства
здравоохранения СССР
от 15 сентября 1987 г. N 1035
ИНСТРУКЦИЯ
ПО УЧЕТУ КРОВИ ПРИ ЕЕ ЗАГОТОВКЕ И ПЕРЕРАБОТКЕ В УЧРЕЖДЕНИЯХ И ОРГАНИЗАЦИЯХ ЗДРАВООХРАНЕНИЯ
- ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ
1.1. В соответствии с настоящей инструкцией ведется учет крови, ее компонентов, препаратов и кровезаменителей <> при их заготовке и переработке в станциях и отделениях переливания крови, состоящих на Государственном бюджете СССР или финансируемых за счет средств от производственной деятельности (хозрасчет).
<> В дальнейшем кровь, ее компоненты, препараты и кровезаменители, кроме особо оговоренных случаев, будут именоваться «кровь».
1.2. Учет заготовки крови в учреждениях (организациях) здравоохранения ведется по формам, утвержденным приказами Министерства здравоохранения СССР от 04.10.80 г. N 1030 «Об утверждении форм первичной медицинской документации учреждений здравоохранения» и от 07.08.85 г. N 1055 «Об утверждении форм первичной медицинской документации для учреждений службы крови». 1.3. Основными задачами учета крови, осуществляемого бухгалтериями, централизованными бухгалтериями учреждений (организаций) <> здравоохранения, являются: контроль за своевременным, правильным и достоверным документальным отражением операций, связанных с заготовкой крови, ее переработкой и движением; обеспечение контроля за сохранностью крови на всех этапах ее движения и в местах хранения; обеспечение контроля за соблюдением норм расхода сырья и материалов и использованием их по назначению при заготовке крови и производстве препаратов из нее <*>;
<> В дальнейшем централизованные бухгалтерии, бухгалтерии учреждений (организаций) будут именоваться «бухгалтерии». <*> Нормы расхода сырья и материалов для заготовки консервированной крови, ее компонентов и препаратов в учреждениях Минздрава СССР утверждены 24 ноября 1983 г.
осуществление контроля за своевременным установлением причин возникновения брака, определение потерь от него и сумм, подлежащих взысканию с виновных лиц; своевременное и правильное проведение денежных расчетов с донорами и предприятиями — поставщиками по обеспечению заготовки крови согласно инструкциям Министерства здравоохранения СССР; строгий учет бланков донорских справок и талонов на питание, обеспечение их сохранности.
Примечание.
Постановление ВЦСПС СССР от 28.12.1977 N 447/24 не применяется на территории Российской Федерации в связи с изданием Постановления Минтруда РФ от 31.12.2002 N 85, которым утверждены действующие перечни должностей и работ, замещаемых или выполняемых работниками, с которыми работодатель может заключать письменные договоры о полной индивидуальной или коллективной (бригадной) материальной ответственности, а также типовые формы договоров о полной материальной ответственности.
1.4. Для обеспечения контроля за сохранностью крови на этапах ее заготовления, переработки и хранения с соответствующими работниками учреждения (организации) здравоохранения заключаются договоры о полной материальной ответственности по типовой форме, утвержденной постановлением Государственного комитета Совета Министров СССР по труду и социальным вопросам и Секретариата ВЦСПС от 28 декабря 1977 г. N 447/24 <>.
<> Объявлено приказом Минздрава СССР от 14 марта 1978 г. N 222.
При смене материально ответственных лиц обязательно проведение инвентаризации материальных ценностей на день приема — сдачи.
2. УЧЕТ ЗАГОТОВКИ КРОВИ
2.1. В учреждениях (организациях) здравоохранения для учета заготовки донорской крови применяются «Журнал учета заготовки крови» ф. 411/у <>, «Журнал учета заготовки плазмы методом плазмафереза» ф. 412/у <>, «Журнал регистрации брака крови» ф. 418/у <> и «Ведомость учета заготовки донорской крови» ф. 419/у <>. Ведение журналов ф. 411/у и ф. 412/у по учету крови, полученной от платных и безвозмездных доноров, осуществляется раздельно: в отдельных журналах (страницах). Страницы указанных журналов нумеруются, прошнуровываются и скрепляются печатью учреждения (организации) и подписью главного врача. 2.2. При заготовке крови в выездных условиях используется «Оперативное донесение о работе выездной бригады» ф. 415/у <>,в котором отражается количество крови, полученной от безвозмездных доноров <*>. Оперативное донесение составляется начальником выездной бригады в двух экземплярах после завершения работы и утверждается главным врачом или его заместителем. Первый экземпляр донесения передается в бухгалтерию станции переливания крови вместе с «Ведомостью на выдачу талонов на питание и справок об освобождении от работы» ф. 12-МЗ, а второй — остается в выездной бригаде.
<> Утверждена приказом Минздрава СССР от 7 августа 1985 г. N 1055. <*> В дальнейшем доноры, дающие кровь безвозмездно, будут называться донорами резерва.
Кровь, заготовленная выездной бригадой, по накладной (требованию) ф. 434 передается в отделение заготовки крови. Накладная (требование) выписывается в двух экземплярах под копирку: первый экземпляр вместе с кровью передается в отделение заготовки крови станции переливания крови <>; второй — остается в выездной бригаде. Накладная (требование) заполняется чернилами или пастой шариковой ручки, исправления и подчистки не допускаются. В графе «Название, сорт, размер» указывается групповая и резус — принадлежность крови, в графе «Единица измерения» — количество крови во флаконе (500 мл, 375 мл, 250 мл и т.д.), в графе «Номенклатурный N» — количество флаконов, в графе «Затребовано» — дата заготовки крови. В строке «Сдал» расписывается начальник выездной бригады, в строке «Принял» — заведующий отделением заготовки крови (лицо, ответственное за заготовку крови).
<> В дальнейшем, в целях сокращения, «станция переливания крови» будет именоваться «СПК».
2.3. В отделении заготовки крови и ее компонентов СПК на основании журнала учета заготовки крови ф. 411/у, журнала заготовки плазмы методом плазмафереза ф. 412/у, журнала регистрации брака крови ф. 418/у и накладных (требований) ф. 434, полученных от выездных бригад, ведется «Ведомость учета заготовки донорской крови» ф. 419/у, которая отражает общее количество заготовленной крови и ее движение внутри СПК. По окончании отчетного месяца в трехдневный срок отделение заготовки крови направляет в бухгалтерию СПК итоговые данные ведомости учета заготовки донорской крови ф. 419/у, подписанные заведующим отделением. Указанные данные являются основанием для составления в бухгалтерии СПК ежемесячной справки учета движения крови в отделении заготовки крови ф. 14-МЗ, согласно которой делается бухгалтерская запись по приходу и расходу крови, приведенная в разделе 7 настоящей инструкции. 2.4. Передача крови из отделения заготовки крови в другие подразделения СПК производится по накладной (требованию) ф. 434, которая выписывается в двух экземплярах и заполняется аналогично порядку, указанному в пункте 2.2. Первый экземпляр накладной (требования) вместе с кровью передается подразделению — получателю, второй — с подписью получателя остается в отделении заготовки крови. 2.5. Для учета заготовки компонентов крови применяются «Журнал учета заготовки компонентов крови» ф. 413/у <> и «Ведомость учета заготовки компонентов крови» ф. 420/у <>.
<*> Утверждена приказом Минздрава СССР от 7 августа 1985 г. N 1055.
Отделение заготовки компонентов крови передает в бухгалтерию СПК итоговые данные ведомости учета заготовки компонентов крови ф. 420/у за подписью заведующего отделением для отражения их в бухгалтерском учете аналогично порядку, изложенному в пункте 2.3. настоящей инструкции.
3. УЧЕТ КРОВИ В ЭКСПЕДИЦИИ СПК
3.1. Учет крови, поступающей ежедневно в экспедицию, ведется в «Ведомости учета движения крови, ее компонентов, препаратов и кровезаменителей по экспедиции» ф. 423/у <>. Записи в ведомости производятся на основании накладных (требований) ф. 434.
<> Утверждена приказом Минздрава СССР от 7 августа 1985 г. N 1055.
3.2. Выдача крови из экспедиции другим структурным подразделениям СПК или в лечебно — профилактические учреждения осуществляется по накладным (требованиям) ф. 434, которые заполняются аналогично порядку, изложенному в пункте 2.2., а на другие трансфузионные среды — полное ее наименование, дозировка, упаковка и количество. При отпуске крови из экспедиции СПК другим структурным подразделениям накладная (требование) ф. 434 выписывается в двух экземплярах. Первый экземпляр накладной (требования) вручается отделению — получателю, второй — с подписью получателя остается в экспедиции СПК. Отпуск в лечебно — профилактические учреждения оформляется выпиской накладной (требования) в трех экземплярах. Первый экземпляр передается получателю. Второй экземпляр поступает в бухгалтерию станции для посылки извещения (авизо) ф. 15-МЗ, если трансфузионные среды отпускаются безвозмездно, или для выписки счета, если они отпускаются за плату. Третий экземпляр накладной (требования) остается в экспедиции СПК. Выдача крови в лечебно — профилактические учреждения производится по предъявлении доверенности (разовой или постоянной) по ф. М-2а. Постоянная доверенность на получение трансфузионных сред должна выдаваться на определенный срок, но не более, как на текущий квартал. В экспедиции СПК на основании накладных (требований) в установленном порядке <> ведется «Журнал учета выдачи крови, ее компонентов, препаратов и кровезаменителей» ф. 422/у <*>. Итоговые данные журнала за каждый день заносятся в ведомость учета движения крови ф. 423/у.
<> В соответствии с «Инструкцией по заполнению и ведению первичной медицинской документации для учреждений службы крови», утвержденной Управлением медстатистики и вычислительной техники Минздрава СССР от 25 октября 1985 г. N 27-14/22-857. <*> Утверждена приказом Минздрава СССР от 7 августа 1985 г. N 1055.
По окончании месяца итоговые данные ф. 423/у передаются в бухгалтерию СПК для отражения их в бухгалтерском учете аналогично пункту 2.3. настоящей инструкции. 3.3. При безвозмездном отпуске трансфузионных сред бухгалтерия СПК посылает учреждению — получателю извещение (авизо) по форме 15-МЗ об их количестве и стоимости. Учреждение — получатель подтверждает получение безвозмездно поступивших сред, возвращая СПК заполненный отрывной контрольный талон названного извещения (ответное авизо). 3.4. В отделениях переливания крови лечебно — профилактических учреждений учет выдачи крови осуществляется аналогично порядку, изложенному в пункте 3.2. настоящей инструкции.
4. УЧЕТ КРОВИ ПРИ ЕЕ ПЕРЕРАБОТКЕ В ОТДЕЛЕНИЯХ СПК
4.1. В каждом отделении СПК, занимающимся производством препаратов крови, сывороток, растворов, осуществляется учет поступившего сырья (материалов) и готовой продукции в соответствующих производственных журналах. Записи в журналах ведутся на основании накладных (требований) ф. 434, технологических регламентов и результатов исследования сырья и готовых форм. 4.2. Ежемесячно каждое отделение СПК составляет ведомость учета работы отделения, в которой отражаются основные показатели его работы: наименование сырья и производимой продукции, единица измерения, количественные остатки на начало месяца, по приходу показывается поступление и выработка за месяц, в расходе записывается отпущенная продукция в другие подразделения СПК, количество забракованной продукции и остатки на конец отчетного месяца. Ведомость заполняется в двух экземплярах, подписывается заведующим отделением. Первый экземпляр передается в бухгалтерию СПК, второй — остается в отделении. 4.3. В бухгалтерии СПК по данным ведомости учета работы отделения составляется по каждому отделению «Справка учета движения препаратов по отделению …» ф. 14-МЗ и бухгалтерская проводка по приходу и расходу изготовленных препаратов, сывороток, растворов. 4.4. Передача готовой продукции из отделения в другие подразделения СПК производится по накладным (требованиям) ф. 434 в порядке, изложенном в пункте 3.2. настоящей инструкции.
5. УЧЕТ ВЫДАЧИ ДОНОРАМ ДЕНЕЖНОЙ КОМПЕНСАЦИИ <*>, ТАЛОНОВ НА ПИТАНИЕ И СПРАВОК ОБ ОСВОБОЖДЕНИИ ОТ РАБОТЫ
<*> В дальнейшем доноры, которым за данную кровь выплачивается денежная компенсация, будут именоваться «активные доноры».
5.1. После медицинского обследования или взятия крови у активного донора в отделении комплектования и медицинского освидетельствования донорских кадров СПК или в отделении переливания крови лечебно — профилактического учреждения на основании предъявленной отрывной части «Направления на кроводачу, плазмаферез и др.» ф. 404/у <> ему выдаются следующие документы: «Справка донору об обследовании» ф. 401/у <> или «Справка донору об освобождении от работы в день кроводачи и представлении ему дополнительного дня отдыха» ф. 402/у <> и талон на получение разового питания <*>. Названные документы являются бланками строгой отчетности.
<> Утверждена приказом Минздрава СССР от 7 августа 1985 г. N 1055. <*> Утвержден приказом Минторга СССР от 29 декабря 1973 г. N 256. Форма талона приведена в приложении 2 к настоящей инструкции.
Отрывная часть направления ф. 404/у заполняется и подписывается ответственными лицами, назначенными приказом руководителя учреждения (организации). Никаких подчисток, помарок или исправлений, хотя бы и оговоренных, в количественных данных этого документа не допускается. Выдача указанных справок и талонов на питание производится по ведомости ф. 12-МЗ, которая составляется в одном экземпляре и ежедневно сдается в бухгалтерию учреждения (организации) для списания выданных бланков с подотчета ответственного лица. Ведомость подписывается ответственным лицом, назначенным приказом по учреждению (организации). 5.2. Согласно предъявленным активным донором отрывной части ф. 404/у и паспорта в кассу СПК или лечебно — профилактического учреждения, ему выдается денежная компенсация. Размер денежной компенсации определяется количеством взятой у активного донора крови (плазмы) по действующим ценам в соответствии с расчетом сумм денежной компенсации, находящимся у кассира, подписанным главным бухгалтером и утвержденным руководителем учреждения (организации). Указанный расчет в обязательном порядке вывешивается на видном месте около помещения кассы. Выдача наличных денег производится кассиром по «Ведомости на выдачу донорам денежной компенсации» ф. 13-МЗ. 5.3. Для усиления контроля за правильностью выплаты денежной компенсации ежедневно бухгалтерия СПК или лечебно — профилактического учреждения сверяет количество взятой крови, отраженное в ведомости ф. 13-МЗ, с данными журнала учета заготовки крови (плазмы). Ведомость ф. 13-МЗ подписывается главным бухгалтером и врачом, ответственным за заготовку крови (плазмы) и утверждается руководителем учреждения (организации). 5.4. При выявлении переплат руководитель учреждения (организации) обязан принять необходимые меры к взысканию сумм с виновных лиц в соответствии с действующим законодательством. 5.5. Доноры резерва получают только справки по формам 401/у и 402/у, а также талоны на питание на основании «Карт доноров резерва» ф. 407/у <> по отдельной ведомости ф. 12-МЗ. Порядок оформления выдачи указанных бланков аналогичен порядку, изложенному в пункте 5.1. настоящей инструкции.
<> Утверждена приказом Минздрава СССР от 7 августа 1985 г. N 1055.
5.6. В бухгалтерии учет бланков, справок и талонов на питание осуществляется на забалансовом счете 04 «Бланки строгой отчетности». Аналитический учет бланков строгой отчетности ведется отдельно по каждому их виду и местам хранения в книге учета бланков строгой отчетности ф. 448. Выдача указанных бланков производится бухгалтерией под отчет старшей медицинской сестре или ответственному лицу соответствующего отделения СПК или лечебно — профилактического учреждения, назначенным приказом руководителя учреждения (организации). Хранение бланков в бухгалтерии и отделениях должно осуществляться в железных шкафах (сейфах). Талоны на питание изготавливаются типографским способом в виде блокнотов в окантовке с типографскими серией и номером. Талон действителен только в день дачи крови, о чем делается на нем соответствующая отметка. 5.7. Для проведения питания доноров организацией или учреждением здравоохранения заключается соответствующий договор (соглашение) с предприятием общественного питания. Указанным договором расчеты за питание предусматривается производить в порядке плановых платежей путем периодического перечисления средств в определенные сроки и в установленных размерах. Сумма каждого планового платежа и сроки перечисления средств устанавливаются сторонами на предстоящий месяц (квартал), исходя из периодичности платежей и из объема оказанных услуг либо фактически полученного питания по талонам. Ежемесячно стороны уточняют состояние своих расчетов путем сличения перечисленных сумм учреждением (организацией) здравоохранения и фактически полученного питания по талонам от предприятия общественного питания. Недоплаченную сумму бухгалтерия учреждения (организации) здравоохранения перечисляет предприятию общественного питания, а излишне перечисленные суммы засчитываются в счет очередного планового платежа или возвращаются на бюджетный (текущий) счет учреждения (организации). При заготовке крови в выездных условиях расчеты с предприятием общественного питания производятся на основании предъявленных им счетов с приложением списка номеров талонов на питание доноров, фактически получивших питание от предприятия общественного питания. Контроль сумм, указанных в счетах, осуществляется бухгалтерией СПК или лечебно — профилактического учреждения путем их сопоставления с итоговыми суммами, подлежащими оплате согласно количеству талонов на питание, указанных в прилагаемом списке, и выданных талонов по соответствующим ведомостям ф. 12-МЗ. При обнаружении несоответствия названных сумм счет предприятия общественного питания не оплачивается до выяснения и устранения указанного расхождения.
6. ПОРЯДОК СПИСАНИЯ БРАКА КРОВИ
6.1. Оперативный учет брака крови, ее компонентов, препаратов, растворов, дистиллированной воды в подразделениях учреждения (организации) здравоохранения, проводящих контроль их качества, осуществляется в формах, утвержденных приказом Министерства здравоохранения СССР от 7 августа 1985 г. N 1055. При обнаружении брака информация о нем доводится до руководителя учреждения (организации) здравоохранения для принятия необходимых мер. 6.2. В целях усиления контроля за обеспечением строго обоснованного списания забракованных крови, растворов, дистиллированной воды, готовых препаратов приказом руководителя учреждения (организации) здравоохранения назначается постоянно действующая комиссия в составе: заместителя руководителя учреждения (организации) — председатель комиссии; главного бухгалтера или его заместителя; руководителя структурного подразделения, в котором допущен брак. Постоянно действующая комиссия в учреждении (организации) должна не позднее трех дней после обнаружения брака: тщательно проанализировать причины образования брака (нарушение технологического процесса, использование негодного сырья и другие); выявить лиц, по вине которых произошел брак, внести предложения о привлечении этих лиц к ответственности, установленной действующим законодательством: определить возможность использования забракованных материальных ценностей; составить акт на списание брака.
Осмотр и актирование брака производится комиссией в месте его установления. Акт составляется по каждому отдельному случаю образования брака и в зависимости от вида материальных ценностей содержит следующие данные: наименование забракованных материальных ценностей, их количество, номер серии контролируемого препарата и количество единиц в серии, вид брака (обратимый или абсолютный), причины его образования, виновные в нем лица. При образовании брака на этапе заготовки крови акт составляется в двух экземплярах: первый экземпляр его вместе с итоговыми данными ведомости учета заготовки донорской крови ф. 419/у передается в бухгалтерию, а второй остается в структурном подразделении, в котором он был допущен. На этапе переработки донорской крови, на каждый случай брака, акт составляется в трех экземплярах:первый экземпляр передается в бухгалтерию вместе с итоговыми данными ведомости учета работы отделения, второй остается в отделе технического контроля, третий — в структурном подразделении, в котором был допущен брак. 6.3. Составленные комиссией акты на списание брака утверждаются руководителем учреждения (организации), который принимает решение о степени ответственности в образовании брака должностных лиц. 6.4. В случаях нарушения указанного порядка списания брака виновные в этом должностные лица должны привлекаться к ответственности в установленном законом порядке.
7. УЧЕТ ЗАТРАТ ПО ЗАГОТОВКЕ И ПЕРЕРАБОТКЕ КРОВИ <*> В БУХГАЛТЕРИИ УЧРЕЖДЕНИЯ (ОРГАНИЗАЦИИ) ЗДРАВООХРАНЕНИЯ
<*> Учет затрат по заготовке и переработке крови в дальнейшем будет именоваться «учет затрат на производство продукции».
7.1. Учреждения здравоохранения, состоящие на Государственном бюджете СССР, или организации, финансируемые за счет средств от производственной деятельности, осуществляющие заготовку и переработку крови, должны вести учет затрат по заготовке и переработке крови. В учете затрат должны быть полностью отражены все издержки и потери, относящиеся к данному отчетному периоду. 7.2. В организациях, финансируемых за счет средств от производственной деятельности, учет затрат на производство продукции ведется в разрезе элементов затрат и калькуляционным статьям <>. Затраты по элементам учитываются в целом по организации, а по статьям себестоимости — по видам продукции.
<> Статьи затрат приведены в приложении 1 к настоящей инструкции.
Примечание.
Приказом Минфина РФ от 31.10.2000 N 94н утверждены действующие План счетов бухгалтерского учета финансово-хозяйственной деятельности организаций и Инструкция по его применению.
Бухгалтерский учет заготовки и переработки крови осуществляется по Плану счетов бухгалтерского учета производственно — хозяйственной деятельности объединений, предприятий и организаций и инструкции по его применению, утвержденными приказом Министерства финансов СССР от 28 марта 1985 г. N 40. По способу включения в себестоимость затраты подразделяются на прямые и косвенные. Для учета затрат предназначен счет 20 «Основное производство», по данным которого определяется себестоимость выпускаемой продукции. По дебету указанного счета отражаются все затраты, как прямые, так и косвенные, а также потери от брака. Прямые затраты на производство продукции списываются непосредственно в дебет указанного счета, а косвенные — предварительно накапливаются на собирательно — распределительных счетах: 24 «Расходы по содержанию и эксплуатации машин и оборудования», 25 «Общепроизводственные расходы», 26 «Общехозяйственные расходы» и 28 «Брак в производстве». Ежемесячные общие суммы по этим счетам относятся на счет 20. В дебете названного счета по истечении месяца собираются все основные и накладные расходы. Аналитический учет общепроизводственных и общехозяйственных расходов организуется в разрезе установленной номенклатуры статей и по местам образования расходов. Аналитический учет затрат на производство организуется в разрезе подразделений, а внутри их по видам продукции и калькуляционным статьям расходов. По кредиту счета 20 отражаются суммы фактической себестоимости завершенной производством продукции. По окончании отчетного периода с кредита счета 20 в дебет счета 40 «Готовая продукция» списывается себестоимость готовой продукции. Кроме того, по кредиту счета 20 отражается себестоимость окончательного брака. Сальдо по счету 20 отражает затраты на незаконченную продукцию (незавершенное производство). 7.3. В учреждениях, состоящих на Государственном бюджете СССР, учет операций по заготовке и переработке крови ведется на субсчете 084 «Затраты по заготовлению и переработке материалов» в порядке, изложенном в «Инструкции по бухгалтерскому учету в учреждениях и организациях, состоящих на Государственном бюджете СССР», утвержденной приказом Министерства финансов СССР от 10 марта 1987 г. N 61. Для определения фактических затрат по заготовке крови в дебет субсчета 084 относятся: денежная компенсация, выплачиваемая активным донорам, расходы на питание доноров (активных и доноров резерва), медикаменты, вспомогательные материалы и др., при этом кредитуются субсчета 062, 120, 178. Ежемесячно названные затраты по заготовке крови списываются с кредита субсчета 084 в дебет субсчета 062 «Медикаменты и перевязочные средства», на котором ведется учет заготовленной консервированной крови. Другие расходы по заготовке крови (на выплату заработной платы и начисления на нее, хозяйственные расходы и т. п) относятся в дебет субсчета 200 «Расходы на содержание учреждения» на соответствующие статьи расходов. Аналитический учет операций по субсчету 084 ведется в книге текущих счетов и расчетов ф. 292 (карточках ф. 292-а), в которой для каждого вида заготовок и переработок открывается отдельный счет. Аналитический учет крови, ее компонентов и препаратов в бухгалтерии учреждения ведется по наименованиям, количеству и стоимости на карточках ф. 296-а (в книге ф. 296). 7.4. При использовании средств механизации в учете крови применяются формы первичных документов и бухгалтерских регистров, установленные соответствующими проектными решениями по механизации учета. 7.5. В бюджетных лечебно — профилактических учреждениях инвентаризация крови, ее препаратов и кровезаменителей проводится в порядке и сроки, установленные Положением о бухгалтерских отчетах и балансах учреждений и организаций, состоящих на Государственном бюджете СССР; в хозрасчетных организациях — в соответствии с «Инструкцией о порядке проведения инвентаризации основных средств, товарно — материальных ценностей, денежных средств в объединениях, предприятиях и организациях системы Министерства здравоохранения СССР», утвержденной приказом Минздрава СССР от 17 февраля 1986 г. N 229.
Начальник Управления
бухгалтерского учета,
отчетности и финансового
контроля Минздрава СССР
Л.Н.ЗАПОРОЖЦЕВ
Приложение N 1
к Инструкции по учету крови
при ее заготовке и переработке
в учреждениях и организациях
здравоохранения
СТАТЬИ ЗАТРАТ
на производство продукции
- Сырье и материалы.
- Вспомогательные материалы.
- Заработная плата основная и дополнительная.
- Отчисления на социальное страхование.
- Расходы на содержание и эксплуатацию оборудования.
- Общепроизводственные расходы.
- Общехозяйственные расходы.
- Потери от брака (только в отчетной калькуляции).
- Прочие производственные расходы.
Приложение N 2
к Инструкции по учету крови
при ее заготовке и переработке
в учреждениях и организациях
здравоохранения
N 000000 Серия ДД
ТАЛОН на получение разового питания Стоимостью ........ руб. ..... коп.
О
Б
Е
Д Действителен
» » ……………. 19 г.
Место для штампа
Утверждена
приказом Министерства
здравоохранения СССР
от 15 сентября 1987 г. N 1035
Руководитель учреждения ..................... ............... подпись расшифровка подписи Главный бухгалтер ...................... ..................... подпись расшифровка подписи ВЕДОМОСТЬ на выдачу донорам талонов на питание и справок об освобождении от работы Стоимость талона ..... руб. .... коп. Форма 12-МЗ Коды
Бухгалтерия (централизованная бухгалтерия) Раздел . . . . . . . . . Дебет субсчета . . . . . . . Кредит субсчета . . . . . . .
NN Фамилия Количество Номер Номер справки п.п. имя, данной до- талона
отчество нором на об обсле- о предостав- Распис- крови; питание довании лении допол- ка в по плазмы и нительного лучении др. (мл) дня отдыха 1 2 3 4 5 6 7
и т.д.
Итого: Х Х Х Х
По настоящей ведомости выдано:
талонов на питание ........................................... количество прописью на общую сумму ........................................... сумма прописью справок об обследовании ...................................... количество прописью
справок о предоставлении
дополнительного дня отдыха ................................... количество прописью Ответственное лицо ...................... .................... подпись расшифровка подписи
Печатается с оборотом без титульной части. Итог, текст и подписи печатаются на обороте.
В кассу для оплаты в срок Утверждена с ..... по ........ 19 г. приказом Министерства в сумме ................... здравоохранения СССР ........................... от 15 сентября 1987 г. N 1035 Руководитель учреждения ..................... ............... подпись расшифровка подписи Главный бухгалтер ...................... ..................... подпись расшифровка подписи ВЕДОМОСТЬ на выдачу донорам денежной компенсации
Форма 13-МЗ Коды
Бухгалтерия (централизованная бухгалтерия) Раздел . . . . . . . . . Дебет субсчета . . . . . . . Кредит субсчета . . . . . . . Единица измерения, руб. . . . . . Контрольная сумма . . . . . . . Расходный кассовый ордер N …. от ….. 19 г.
NN Фамилия Серия, Количество Сумма за Доплата Сум- Распис-
п.п. имя, номер данной данную за имму- ма к ка в по отчество паспорта крови кровь низацию вы- лучении (плазмы) (плазму) даче 1 2 3 4 5 6 7 8
и т.д.
Итого:
По настоящей ведомости выплачено ............................. (прописью) ...................................... руб. ............ коп. за ...................................... мл. крови (плазмы). Кассир ....................... .................... подпись расшифровка подписи
Количество взятой крови (плазмы) …. мл. сверил с данными журнала учета заготовки крови (плазмы).
Главный бухгалтер ................ ...................... подпись расшифровка подписи Врач ............... ...................... подпись расшифровка подписи
Печатается с оборотом без титульной части. Итог, текст и подписи печатаются на обороте.
....................... Форма 14-МЗ Утверждена наименование учреждения приказом Министерства ....................... здравоохранения СССР от 15 сентября 1987 г. N 1035
СПРАВКА <*>
учета движения ..................... отделения .............. за ........... 19 г.
NN Наименование: Едини- Учет- Остаток Поступило и выработано п.п. материалов; ца ная на на- (заготовлено) сыворотки - сырья; изме- цена чало готовой продукции рения месяца
кол- сум- кол- сум- кол- сум- кол- сум- кол- сум- во ма во ма во ма во ма во ма и т.д.
ИТОГО: _______________________________________________________
продолжение справки
Израсходовано Абсо- Остаток (отпущено) лютный на брак конец Всего Всего месяца поступило расхода
кол- сум- кол- сум кол- сум- кол- сум- кол- сум- кол- сум- кол- сум- кол- сум- кол- сум- во ма во ма во ма во ма во ма во ма во ма во ма во ма
Справку составил бухгалтер .......................... ............................... подпись расшифровка подписи
<*> Составляется ежемесячно на основании итоговых данных ф. 419/у, ф. 420/у, ф. 423/у и др. форм, полученных от подразделений СПК.
Печатается с оборотом без титульной части. Итог, подписи и сноски печатаются на обороте.
Форма 15-МЗ
Штамп Утверждена учреждения - приказом Министерства отправителя здравоохранения СССР от 15 сентября 1987 г. N 1035 ................................................. наименование ................................................. адрес учреждения - ................................................. получателя
ИЗВЕЩЕНИЕ (АВИЗО) N….
» » ……….. 19 г. в Ваш адрес отправлены перечисленные ниже трансфузионные среды, которые подлежат оприходованию по балансу Вашего учреждения в указанной ниже сумме.
N и дата Наименование трансфузионных Количество Сумма накладной сред
При получении этих трансфузионных сред и оприходовании их по балансу Вам надлежит в трехдневный срок отправить в наш адрес отрывной талон «Ответное извещение (авизо)».
Главный бухгалтер .................... ......................, подпись расшифровка подписи .................................................................. линия отреза .................................................................. Штамп ...................................... учреждения - наименование получателя ...................................... адрес учреждения - ...................................... отправителя ОТВЕТНОЕ ИЗВЕЩЕНИЕ (АВИЗО) N....
Подтверждаем получение трансфузионных сред согласно Вашему извещению (авизо) N … от ……… 19 г. на сумму … руб….. коп., которая принята на учет по нашему балансу.
Главный бухгалтер .................. .................... подпись расшифровка подписи
Санитарные правила вводятся в действие с момента официального опубликования. Текст документа
Утверждаю
Заместитель Главного
Государственного
санитарного врача СССР
А.И.ЗАИЧЕНКО
31 августа 1987 г.
Вводятся
по всей территории СССР
с момента издания
НОРМАТИВЫ И МЕТОДЫ
МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО КОНТРОЛЯ ПРОДУКТОВ
ДЕТСКОГО ПИТАНИЯ, ИЗГОТОВЛЕННЫХ НА МОЛОЧНЫХ КУХНЯХ СИСТЕМЫ ЗДРАВООХРАНЕНИЯ
ОБЩЕСОЮЗНЫЕ САНИТАРНО-ГИГИЕНИЧЕСКИЕ И
САНИТАРНО-ПРОТИВОЭПИДЕМИЧЕСКИЕ ПРАВИЛА И НОРМЫ
СанПиН 42-123-4423-87
Разработаны: Главным санитарно-эпидемиологическим управлением Минздрава СССР (отдел гигиены питания Л.В.Селиванова, Л.Н.Майорова), Институтом питания АМН СССР (И.Б.Куваева, Л.И.Петрушина, С.А.Шевелева).
Примечание.
Постановление Совмина СССР от 31.05.1973 N 361 утратило силу в связи с изданием Постановления Совмина РСФСР от 01.07.1991 N 375. Постановлением Правительства РФ от 15.09.2005 N 569 утверждено Положение об осуществлении государственного санитарно-эпидемиологического надзора в Российской Федерации.
Настоящие Правила разработаны и утверждены на основе Положения о государственном санитарном надзоре СССР (п. 7а), утвержденного Постановлением Совета Министров СССР от 31.05.73 N 361.
Примечание.
Ответственность за нарушение санитарного законодательства установлена статьей 55 Федерального закона от 30.03.1999 N 52-ФЗ.
Нарушение санитарно-гигиенических и санитарно-противоэпидемических правил и норм влечет дисциплинарную, административную или уголовную ответственность в соответствии с законодательством Союза ССР и союзных республик (статья 18).
Примечание.
По вопросу, касающемуся осуществления государственного надзора в сфере обеспечения санитарно-эпидемиологического благополучия населения, см. главу VI Федерального закона от 30.03.1999 N 52-ФЗ.
Государственный санитарный надзор за соблюдением санитарно-гигиенических и санитарно-противоэпидемических правил и норм государственными органами, а также всеми предприятиями, учреждениями и организациями, должностными лицами и гражданами возлагается на органы и учреждения санитарно-эпидемиологической службы Министерства здравоохранения СССР и министерств здравоохранения союзных республик (статья 19) (Основы законодательства Союза ССР и союзных республик о здравоохранении, утвержденные Законом СССР от 19 декабря 1969 г. и введенные в действие с 1 июля 1970 г.). В целях охраны здоровья детей первого года жизни в СССР устанавливаются нормативы и методы микробиологического контроля продуктов детского питания, изготовленных на молочных кухнях системы здравоохранения.
Настоящие Правила определяют нормативы и методы микробиологического контроля продуктов детского питания, изготовленных на молочных кухнях системы здравоохранения; предназначаются для учреждений санитарно-эпидемиологической службы Министерства здравоохранения СССР. С утверждением настоящих Санитарных правил утрачивает силу п. 55 Санитарных правил для детских молочных кухонь N 942-71 от 25 ноября 1971 г. В связи с повышенной восприимчивостью детей раннего возраста к условно-патогенным и патогенным микроорганизмам настоящие Правила включают расширенный спектр микробиологических показателей, нормируемых в продуктах детского питания, изготовленных на молочных кухнях. Учитывая необходимость повышения эффективности микробиологического контроля за качеством и безопасностью продуктов детского питания, в Санитарные правила введены усовершенствованные в соответствии с рекомендациями ФАО/ВОЗ методы анализа нормируемых групп микроорганизмов. Методы адаптированы к условиям работы СЭС. Результаты микробиологических анализов могут быть получены через 48-96 часов, т.е. в сроки, когда продукция молочных кухонь уже реализована. Поэтому микробиологический контроль качества продуктов, изготовленных детскими молочными кухнями, является ретроспективным методом и служит целям объективной оценки санитарно-гигиенического содержания молочных кухонь, соблюдения технологического процесса и правил личной гигиены персоналом.
- Микробиологические нормативы для продуктов детского питания, изготовленных на молочных кухнях
1.1. Микробиологические нормативы для всех видов продуктов детского питания, изготовленных на молочных кухнях, приведены в табл. 1, 2, 3, 4.
Таблица 1
МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ НОРМАТИВЫ
ДЛЯ СТЕРИЛИЗОВАННЫХ ПРОДУКТОВ ДЕТСКОГО ПИТАНИЯ <*>
<*> Дрожжи и плесневые грибы в 1 куб. см готовых продуктов не допускаются. Анализ проводят по ГОСТ 26888-86.
N Наименование Возраст Мезо- Не допускаются в массе продукта
п/п продукта детей фильные аэробные БГКП Е. coli S. пато- и фак. aureus генные, анаэроб- в т.ч. ные мик- сальмо- роорга- неллы низмы в 1 куб. см, КОЕ, не более 1. Смесь адаптиро- с пер- 100 в 10 в 10 в 10 в 100 ванная стерили- вых куб. см куб. см куб. см куб. см зованная "Ма- дней лютка" жизни до 3 мес. 2. Смесь адаптиро- с пер- 100 в 10 в 10 в 10 в 100 ванная восста- вых куб. см куб. см куб. см куб. см новленная "Ма- дней лютка" жизни 3. Стерилизованная с пер- 100 в 10 в 10 в 10 в 100 молочная смесь вых куб. см куб. см куб. см куб. см "Виталакт" дней жизни 4. Молоко стерили- с 6 ме- 100 в 10 в 10 в 10 в 100 зованное цель- сяцев куб. см куб. см куб. см куб. см ное 5. Молоко стерили- с 6 ме- 100 в 10 в 10 в 10 в 100 зованное вита- сяцев куб. см куб. см куб. см куб. см минизированное 6. Сливки стерили- с 4,5 100 в 10 в 10 в 10 в 100 зованные месяцев куб. см куб. см куб. см куб. см (в пю- ре)
Таблица 2
МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ НОРМАТИВЫ
ДЛЯ КИСЛОМОЛОЧНЫХ ПРОДУКТОВ ДЕТСКОГО ПИТАНИЯ
N Наименование Возраст Не допускаются в массе продукта п/п продукта детей БГКП E. coli S. пато- aureus генные, в т.ч. сальмо- неллы 1. Адаптированная с первых в 3 в 10 в 10 в 50 ацидофильная дней жизни куб. см куб. см куб. см куб. см смесь "Малютка" до 6 мес. <> 2. Кисломолочный с 2 мес. в 3 в 10 в 10 в 50 "Виталакт" (ВК-1) до 1 года куб. см куб. см куб. см куб. см 3. Кефир детский с 5 мес. в 3 в 10 в 10 в 50 куб. см куб. см куб. см куб. см 4. Бифилин <*> с первых в 10 в 10 в 10 в 50 дней жизни куб. см куб. см куб. см куб. см до 6 мес. 5. Биолакт с первых в 3 в 10 в 10 в 50 дней жизни куб. см куб. см куб. см куб. см 6. Биолакт с первых в 3 в 10 в 10 в 50 обогащенный дней жизни куб. см куб. см куб. см куб. см 7. Лактобактерин в 3 в 10 в 10 в 50 кисломолочный куб. см куб. см куб. см куб. см
8. Антацидный бифи- в 3 в 10 в 10 в 50 лакт куб. см куб. см куб. см куб. см
9. "Балдырган" с первых в 3 в 10 в 10 в 100 дней жизни куб. см куб. см куб. см куб. см
<> Правильно приготовленная ацидофильная смесь «Малютка»
7 должна содержать в 1 куб. см не менее 10 лактобацилл.
<*> Правильно приготовленный бифилин должен содержать в 1
8 9
куб. см 10 — 10 бифидобактерий.
Таблица 3
МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ НОРМАТИВЫ ДЛЯ ЗАКВАСОК <*>
<*> Микробиологические нормативы и методы исследования заквасок для бифилина, биолакта, ацидофильной смеси «Малютка» и др. кисломолочных продуктов, перечисленных в таблице 2, контролируют в соответствии с ТУ на каждый вид продукта, кроме того, S. aureus должны отсутствовать в 10 куб. см этих заквасок, а патогенные микроорганизмы (в т.ч. сальмонеллы) — в 100 куб. см.
N Наименование Не допускаются в массе Микроскопический п/п закваски продукта препарат <*> БГКП S. патогенные aureus микроорга- низмы, в том числе саль- монеллы 1. Для кефира в 10 в 10 в 100 Молочно-кислые детского куб. см куб. см куб. см стрептококки, единичные клетки дрожжей и пало- чек. Посторонняя микрофлора долж- на отсутствовать 2. Для творога в 10 в 10 в 100 Молочно-кислые детского куб. см куб. см куб. см стрептококки
<*> Контроль качества заквасочных культур осуществляется путем просмотра микроскопического препарата в соответствии с действующей Инструкцией по микробиологическому контролю производства на предприятиях молочной промышленности. М., 1978.
Таблица 4
МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ НОРМАТИВЫ
ДЛЯ ПАСТООБРАЗНЫХ ПРОДУКТОВ, ГОТОВЫХ КАШ, НАПИТКОВ
N Наименование Возраст Мезо- Не допускаются в массе п/п продукта детей фильные продукта аэробные и фак. БГКП E. coli S. пато- анаэроб- aureus ген- ные ные, КОЕ/г в т.ч. (куб. саль- см), не монел- более лы 1. Творог детский с 6 ме- - в 1 г - в 1 г в 50 г Ацидофильная сяцев паста 2. Низкокалорийная с 6 ме- - в 1 г - в 1 г в 50 г белковая паста сяцев 3. Творог кальци- со 2-го 100 в 10 - в 1 г в 50 г нированный месяца г 3 4. Готовые молоч- с 4-5 10 в 1 г - в 1 г в 50 г ные каши: греч- месяцев невая, овсяная, манная 3 5. Готовые молоч- с 4-5 10 в 1 г - в 1 г в 50 г ные каши из му- месяцев ки: рисовой, овсяной, греч- невой 3 6. Восстановленные с 4-5 10 в 1 г - в 1 г в 50 г молочные каши месяцев ("Колосок", "Новинка", "Ма- лышка", "Кру- пинка" и т.д.) 2 7. Настой шиповни- с 3-4 5 х 10 в 1 г 10 в 50 г ка, сухой чер- недель куб. см ной смородины и т.д.
1.2. Количество мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов соответствует нормативам утвержденных ТУ для каждого вида продукта и выражается в КОЕ/г (куб. см) продукта, где КОЕ — колониеобразующие единицы, соответствуют принятому ранее обозначению «клетки». Этот показатель не определяется в кисломолочных продуктах. 1.3. Санитарно-показательные, условно-патогенные и патогенные микроорганизмы контролируются по альтернативному принципу: во всех таблицах для бактерий группы кишечных палочек (БГКП), эшерихий коли, коагулазоположительных стафилококков (S. aureus), патогенных микроорганизмов, в т.ч. сальмонелл, нормируется та масса готового продукта (в граммах или куб. см), в которой перечисленные микроорганизмы не допускаются. 1.4. Оценка результатов микробиологических анализов. 1.4.1. Обнаружение повышенного количества мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов позволяет установить нарушения температурного режима в процессе приготовления продукта. 1.4.2. Обнаружение бактерий группы кишечных палочек в нормируемой массе продукта указывает на неудовлетворительные санитарно-гигиенические условия при изготовлении, а присутствие эшерихий коли указывает еще и на вторичное загрязнение продукта при несоблюдении правил личной гигиены лицами, участвующими в изготовлении его. 1.4.3. Обнаружение коагулазоположительных стафилококков в готовой продукции, как правило, свидетельствует о вторичном загрязнении продукции молочных кухонь за счет вегетирования стафилококков в носоглотке и на руках работников, обсемененности этими микробами оборудования и инвентаря. 1.4.4. Более строгие требования к отсутствию патогенных микроорганизмов, в т.ч. сальмонелл (и шигелл), в большой массе продукта введены для защиты детей грудного возраста от возбудителей острых кишечных инфекций; их обнаружение указывает на вторичное инфицирование продукта и на эпидемиологическое неблагополучие на молочной кухне. 1.5. Санитарно-гигиенические мероприятия, проводимые на основании результатов микробиологического контроля. 1.5.1. При обнаружении патогенных микроорганизмов — сальмонелл, шигелл проводится без предварительного оповещения бактериологическое обследование работников молочной кухни, назначается санитарный день с дезинфекцией, организуется прохождение санминимума и т.п. 1.5.2. При неудовлетворительных микробиологических показателях в стерилизованных продуктах проверяется исправность автоклавов и другой стерилизующей аппаратуры, имеющейся на молочной кухне, проверяется правильность укупоривания бутылочек и т.п. 1.5.3. При обнаружении коагулазоположительных стафилококков в нормируемой массе готовых продуктов, особенно в пастообразных, осуществляется контроль за состоянием рук работающих с отстранением от работы при наличии порезов, нарывов, царапин и т.п., а также проводится санация носоглотки работников и назначается санитарный день в молочной кухне. 1.5.4. При обнаружении бактерий группы кишечных палочек и эшерихий коли в готовых продуктах проводится внеплановый санитарно-бактериологический контроль содержания молочной кухни со взятием смывов в производственных помещениях, в стерилизационном помещении, в помещении для хранения готовой продукции, с рук и санодежды работников; проводится контроль заквасочных культур, воды, воздуха, маточных и рабочих растворов дезинфицирующих средств; назначается генеральная уборка, санитарный день; организуется прохождение санминимума.
2. Порядок проведения микробиологических исследований готовых продуктов
2.1. Микробиологический контроль продуктов детского питания, изготовленных на молочных кухнях системы здравоохранения, осуществляется санитарно-бактериологическими станциями не реже 1 раза в месяц, а при эпидемиологическом неблагополучии в регионе — не реже 1 раза в 15 дней; допускается при наличии возможностей СЭС исследование готовой продукции 1 раз в 10 дней. 2.2. Отбор проб.
2.2.1. Отбор проб продуктов детского питания производится в соответствии со СТ СЭВ 3013-81 «Продукты пищевые и вкусовые. Порядок отбора проб для микробиологических анализов», ГОСТ 9225-84 «Молоко и молочные продукты. Методы микробиологического анализа». 2.2.2. Пробы для микробиологических исследований отбирают до отбора проб для физико-химических исследований способом, исключающим вторичную бактериальную контаминацию. 2.2.3. Отбор проб продуктов, изготовленных на молочных кухнях и фасованных в упаковках 50-200 куб. см (г), производят в количестве не менее 3-4 единиц фасовки в оригинальной упаковке; количество отбираемого продукта должно быть достаточным для получения средней пробы массой 200 г (куб. см), закваску отбирают в условиях особо строгой асептики в количестве не менее 100 куб. см. 2.2.4. Отобранные пробы снабжают этикеткой, в которой указывают номер образца, наименование продукта, день и час отбора образца, должность и подпись лица, отобравшего образец, и наименование микробиологических анализов, которые необходимо провести в отобранной пробе. 2.2.5. Микробиологические исследования проводят тотчас или не позднее 4 час. с момента пробы при температуре хранения не выше +6 град. C. 2.3. Подготовка проб для микробиологических анализов. 2.3.1. Подготовка проб проводится в соответствии с ГОСТ 26669-85 «Продукты пищевые и вкусовые. Подготовка проб для микробиологических анализов». 2.3.2. Приготовление усредненной пробы из жидких продуктов: в стерильную плоскодонную колбу или флакон емкостью 500 куб. см с соблюдением асептики из каждой отобранной на молочной кухне бутылочки вносят по 50-75 куб. см жидкого продукта. Полученную усредненную пробу массой не менее 200 куб. см тщательно перемешивают круговыми движениями и используют для анализов. 2.3.3. Приготовление усредненной пробы из пастообразных продуктов: в стерильный химический стакан вносят с соблюдением правил асептики из отобранных на молочной кухне фасованных в мелкую упаковку пастообразных продуктов такое количество, чтобы масса усредненной пробы составила 150-200 г; пробу тщательно перемешивают стерильной фарфоровой ложкой или шпателем и используют для анализов. 2.3.4. Кисломолочные продукты и закваски перед посевом нейтрализуют до pH 7,0-7,2 добавлением стерильного 10% раствора двууглекислого натрия. 2.4. Методы микробиологических анализов. 2.4.1. Определение количества мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов (общее микробное число). 2.4.1.1. Метод основан на способности мезофильных аэробов и факультативных анаэробов расти на питательных средах определенного состава при температуре 30 град. C с образованием колоний в течение 72 часов, видимых при увеличении в 2 раза. Для повышения эффективности выделения микроорганизмов из детских продуктов необходимо использовать обогащенный питательный агар, приготовленный по п. 4.2.1.
2.4.1.2. Посев продуктов проводят глубинным методом. С этой целью жидкие продукты вносят по 1 куб. см в 2 чашки Петри; из пастообразных продуктов, каш и творога кальцинированного готовят разведение 1:10 с использованием 0,1% водного раствора пептона или изотонического раствора натрия хлорида и вносят в 2 чашки
-1 Петри по 1 куб. см разведенного до 10 продукта. Сразу (или не позднее чем через 15 мин.) после внесения материала чашки заливают расплавленным и остуженным до 45 град. C обогащенным питательным агаром. Содержимое перемешивают осторожными вращательными движениями. После застывания агара чашки с посевами помещают в термостат дном вверх при 30 град. C на 72 часа (при необходимости допускается производить предварительный учет через 48 часов). Колонии подсчитывают на каждой из 2 чашек отдельно с помощью счетчика колоний или с помощью лупы, помещая чашку дном кверху на темную бумагу и отмечая на дне чашки колонии тушью или чернилами. Принимая во внимание низкую обсемененность микроорганизмами жидких продуктов детских молочных кухонь, учитывают все выросшие на двух чашках колонии; вычисляют среднюю арифметическую величину, округляют ее в соответствии с ГОСТ 26670-85. Полученная величина отражает количество мезофильных аэробных и факультативно- анаэробных микроорганизмов в 1 куб. см жидких стерилизованных
-1 смесей (КОЕ/куб. см). При посеве разведения 10 среднюю арифметическую величину умножают на 10 и получают КОЕ/г продукта. Оценка результатов анализа производится в соответствии с нормативами табл. 1-4.
2.4.2. Определение бактерий группы кишечных палочек (БГКП). 2.4.2.1. К бактериям группы кишечных палочек (колиформным бактериям) в соответствии с рекомендациями ФАО/ВОЗ и СЭВ отнесены грамотрицательные, не образующие спор палочки, сбраживающие лактозу с образованием кислоты и газа при температуре 36 +/- 1 град. C. Принимая во внимание растущую роль цитратассимилирующих представителей родов семейства энтеробактерий в возникновении острых кишечных и других заболеваний у детей первого года жизни, в продуктах детского питания не допускается определение коли-титра, т.к. в последнем случае учитываются преимущественно E. coli, и отбрасываются цитрат-положительные варианты энтеробактерий — представители родов Kiebsiella; Enterobacter, Citrobacter, Serratia. 2.4.2.2. Для посева используются те количества продукта, в которых в соответствии с табл. 1-4 предусматривается отсутствие БГКП. Продукты жидкой консистенции засевают в среду Кесслер с лактозой (с поплавком), соблюдая соотношение продукта и среды 1:5 — 1:10, и помещают в термостат при 37 град. C на 24-48 часов. 2.4.2.3. При отсутствии признаков роста в жидкой среде — газообразования, помутнения или изменения цвета среды — готовят мазки, окрашивают по Граму и микроскопируют. При отсутствии в мазках грамотрицательных не образующих спор палочек дают заключение о соответствии исследованного продукта нормативу на БГКП. 2.4.2.4. При наличии признаков роста на среде Кесслер с лактозой проводят высев из газ-положительных и подозрительных пробирок на чашки со средой Эндо, помещают в термостат при 37 град. C на 18-24 часа. Посевы тщательно просматривают, и из колоний, подозрительных или типичных для БГКП (темно-красные с металлическим блеском или без него, темно-розовые, светло-розовые, сиреневатые, красные слизистые и т.п.), готовят мазки, окрашивают по Граму и микроскопируют. Обнаружение грамотрицательных, не содержащих спор палочек указывает на наличие в исследуемой массе продукта бактерий группы кишечных палочек. Высев на среду Козера или Симмонса не производят, т.к. учитывают и цитрат-положительные и цитрат-отрицательные варианты БГКП. Необходимо обращать особое внимание на появление на среде Эндо мелких бесцветных колоний, которые характерны для возбудителей кишечных инфекций — сальмонелл, шигелл. Примечание: иногда при высеве на среду Эндо может наблюдаться рост очень мелких, практически пылевидных темно-красных колоний, в мазках из которых обнаруживаются грамположительные диплококки.
2.4.3. Определение эшерихий коли.
2.4.3.1. Метод основан на способности эшерихий коли ферментировать лактозу с образованием кислоты и газа при температуре (44,5 +/- 0,5) град. C в течение 24-48 часов. Идентификацию эшерихий коли проводят по следующим признакам: образование индола, положительная реакция с метиловым красным, отрицательная реакция Фогес-Проскауэра (отсутствие образования ацетилметилкарбинола) и отсутствие способности утилизировать цитрат. 2.4.3.2. Посев жидких стерилизованных продуктов: 10 куб. см продуктов, перечисленных в табл. 1, вносят в колбу емкостью 200 куб. см, содержащую 90 куб. см среды Кесслер с лактозой, помещают в термостат при температуре (44,5 +/- 0,5) град. C на (24 +/- 1) час. Так же высевают напитки, не имеющие кислого pH. 2.4.3.3. Посев кисломолочных продуктов: в колбу емкостью на 200 куб. см вносят 10 куб. см кисломолочного продукта, предварительно нейтрализованного, добавляют 90 куб. см среды Кесслер с лактозой и помещают в термостат при (44,5 +/- 0,5) град. C на (24 +/- 1) час. 2.4.3.4. Колбы просматривают: при отсутствии признаков роста делают мазки, окрашивают и микроскопируют. При отсутствии в мазках грамотрицательных не образующих спор палочек дают заключение об отсутствии эшерихий коли в 10 куб. см исследованного продукта. 2.4.3.5. Колбы, в которых обнаружены признаки роста (помутнение среды, газообразование, изменение цвета среды), подвергают дальнейшему исследованию. Из этих колб производят посев штрихом и рассевом на поверхность подсушенной плотной среды Эндо в чашках Петри так, чтобы получить изолированные колонии. Посевы выдерживают в термостате при (37 +/- 1) град. C в течение (24 +/- 1) час. Эшерихии на среде Эндо имеют колонии темно-красные с металлическим блеском или без него. Из типичных колоний готовят мазки. Если при окрашивании по Граму и микроскопировании подтверждается наличие грамотрицательных бесспоровых палочек, то все типичные колонии подвергаются идентификации по перечисленным в п. 2.4.3.6. тестам. 2.4.3.6. Идентификация эшерихий коли.
2.4.3.6.1. Реакция на индол. Из типичной изолированной колонии на среде Эндо производят высев в пробирку с бульоном на индол (4.2.2.5.). Пробирки выдерживают в термостате при температуре (37 +/- 1) град. C в течение (24 +/- 1) час. После выдерживания в термостате в пробирку с индольной средой добавляют 5-10 капель реактива Эрлиха (п. 4.2.2.6.). Появление темно-красного окрашивания в поверхностном слое свидетельствует об образовании индола. 2.4.3.6.2. Реакция Фогес-Проскауэра.
Типичную, хорошо изолированную колонию пересевают в пробирку со средой Кларка (п. 4.2.2.7.). Выдерживают в термостате при температуре (37 +/- 1) град. C в течение (48 +/- 3) час. Вынимают пробирки из термостата, и из каждой из них пипеткой стерильно отбирают (1,0 +/- 0,01) куб. см культурной жидкости в чистые пробирки. Затем к 1 куб. см добавляют (0,60 +/- 0,01) куб. см 5-процентного раствора альфанафтола (п. 4.2.2.10.) и (0,20 +/- 0,01) куб. см 40-процентного раствора гидроокиси калия (п. 4.2.2.11.), хорошо перемешивают. Появление красного окрашивания в первые 5 мин. свидетельствует о положительной реакции (образование ацетоина). 2.4.3.6.3. Реакция с метиловым красным. В пробирки с оставшейся средой Кларка добавляют по 5 капель реактива метилового красного в каждую пробирку. Четкое красное окрашивание указывает на положительную реакцию. 2.4.3.6.4. Утилизация цитратов.
Производят пересев из типичных колоний со среды Эндо на чашки Петри с подсушенной средой Симмонса (или в пробирки со средой Козера (п.п. 4.2.2.12. и 4.2.2.14.). Посевы выдерживают в термостате при (37 +/- 1) град. C в течение 24-48 час. При учете результатов обращают внимание на наличие роста и изменение цвета среды. Наличие роста и изменение цвета среды из зеленого в синий или желтый характерно для цитрат-положительных культур. Для цитрат-отрицательных разновидностей характерно отсутствие роста и изменения цвета среды. 2.4.3.7. Обработка результатов идентификации. Обработка результатов идентификации типичных колоний проводится согласно нижеследующей таблице:
КЛАССИФИКАЦИЯ КОЛИФОРМНЫХ БАКТЕРИЙ ПО ИМАЦ-ТЕСТАМ
Образо- Реакция с Реакция Утилизация Тип бактерий вание метиловым Фогеса- цитратов
индола красным Проскауэра
+ + — — Типичные эшерихии коли
- + — — Атипичные эшерихии коли
- — + + Типичные энтеробактерии
аэрогенес
+ - + + Атипичные энтеробактер аэрогенес + + - + Типичные цитробактер - + - + Атипичные цитробактер
2.4.3.8. При обнаружении в исследуемой массе (объеме) продукта грамотрицательных неспорообразующих палочек, сбраживающих лактозу при 44,5 град. C, образующих и не образующих индол, дающих положительную реакцию с метилрот и отрицательную на ацетоин и не утилизирующих цитрат, дают заключение о несоответствии нормативу по этому показателю. 2.4.4. Определение коагулазоположительных стафилококков (S. aureus). 2.4.4.1. Метод основан на способности коагулазоположительных стафилококков расти и образовывать зону просветления вокруг колоний на специальных селективных средах с яичным желтком. С целью унифицирования метода выделения стафилококков из пищевых продуктов и приближения формулы питательной среды к международной в Институте питания АМН СССР разработан вариант агара типа Байрд-Паркер, близкий по своим свойствам к оригиналу. Для изготовления агара типа Байрд-Паркер используются отечественные реактивы и питательные основы (см. п. 4.2.3.2.). Эта среда особенно рекомендуется для выделения стафилококков из продуктов, подвергнутых термической обработке. Преимущество этой среды состоит в том, что с ее применением можно выделять и учитывать стафилококки из большой ассоциации микробов. Под действием ингибирующих веществ среды рост многих представителей сопутствующей микрофлоры полностью угнетается, либо изменяется морфология и окраска колоний микроорганизмов. 2.4.4.2. Посев жидких продуктов: в две колбы емкостью 200 куб. см, содержащие по 90 куб. см солевого или сахарного бульона, стерильной пипеткой вносят по 10 куб. см продукта, тщательно смешивают и помещают в термостат при (37 +/- 1) град. C на 18-24 часа. 2.4.4.3. Посев пастообразных продуктов (см. табл. 4): из усредненной пробы делают навески, равные 1 г, помещают в пробирки с 9 куб. см солевого и сахарного бульона, хорошо размешивают и термостатируют по п. 2.4.4.2. 2.4.4.4. После термостатирования из бульонов производят посев на чашки Петри с подсушенным агаром типа Байрд-Паркер или ЖСА (п.п. 4.2.3.2. и 4.2.3.3.). Посевной материал в количестве 0,1 куб. см (2 капли) равномерно распределяют шпателем по поверхности агара. Чашки с посевами вверх дном инкубируют при (37 +/- 1) град. C в течение 24-48 часов. 2.4.4.5. Учет результатов: плазмокоагулирующие стафилококки (S. aureus) на среде типа Байрд-Паркер растут в виде черных, блестящих, выпуклых колоний в диаметре 1-1,5 мм, окруженных зоной просветления среды шириной 1-3 мм. Около 90% стафилококкус ауреус, выделенных из пищевых продуктов, и штаммы, образующие энтеротоксин, на агаре типа Байрд-Паркер дают зоны просветления через 24 часа инкубации при 37 град. C. Эти колонии не требуют подтверждения в принадлежности к S. aureus и подлежат учету через 24 часа инкубации. 2.4.4.6. При обнаружении вышеописанных колоний дают заключение о наличии S. aureus в засеянной массе продукта и несоответствии его нормативу. 2.4.4.7. При росте типичных по морфологии (п. 2.4.4.5.) колоний, но без зон просветления их подвергают изучению в реакции плазмокоагуляции с плазмой крови кролика. При положительной реакции дают заключение о наличии S. aureus в засеянной массе продукта и его несоответствии нормативу. 2.4.4.8. Примечание: некоторые представители семейства Enterobacteriacene, энтерококков, микрококков растут на среде Байрд-Паркер, образуя черные колонии, но при этом ни один из этих микроорганизмов не образует характерных зон просветления на среде с желтком. На этой среде также могут расти дрожжи, плесени, бациллы, но их легко различить по серой окраске и по измененной форме колоний. 2.4.4.9. Учет результатов на желточно-солевом агаре (ЖСА) и изучение выделенных культур, подозрительных на S. aureus, проводится общепринятым методом. 2.4.4.10. Постановка реакции плазмокоагуляции. Не менее 5-ти характерных колоний, подозрительных на стафилококки, с каждой чашки намечают для дальнейшего исследования, из которых приготавливают мазки-препараты, окрашивают по Граму и микроскопируют. Колонии грамположительных мелких кокков, расположенных в мазке гроздьевидно, отсеивают в пробирки со скошенным мясопептонным агаром (п. 4.1.3.), пробирки с посевами выдерживают в термостате при (37 +/- 1) град. C в течение 18-24 часов. Из культур, выросших на скошенном МПА, после предварительной проверки мазка на чистоту под микроскопом, ставят реакцию плазмокоагуляции: в пробирку с (0,50 +/- 0,01) куб. см разведенной кроличьей плазмы (п. 4.2.3.5.) вносят петлю суточной агаровой культуры. Одну пробирку с плазмой оставляют незасеянной, а в другую засевают заведомо коагулазоположительный стафилококк в качестве контролей. Пробирки помещают в термостат при температуре (37 +/- 1) град. C. Учитывают результаты через 2, 4 часа и оставляют до утра при комнатной температуре для окончательного учета. Ускорение реакции производят за счет использования 3-4-часовых бульонных культур стафилококков, добавляя их по (0,10 +/- 0,01) куб. см в (0,50 +/- 0,01) куб. см разведенной цитратной плазмы. Пробирки на свертывание плазмы следует просматривать осторожно, чтобы не разрушить начало образования сгустка. При учете реакции плазмокоагуляции могут наблюдаться три степени активности фермента коагулазы: ++++ — сгусток плотный;
+++ — сгусток, имеющий небольшой отсек; ++ — сгусток, в виде взвешенного мешочка. Все три варианта являются положительным результатом. 2.4.4.11. Обработка результатов:
— положительная реакция плазмокоагуляции свидетельствует о присутствии коагулазоположительных стафилококков в засеянной массе (объеме) продукта; — отрицательная реакция плазмокоагуляции свидетельствует об отсутствии коагулазоположительных стафилококков в засеянной массе (объеме) продукта. 2.4.4.12. Примечание.
При обнаружении значительного роста коагулазоотрицательных стафилококков в исследуемом продукте микробиолог должен обратить внимание на санитарно-гигиеническое содержание молочной кухни, т.к. у детей грудного возраста некоторые варианты коагулазоотрицательных стафилококков (S. epidermidis) также способны вызывать острые стафилококковые энтериты.
2.4.5. Определение сальмонелл.
Патогенные микроорганизмы, в том числе сальмонеллы, не должны обнаруживаться в той массе продукта, которая указана в табл. 1, 2, 3, 4. 2.4.5.1. Метод основан на использовании сред обогащения для увеличения роста сальмонелл, их выделения на специальных агаровых средах с последующим проведением серологических реакций. 2.4.5.2. Проведение анализа.
При исследовании стерилизованных жидких смесей и продуктов объем (масса) исследуемого продукта должен составлять (100 +/- 1,0) куб. см; для кисломолочных жидких продуктов (до нейтрализации) — (50 +/- 0,5) куб. см, кроме «Балдыргана» и заквасок, где объем (100 +/- 1,0) куб. см; пастообразные продукты, готовые каши, напитки исследуются в массе (объеме) (50 +/- 0,5) куб. см (г). 2.4.5.3. В стерильных условиях в стакан вместимостью 200 куб. см отмеривают (100,0 +/- 1,0) куб. см; (50 +/- 0,5) куб. см либо отвешивают (50 +/- 0,5) г исследуемого продукта и асептически переносят в колбы вместимостью соответственно 1000,0 куб. см, 400,0 куб. см или 250,0 куб. см, содержащие (400,0 +/- 1,0) куб. см, (200 +/- 1,0) куб. см жидкой среды обогащения, соблюдая соотношение 1:5 продукта и питательной среды. Все тщательно перемешивают. При плохом растворении продукта пробы подвергают механическому встряхиванию на аппарате для встряхивания жидкостей (шуттель-аппарат). В качестве сред обогащения могут применяться магниевая среда, среда Мюллера, Кауфмана, селенитовая среда (п.п. 4.2.4.1., 4.2.4.4., 4.2.4.5., 4.2.4.6.). Допускается посев жидких продуктов в разные объемы сред обогащения двойной концентрации (1:1). Кисломолочные продукты перед внесением в среду обогащения нейтрализуют (п. 2.3.4.). Посевы выдерживают в термостате при (37 +/- 1) град. C в течение 18-24 часов. 2.4.5.4. На следующий день производят высев из сред обогащения на поверхность хорошо подсушенных чашек с дифференциально-диагностическими средами Плоскирева и висмут-сульфитного агара (п. 4.2.4.7.). Для получения отдельных колоний петлей берут минимальное количество посевного материала и производят посев штрихом. Чашки с посевами помещают в термостат при (37 +/- 1) град. C на 24-48 часов. Проверку посевов осуществляют дважды: через (24 +/- 1) и (48 +/- 3) часа после выдерживания в термостате. 2.4.5.5. Обработка результатов.
2.4.5.5.1. На среде Плоскирева колонии сальмонелл бесцветные, плотные, на висмут-сульфитном агаре — черные, с характерным металлическим блеском, при этом наблюдается прокрашивание в черный цвет участка среды под колонией. При отсутствии типичных колоний для сальмонелл на каждой из сред конечный результат анализа записывают как отрицательный, т.е. в исследуемой массе (объеме) продукта сальмонеллы отсутствуют. При наличии на любой из питательных сред на чашках Петри типичных или подозрительных колоний на сальмонеллы производят их дальнейшее изучение. 2.4.5.6. Из каждой среды на чашках Петри, содержащей подозреваемую колонию сальмонелл, выбирают хорошо изолированную колонию и высевают штрихом и уколом на трехсахарный агар с мочевиной (п. 4.2.4.8.) или среду Клиглера (п. 4.2.4.10.). Пробирки с посевами выдерживают в термостате при (37 +/- 1) град. C в течение 24 часов. Производят идентификацию культур, высеянных на среду Клиглера или трехсахарный агар с мочевиной, по ферментации лактозы, глюкозы, сахарозы и расщеплению мочевины: — покраснение или пожелтение скошенной части столбика среды указывает на образование кислоты в результате ферментации лактозы, сахарозы или обоих сахаров; — покраснение самого столбика указывает на расцепление глюкозы; — восстановление цвета среды до исходного (бледно-розовый) свидетельствует о расщеплении мочевины; — почернение среды в столбике свидетельствует об образовании сероводорода. Механизм действия среды Клиглера идентичен с трехсахарным агаром (за исключением мочевины, которая в данной среде отсутствует). 2.4.5.7. Трактовка результатов.
Если культуры сбраживают лактозу с образованием газа и расщепляют мочевину, они не принадлежат к бактериям рода сальмонелла. Культуры, не ферментирующие лактозу и не расщепляющие мочевину, но ферментирующие глюкозу (с образованием или без образования газа), подвергаются дальнейшему изучению (культуры, ферментирующие глюкозу без образования газа, подозрительны как брюшнотифозные или дизентерийные; культуры, ферментирующие глюкозу с образованием газа, дающие в среде пузырьки и продуцирующие сероводород <>, могут принадлежать к бактериям рода сальмонелла).
<> Среди бактерий рода сальмонелла встречается до 15% штаммов, не продуцирующих сероводород.
Если ни в одной из пробирок не обнаружено ни одной характерной для сальмонелл реакции, то результат считают отрицательным и дают заключение об отсутствии в исследуемой массе (объеме) продукта бактерий рода сальмонелла. 2.4.5.8. Если обе пробирки покажут типичную для сальмонелл окраску сред, проводят серологическое исследование. Для этой цели берут петлей небольшое количество культуры из пробирок с трехсахарным агаром или средой Клиглера, эмульгируют в капле физиологического раствора на предметном стекле. Добавляют каплю поливалентной сальмонеллезной О-сыворотки (п. 4.2.4.11.) к раствору и осторожно покачивают предметное стекло, чтобы смешать жидкости. Положительная реакция на сальмонеллы (агглютинация) наблюдается в течение 30-60 сек. Обязательна постановка отрицательной контрольной реакции (культура + физиологический раствор). Если при проведении серологического исследования агглютинации не обнаруживается, конечный результат записывают как отрицательный. Любая агглютинация, которая появляется на стекле, говорит о вероятности присутствия сальмонелл. 2.4.5.9. При выделении культур грамотрицательных палочек, ферментирующих глюкозу с образованием или без образования газа, не ферментирующих лактозу и сахарозу, образующих или не образующих сероводород и обладающих четкой серологической характеристикой, считают, что в исследуемой массе (объеме) продукта присутствуют бактерии рода сальмонелла.
3. Аппаратура, материалы и реактивы
3.1. Для всех методов микробиологических исследований применяются следующие приборы, материалы и реактивы: автоклав вертикальный по ГОСТ 9586-75, или др. марки, или получаемый по импорту; анализатор потенциометрический, диапазон измерения pH от 7,00 до 8,00 с погрешностью не более +/- 0,05 по ГОСТ 19881-74, или иономер универсальный ЭВ-74, или потенциометр универсальный pH-340; аппарат универсальный типа АВУ-6С для встряхивания жидкостей в колбах и пробирках по ТУ 64-1-2451-78 (шуттель-аппарат); аппарат для измельчения тканей с числом оборотов не менее 8000 об./мин. и не более 45000 об./мин.; баня водяная с обогревом;
весы лабораторные 2 класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г по ГОСТ 24104-80; лупа измерительная по ГОСТ 8309-75;
микроскоп биологический по ГОСТ 8284-78, или другой марки, или полученный по импорту; стерилизатор СС-200 М по ТУ 64-1-2498-75 или другой марки; термостат с водяной рубашкой электрический ЗЦ-1125 М по ТУ 64-1-1868-75, или термостат электрический суховоздушный ТС-80 по ТУ 64-1-1382-72, или получаемый по импорту; прибор для счета колоний бактерий ПСБ по ТУ 64-1-2401-72; холодильник электрический бытовой по ГОСТ 16317-76 или получаемый по импорту; карандаши по стеклу;
колбы конические вместимостью 40, 200, 400, 1000, 1600 куб. см по ГОСТ 19908-80; ножи;
ножницы;
посуда мерная лабораторная стеклянная по ГОСТ 1770-74; пипетки исполнения 5, 1-го класса точности, вместимостью 1, 2 куб. см по ГОСТ 20292-74 или 2-го класса точности по ГОСТ 1770-74; пипетки исполнения 7, 1-го класса точности, вместимостью 10 куб. см по ГОСТ 20292-74 или 2-го класса точности по ГОСТ 1770-74; пробирки исполнения ПК, вместимостью 20 куб. см по ГОСТ 19908-80; спиртовки лабораторные стеклянные по ГОСТ 190-74; стаканчики для взвешивания (бюксы) по ГОСТ 7148-70; стаканы типа ВН-100, вместимостью 100 куб. см по ГОСТ 19908-80; ступки фарфоровые по ГОСТ 9147-73;
цилиндры исполнения 1, вместимостью 100, 500 куб. см по ГОСТ 1770-74; чашки биологические (Петри) по ГОСТ 10973-75; бумага индикаторная универсальная по ТУ 6-09-1181-76; вата по ГОСТ 5556-81;
Примечание.
ГОСТ 9412-77 утратил силу с 1 января 1996 года в связи с введением в действие ГОСТа 9412-93 «Марля медицинская. Общие технические условия».
марля по ГОСТ 9412-77;
пробки ватные;
штативы для пробирок;
агар микробиологический по ГОСТ 17206-71; агар питательный сухой по ТУ 42-14-33-75; вода дистиллированная по ГОСТ 6709-72;
вода питьевая по ГОСТ 2874-82;
гидролизат казеина панкреатический по ТУ 42-14-1-74; Д-глюкоза, ч., по ГОСТ 6038-79;
калий фосфорнокислый однозамещенный, х.ч. или ч.д.а., по ГОСТ 4198-75; кислота соляная, ч.д.а., по ГОСТ 3118-77; плотн. 1,190 г/куб. см, 1 н раствор; масло иммерсионное для микроскопии по ГОСТ 13739-78; натрия гидроокись, х.ч. или ч.д.а., по ГОСТ 4328-77, 1 н раствор; стекла предметные для микропрепаратов по ГОСТ 9284-75; спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962-67; спирт этиловый ректификованный технический по ГОСТ 18300-72; экстракт кормовых дрожжей по ТУ 42-14-56-76. 3.2. Дополнительные материалы и реактивы для определения бактерий группы кишечных палочек: пробирки Уленгута (поплавки);
пробирки стеклянные исполнения Ш и П2 по ГОСТ 10515-75; стаканы высокие с носиком вместимостью 200 куб. см по ГОСТ 19908-80; среда Кесслер сухая по ТУ 49-365-76 с учетом Изменения N 2 от 01.05.85; бромтимоловый синий, ч.д.а., по ТУ 6-0922086-77; желчь сухая по ОСТ 49-278-75 или желчь нативная крупного рогатого скота, стерильная; кристаллический фиолетовый, ч.д.а., по ТУ 6-09-4119-75; культура бактерий группы кишечных палочек (контрольный штамм); магний сернокислый по ГОСТ 45-23-77;
лактоза по ОСТ 49-63-73;
натрий хлористый по ГОСТ 4233-77;
натрий-аммоний фосфорнокислый по ГОСТ 4170-78; натрий лимонно-кислый по ГОСТ 22280-76; натрий сернокислый по ГОСТ 903-76;
бумага индикаторная универсальная по ТУ 6-09-1181-76; среда Эндо сухая по ТУ 49-876-82;
пептон сухой ферментативный по ГОСТ 13805-76; фуксин основной по МРТУ 6-09-6436-69.
3.3. Дополнительные материалы и реактивы для определения эшерихий коли: пробирки Уленгута (поплавки);
агар в волокнах или в порошке по ГОСТ 17206-71 или получаемый по импорту; бромтимоловый синий, ч.д.а., по ТУ 6-09-2086-77; гидролизат казеина панкреатический по ТУ 42-14-1-74; д-лактоза, 1-водная, ч., по ТУ 6-09-2293-79 или лактоза по ОСТ 4963-73; д-глюкоза, ч., по ГОСТ 6038-79;
желчь сухая по ОСТ 49-278-75 или желчь нативная крупного рогатого скота, стерильная; бумага индикаторная универсальная по ТУ 6-09-1181-76; йод по ГОСТ 4159-79, ч.д.а., 5-процентный спиртовой раствор; кислота соляная, х.ч., по ГОСТ 3118-77, 1 н раствор; калий йодистый, ч.д.а., по ГОСТ 4232-74, 0,5-процентный раствор; кристаллический фиолетовый, ч.д.а., по ТУ 6-09-4119-75; калий фосфорнокислый однозамещенный, ч., по ГОСТ 4198-75; калия гидроокись по ГОСТ 24363-80, 40-процентный раствор; культура эшерихии коли (контрольный штамм); метиловый красный, ч.д.а., по ГОСТ 5853-51; магний сернокислый, ч., по ГОСТ 4523-77; медь сернокислая, 5-водная, х.ч., по ГОСТ 4165-78; натрий аммоний фосфорнокислый, двузамещенный, 4-водный, ч. или х.ч., по ГОСТ 4170-78; натрий хлористый, ч. или х.ч., или ч.д.а., по ГОСТ 4233-77; натрия гидроокись, х.ч. или ч.д.а., по ГОСТ 4328-77, 1 н раствор; натрий лимоннокислый трехзамещенный, ч.д.а., по ГОСТ 22280-76; альфа-нафтол, ч., по ГОСТ 5838-79;
пара-диметиламинобензальдегид, ч., по ТУ 6-09-3272-77; среда Кесслер сухая с лактозой по ТУ 49-365-76 с учетом Изменения N 2; агар Эндо сухой по ТУ 49876-82;
триптофан по ТУ 6-09-1492-80;
фуксин основной по МРТУ 6-09-6436-69;
пептон сухой ферментативный по ГОСТ 1385-76. 3.4. Дополнительные материалы и реактивы для определения коагулазоположительного стафилококка: плазма кролика сухая, выпускаемая Белорусским ИЭМ или др. производства; яйцо куриное диетическое;
сухой питательный агар на основе ферментативного гидролизата кормовых дрожжей; калия теллурит, 2-процентный раствор стерильный, производства Объединения «Мосхимфармпрепараты» им. Семашко; литий хлористый, х.ч., ТУ 6-09-3751-74; 1-водный; натрия пируват, ч., ТУ 6-09-08-990-75;
изотонический раствор натрия хлорида, стерильный. 3.5. Дополнительные материалы и реактивы для определения сальмонелл: бутыли стеклянные по ГОСТ 5717-81;
кастрюли эмалированные по ГОСТ 24788-81; целлофан (пленка полиэтиленцеллофановая), ОСТ 6-06-114-79; дрожжи прессованные по ГОСТ 171-81;
висмут-сульфитный агар по ТУ 42.14127-78; железо сернокислое;
д-глюкоза, ч., по ГОСТ 6038-79;
д-лактоза, 1-водная, ч., ТУ 6-09-2293-79; магний хлористый, 6-водный, ч., ч.д.а., по ГОСТ 4209-77; мел химически осажденный по ГОСТ 6253-72; мочевина, ч., по ГОСТ 6691-77;
натрий хлористый, ч., ч.д.а., х.ч., ГОСТ 4233-77; натрий серноватистокислый, ч.д.а., СТ СЭВ 223-75; сахароза, ч.д.а., по ГОСТ 5833-75;
среда Плоскирева по МРТУ 42-154-67;
соль Мора, ч., ГОСТ 4208-72;
среда Клиглера;
сыворотка сальмонеллезная О-агглютинирующая адсорбированная по ГОСТ 16449-78; феноловый красный ТУ 6-09-4530-77;
хлороформ технический по ГОСТ 20015-74; культура бактерий рода сальмонелла (контрольный штамм); бриллиантовый зеленый, ч., по ТУ 6-09-4279-76; желчь сухая по ОСТ 49-278-75 или желчь нативная крупного рогатого скота, стерильная; натрий кислый селенистокислый;
натрий фосфорнокислый двузамещенный, безводный; натрий фосфорнокислый однозамещенный;
вода дистиллированная;
йод металлический;
калий йодистый, ч.д.а., ГОСТ 4232-74;
изотонический раствор натрия хлорида, стерильный.
4. Питательные среды и реактивы
4.1. Питательные среды и реактивы общего назначения. 4.1.1. Изотонический 0,85% раствор хлористого натрия. Для приготовления изотонического раствора с pH 6,9-7,0 используют дистиллированную воду, pH которой проверяют индикатором бромтимолблау, при его добавлении цвет воды должен быть бутылочно-зеленым. В иных случаях воду не используют. Изотонический раствор разливают в пробирки или флаконы в необходимых количествах, стерилизуют при 1 атм. 20 минут. 4.1.2. 0,1-процентный водный раствор пептона (пептонная вода). К 1 л дистиллированной воды добавляют 1 г пептона. После размешивания среду кипятят, фильтруют и разливают по пробиркам и флаконам в необходимых количествах, стерилизуют при 1 атм. 30 минут. 4.1.3. Приготовление раствора двууглекислого натрия для нейтрализации проб кисломолочных продуктов, реактивов для окраски по Грамму, мясо-пептонного бульона (МПБ), мясо-пептонного агара (МПА) производят согласно ГОСТ 9225-84; ГОСТ 18963-73. 4.2. Специальные питательные среды и реактивы. 4.2.1. Среда для определения общего количества мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов.
Сухой питательный агар производства — 35 г ДагНИИ питательных сред
Экстракт кормовых дрожжей производства — 2,5 г МНИИВС им. Мечникова
Глюкоза - 1,0 г Вода дистиллированная - 1000,0 куб. см pH - 7,0.
Стерилизация в автоклаве при (121 +/- 2) град. C в течение (21 +/- 3) мин. 4.2.2. Среды и реактивы для выделения бактерий группы кишечных палочек и эшерихий коли. 4.2.2.1. Среда Кесслер с лактозой.
К 1 куб. дм водопроводной воды добавляют (10,0 +/- 0,1) г пептона и 50 куб. см желчи крупного рогатого скота. Смесь кипятят на водяной бане при помешивании 20-30 минут. Затем фильтруют ее через ватно-марлевый фильтр, добавляют 2,5 г лактозы, доводят объем водой до 1 куб. дм. Устанавливают pH 7,4-7,6, используя 1 н растворы NaOH или HCl и проверяя значение pH на потенциометре или универсальной индикаторной бумагой. Добавляют 4 куб. см 1-процентного раствора генцианового фиолетового, разливают в колбы по 90 куб. см и в пробирки по 10 куб. см, закладывают поплавки (пробирки Уленгута) отверстием книзу. Стерилизуют при (121 +/- 2) град. C в течение 15 минут. 4.2.2.2. 1% раствор генцианового (кристаллического) фиолетового. Взвешивают (1,0 +/- 0,01) г генцианового (кристаллического) фиолетового, помещают в мерную колбу вместимостью 100 куб. см и доливают до метки дистиллированной водой. Раствор хранят при температуре (4 +/- 1) град. C в течение 7 суток. 4.2.2.3. Среда Кесслер с лактозой из сухих питательных сред. Среда готовится согласно прописи на этикетке банки. 4.2.2.4. Среда Эндо.
Среду Эндо производства ДагНИИ питательных сред готовят согласно прописи на этикетке банки. Изготовленную и разлитую в стерильные чашки Петри среду можно хранить при температуре (4 +/- 1) град. C до 10 суток. 4.2.2.5. Среда на индол.
Взвешивают (10,0 +/- 0,1) г сухого панкреатического гидролизата казеина (или 100,0 куб. см жидкого панкреатического гидролизата казеина с содержанием 500 мг% аминного азота), (5,0 +/- 0,1) г хлористого натрия, (1,0 +/- 0,01) г ДЛ-триптофана, растворяют в 1000 куб. см дистиллированной воды. Доводят pH до 7,0 +/- 0,1 н растворами NaOH или HCl и, измеряя значение pH на потенциометре или по универсальной индикаторной бумаге, разливают в пробирки по 5 куб. см, стерилизуют 15 минут при (121 +/- 2) град. C. 4.2.2.6. Реактив на индол (Эрлиха).
Взвешивают (5,0 +/- 0,1) г пара-диметиламинобензальдегида в стеклянном стакане вместимостью 100 куб. см, помещают в коническую колбу вместимостью 200 куб. см и растворяют в (50 +/- 1) куб. см этилового спирта. С помощью мерного цилиндра вместимостью 100 куб. см медленно добавляют (50 +/- 1) куб. см концентрированной соляной кислоты. Раствор хранят в колбе с притертой пробкой при температуре (4 +/- 1) град. C. 4.2.2.7. Среда Кларка.
Взвешивают (5,0 +/- 0,1) г пептона, (5,0 +/- 0,1) г глюкозы, (5,0 +/- 0,1) г двузамещенного фосфорнокислого калия. Растворяют ингредиенты в 950 куб. см дистиллированной воды, устанавливают pH 6,9 +/- 0,1, используют 1 н растворы NaOH или HCl, проверяя значение pH на потенциометре или универсальной индикаторной бумагой. Доводят общий объем до 1 куб. дм дистиллированной водой и фильтруют при необходимости. Разливают в пробирки по 5 куб. см, стерилизуют в течение 20 минут при (115 +/- 2) град. C. 4.2.2.8. 90% раствор этилового спирта.
Добавляют к (900 +/- 5) куб. см 96-процентного этилового спирта (60 +/- 1) куб. см дистиллированной воды в колбе емкостью 100 куб. см. 4.2.2.9. Раствор индикатора метилового красного. Взвешивают (0,1 +/- 0,001) г индикатора метилового красного, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 500 куб. см, растворяют в (300 +/- 1) куб. см 90-процентного раствора этилового спирта (п. 4.2.2.8.), добавляют до 500 куб. см дистиллированной водой. Хранят раствор в колбе с притертой пробкой при температуре (4 +/- 1) град. C. 4.2.2.10. 5% раствор альфа-нафтола.
Взвешивают (5,0 +/- 0,1) г альфа-нафтола, растворяют в (100 +/- 1) куб. см абсолютного этилового спирта. При отсутствии абсолютного этилового спирта можно использовать ректификованный этиловый спирт 96 град. Раствор должен быть свежеприготовленным. 4.2.2.11. 40-процентный раствор гидроокиси калия. Взвешивают (40,0 +/- 0,1) г гидроокиси калия в стакане вместимостью 100 куб. см, переносят в мерную колбу вместимостью 100 куб. см, растворяют в (60,0 +/- 1) куб. см дистиллированной воды, затем доводят до метки дистиллированной водой. Раствор хранят при температуре (4 +/- 1) град. C. 4.2.2.12. Среда Козера.
Взвешивают (1,5 +/- 0,1) г натрия-аммония фосфорнокислого, (1,0 +/- 0,01) г калия фосфорнокислого двузамещенного, (0,2 +/- 0,01) г магния сульфата, (3,0 +/- 0,1) г натрия лимоннокислого трехзамещенного. Растворяют в 950 куб. см дистиллированной воды. Добавляют 10 куб. см 0,5-процентного спиртового раствора бромтимолового синего. Устанавливают pH 6,8 1 н растворами NaOH или HCl, проверяя значение pH на потенциометре. Доводят объем дистиллированной водой до метки (1 куб. дм). Разливают по 10 куб. см в пробирки, стерилизуют в течение 15 минут при (121 +/- 2) град. C. 4.2.2.13. 0,5-процентный раствор бромтимолового синего в спирте. Взвешивают (0,5 +/- 0,01) г бромтимолового синего, помещают в мерную колбу вместимостью 100 куб. см и доводят этиловым спиртом до метки. Раствор хранят при температуре (4 +/- 1) град. C в течение 30 суток. 4.2.2.14. Среда Симмонса.
Среда готовится аналогично среде Козера (п. 4.2.2.12.). Но после измерения pH в нее добавляют (20 +/- 0,1) г агара на 1 куб. дм, прогревают на водяной бане до растапливания агара, стерилизуют в течение 15 минут при (121 +/- 2) град. C. Разливают в стерильные чашки Петри или пробирки. 4.2.3. Среды и реактивы для выделения стафилококков. 4.2.3.1. Солевой бульон.
К (100 +/- 1) куб. см мясопептонного бульона (МПБ) с pH 7,2-7,4 в колбе вместимостью 200 куб. см добавляют (6,5 +/- 0,1) г хлористого натрия и разливают в пробирки по (10,0 +/- 0,1) куб. см. Стерилизуют в автоклаве при (121 +/- 2) град. C в течение (20 +/- 3) минут. 4.2.3.2. Агар типа Байрд-Паркер.
30 г сухого питательного агара на основе ферментативного гидролизата кормовых дрожжей, производства Дагестанского НИИ питательных сред, размешивают в 1 куб. дм дистиллированной воды, добавляют 10 г пирувата натрия, 5 г хлористого лития, тщательно перемешивают. Смесь нагревают при помешивании и кипятят в течение 1 минуты до полного растворения ингредиентов. Устанавливают pH 7,2. Разливают во флаконы объемами 100-200-300 куб. см в зависимости от потребности и стерилизуют при 121 град. C 15 минут. Среда может храниться в течение месяца в условиях холодильника. Перед употреблением в растопленную и охлажденную до 45-50 град. C среду с соблюдением правил асептики прибавляют (из расчета на 100 куб. см среды) 0,5 куб. см 2% раствора теллурита калия и 5 куб. см эмульсии яичного желтка. Среду тщательно перемешивают и разливают в чашки Петри в объеме не менее 20 куб. см на чашку. Чашки со средой могут быть использованы в течение 24 часов, максимум 48 часов. Перед посевом чашки со средой подсушивают в термостате общепринятым способом. 4.2.3.3. Желточно-солевой агар (ЖСА).
Основа — солевой агар: к мясо-пептонному бульону (МПБ) с pH 7,2-7,4 добавляют 2% агара и 6,5% хлористого натрия, расплавляют на водяной бане, при необходимости фильтруют через ватно-марлевый фильтр, разливают мерным цилиндром по (100 +/- 1) куб. см в колбы вместимостью 250 куб. см и стерилизуют при (121 +/- 2) град. C в течение (30 +/- 3) мин. Получают солевой агар. Вместо мясо-пептонного бульона можно использовать сухой питательный агар, добавив к нему только 6,5% хлористого натрия. ЖСА: на (100 +/- 1) куб. см стерильного расплавленного и остуженного до (45 +/- 2) град. C солевого агара добавляют (20 +/- 0,1) куб. см эмульсии яичного желтка. После полного размешивания желточно-солевой агар разливают в стерильные чашки Петри по 20-25 куб. см и хранят в холодильнике до 5-7 дней. 4.2.3.4. Эмульсия яичного желтка.
На дно стерильной чашки Петри помещают куриное яйцо, которое тщательно протирают ватой, смоченной этиловым спиртом. Стерильным пинцетом пробивают с двух противоположных сторон яйца два отверстия. Через одно из этих отверстий полностью удаляют белок, а затем, несколько увеличив отверстие, выливают желток в стерильную колбу вместимостью 200 куб. см. К желтку постепенно добавляют (частями по 20-30 куб. см) 180-200 куб. см стерильного физиологического раствора, затем содержимое тщательно встряхивают до получения гомогенной массы. 4.2.3.5. Цитратная плазма кролика.
Цитратная плазма кролика для реакции плазмокоагуляции выпускается в сухом виде. Готовят непосредственно перед употреблением согласно прописи в прилагаемом наставлении. 4.2.4. Среды и реактивы для выделения бактерий рода Salmonella. 4.2.4.1. Магниевая среда.
Среда готовится из трех растворов <>:
<> При использовании среды двойной концентрации масса (объем) всех ингредиентов, кроме воды, удваивается.
I раствор:
пептон 4,2 г хлористый натрий (NaCl) 7,15 г дрожжевой диализат 20,0 куб. см калий фосфорнокислый однозамещенный 1,42 г вода дистиллированная 890,0 куб. см II раствор: магний хлористый кристаллический 35,7 г вода дистиллированная 90,0 куб. см III раствор: 0,5-процентный водный раствор 0,9 куб. см.
бриллиантового зеленого
После растворения всех ингредиентов растворы соединяют, разливают приготовленную таким образом среду в колбы и флаконы. Среду стерилизуют при (112 +/- 1) град. C в течение 30 минут. 4.2.4.2. 0,5-процентный водный раствор бриллиантового зеленого. Для приготовления 0,5-процентного раствора взвешивают (0,5 +/- 0,01) г индикатора бриллиантового зеленого, вносят в стерильную мерную колбу вместимостью 100 куб. см и доводят стерильной дистиллированной водой до метки. Раствор хранят в холодильнике в течение 7 суток. 4.2.4.3. Дрожжевой диализат.
Взвешивают (1000 +/- 10) г свежих хлебных (прессованных) дрожжей, размешивают в (1000 +/- 1) куб. см дистиллированной воды в кастрюле до состояния гомогенной массы, которую переливают в целлофановый мешок, предварительно промытый дистиллированной водой. Мешок завязывают, обмывают под струей питьевой воды, а затем дистиллированной водой и погружают в эмалированную кастрюлю, в которую предварительно наливают (1300 +/- 1) куб. см дистиллированной воды. Мешок должен быть полностью погружен в жидкость. Диализ ведут при температуре 60-80 град. C в течение (6 +/- 0,5) час. За это время количество жидкости в кастрюле должно уменьшиться примерно в 2 раза. Затем жидкость из кастрюли переливают в стерильную бутыль и добавляют хлороформ (0,5% к объему жидкости) и сохраняют при (6 +/- 1) град. C до 7 месяцев. 4.2.4.4. Среда Мюллера.
К 90 куб. см стерильного мясо-пептонного бульона добавляют: а) 4,5 г мела, предварительно простерилизованного во флаконе сухим жаром (при 160 град. C в течение 2 час.); б) 10 куб. см раствора гипосульфита натрия (50 г чистого кристаллического гипосульфита натрия в 100 куб. см дистиллированной воды стерилизуют текучим паром в течение 30 минут); в) 2 куб. см раствора Люголя (металлического йода 25 г, йодистого калия 20 г, дистиллированной воды 100 куб. см). 4.2.4.5. Среда Кауфмана.
К 100 мл среды Мюллера добавляют 1 мл водного раствора бриллиантового зеленого (1:1000) и 5 мл стерильной бычьей желчи. Приготовленную смесь стерилизуют текучим паром в течение 30 минут. Среда сохраняется длительное время. До стерилизации среда зеленого цвета, после стерилизации она приобретает зеленовато-коричневый тон. 4.2.4.6. Селенитовая среда накопления Лейфсона:
селенит натрия кислый 4 г пептон импортный 5 г фосфат натрия двузамещенный безводный 7 г фосфат натрия однозамещенный 3 г лактоза 4 г дистиллированная вода 1000 мл.
Среду готовят из двух основных растворов. Прежде всего экспериментально определяют точную пропорцию двузамещенного и однозамещенного фосфата натрия, которая с используемым образцом пептона и кислого селенистокислого натрия дает pH не выше 6,9-7,1, что регулируется изменением соотношения фосфатов. Такая предварительная подтитровка производится всякий раз, когда меняется серия любого из входящих в среду основных ингредиентов (пептон, кислый селенистокислый натрий, фосфаты). После установления указанных соотношений к приготовленному раствору фосфатов добавляют пептон и лактозу, разливают во флаконы по 50 мл и стерилизуют текучим паром 2 дня по 30 минут или при 112 град. C однократно в течение 30 минут. Отдельно на стерильной воде готовят 10% раствор кислого селенита натрия. Перед началом работы на каждый флакон с 50 мл основного раствора добавляют 2 мл раствора кислого селенита натрия. Приготовленную среду разливают в стерильные пробирки по 5-7 мл и закрывают плотно пригнанными пробками. 4.2.4.7. Среды Плоскирева и висмут-сульфитный агар. Среда Плоскирева и висмут-сульфитный агар (ВСА) выпускаются в сухом виде Дагестанским НИИ питательных сред; их следует готовить согласно прописям, указанным на этикетках банок. Изготовленные и разлитые в стерильные чашки Петри среды можно хранить в холодильнике до 10 суток. 4.2.4.8. Трехсахарный агар с мочевиной. Трехсахарный агар с мочевиной готовят смешением следующих ингредиентов:
дистиллированная вода 100 куб. см сухой питательный агар 2,5 г лактоза 1,0 г сахароза 1,0 г глюкоза 0,1 г мочевина 1,0 г железо сернокислое (FeSO4 x 7H2O) 0,02 г гипосульфит натрия Na2S2O3 x 5H2O) 0,03 г 0,04-процентный водный раствор фенолового 0,04 куб. см.
красного
Тщательно перемешивают и устанавливают pH 7,2-7,4. Разливают в пробирки по 5 куб. см и стерилизуют текучим паром по 20 минут 3 дня подряд. После стерилизации среду скашивают. Готовая среда имеет бледно-розовый цвет. 4.2.9. 0,4-процентный водный раствор фенолового красного. Взвешивают (0,1 +/- 0,001) г индикатора фенолового красного, вносят в колбу вместимостью 50 куб. см и вливают (25 +/- 0,1) куб. см дистиллированной воды. Тщательно перемешивают до полного растворения. Раствор хранят в холодильнике до 7 суток. Для получения 0,04-процентного рабочего раствора индикатора 1 куб. см 0,4-процентного раствора смешивают с 9 куб. см дистиллированной воды. 4.2.4.10. Среда Клиглера из сухих питательных сред. Среда готовится и стерилизуется согласно прописи на этикетке. Готовую среду скашивают в пробирках так, чтобы остался небольшой столбик (не менее 3 см высотой). 4.2.4.11. Поливалентная агглютинирующая сальмонеллезная сыворотка. Необходимые разведения сыворотки готовят перед использованием согласно прописи в прилагаемой к коробке инструкции.
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ СССР
ПРИКАЗ
10 августа 1987 г.
N 943
О ШИРОКОМ ИСПОЛЬЗОВАНИИ УЛЬТРАЗВУКОВОЙ ДИАГНОСТИКИ ПАТОЛОГИИ НОВОРОЖДЕННЫХ И НЕДОНОШЕННЫХ ДЕТЕЙ
Научные исследования и использование ультразвукового обследования у новорожденных и недоношенных детей в клиниках НИИ педиатрии АМН СССР, Всесоюзном центре по охране здоровья матери и ребенка Минздрава СССР, кафедре неонатологии Центрального ордена Ленина института усовершенствования врачей Минздрава СССР, ряде кафедр акушерства и гинекологии медицинских институтов доказали высокую информативность диагностики и возможность использования метода у детей раннего возраста. Применение ультразвуковых аппаратов с секторальными датчиками (особенно 5,0 в 7,5 МГгерц) позволили диагностировать не только аномалии развития внутренних органов у новорожденных, недоношенных и маловесных детей, но различную патологию центральной нервной системы (внутричерепные кровоизлияния, гипоксически — ишемические нарушения и их последствия, отек, инфекционные поражения и врожденную патологию развития головного мозга). С целью повышения качества диагностики, проведения своевременного эффективного лечения и реабилитационных мероприятий у новорожденных и недоношенных детей, снижения детской смертности и инвалидности, ПРИКАЗЫВАЮ:
Министерствам здравоохранения союзных республик: 1.1. Обеспечить первоочередное поступление ультразвуковых переносных аппаратов с секторальными датчиками в лечебные стационары, имеющие отделения для новорожденных, недоношенных и детей раннего возраста. 1.2. Обеспечить своевременное направление врачей — педиатров и детских невропатологов, работающих с новорожденными детьми, для обучения их работе на ультразвуковых аппаратах. Направлять для первичного обучения работе с ультразвуковой аппаратурой специалистов, имеющих общий стаж работы в отделениях новорожденных детей не менее 3 лет. 1.3. На циклы усовершенствования врачей по ультразвуковой диагностике новорожденных детей в Центральный ордена Ленина Институт усовершенствования врачей Минздрава СССР направлять врачей — педиатров, имеющих самостоятельный опыт работы на ультразвуковой аппаратуре не менее 3 месяцев. 2. Организовать с 1987 г. в НИИ педиатрии АМН СССР (тов. Студеникин М.Я.), Центральном ордена Ленина Институте усовершенствования врачей Минздрава СССР (тов. Кашкин К.П.), детской клинической больнице N 13 им. Н.Ф. Филатова (тов. Луцкий Я.М.) обучение врачей — педиатров И детских невропатологов, работающих в отделениях новорожденных и недоношенных детей акушерских стационаров и детских больниц, работе на ультразвуковой аппаратуре согласно специальной программе (приложение 1). 3. Главному управлению учебных заведений Минздрава СССР организовать в первом квартале 1988 г. в Центральном ордена Ленина Институте усовершенствования врачей Минздрава СССР циклы усовершенствования врачей — педиатров и детских невропатологов по ультразвуковой диагностике патологии новорожденных и детей грудного возраста. УТВЕРЖДАЮ:
1. Программу первичной подготовки врачей — педиатров и невропатологов по ультразвуковой диагностике патологии новорожденных, недоношенных и детей раннего возраста (приложение 1). 2. Распределение мест первичной подготовки педиатров союзных республик по ультразвуковой диагностике новорожденных и недоношенных детей в 1987 г. (с учетом выделенной аппаратуры) (приложение 2). 3. Методические указания «Организация работы кабинетов ультразвукового обследования новорожденных и недоношенных детей городских и областных больниц» (приложение 3).
Заместитель Министра
А.А.БАРАНОВ
Приложение N 1
к приказу Министерства
здравоохранения СССР
от 10.08.1987 г. N 943
ПРОГРАММА
ПЕРВИЧНОЙ ПОДГОТОВКИ ВРАЧЕЙ — ПЕДИАТРОВ И НЕВРОПАТОЛОГОВ ПО УЛЬТРАЗВУКОВОЙ ДИАГНОСТИКЕ ПАТОЛОГИИ НОВОРОЖДЕННЫХ, НЕДОНОШЕННЫХ И ДЕТЕЙ РАННЕГО ВОЗРАСТА
I. Ознакомление с физикой ультразвука, принципами ультразвуковой диагностики, видами и типами ультразвуковых диагностических аппаратов, датчиками, характером их работы.
II. Исследование органов брюшной полости
- краткое повторение анатомии органов брюшной полости и их взаимосвязи;
- методика исследования органов брюшной полости при подходе к ним через переднюю брюшную стенку: а) поперечное сканирование, б) продольное сканирование, в) косое сканирование;
- печень, желчный пузырь: а) ознакомление с эхографической картиной печени с
учетом ее размера, формы, эхо — структуры, размеров и формы внутрипеченочных сосудов, желчного пузыря с общим желчным протоком;
<*> Программа подготовлена отделом ультразвукового обследования НИИ педиатрии АМН СССР (директор - академик АМН СССР М.Я.Студеникин) и кафедрой неонатологии ЦОЛИУВ (зав. кафедрой - профессор В.В.Гаврюшов). Продолжительность занятий по I, II, III разделам 108 часов, по IV и V разделам — по 36 часов.
б) разбор эхо — признаков диффузных болезней печени
(жировая инфильтрация, гликогеновая болезнь, хронический гепатит, цирроз, фиброз, гепатомегалия при гематологических расстройствах); в) разбор эхо — признаков объемных поражений печени
(опухоль, киста); г) оценка состояния желчного пузыря, его размеров,
формы, сократительной функции.
- поджелудочная железа:
а) ознакомление с нормальной эхографической картиной
поджелудочной железы с учетом ее размера, формы, эхогенности паренхимы, ширины вирсунгова протока, селезеночной вены; б) разбор эхо — признаков диффузных и очаговых
поражений поджелудочной железы.
- селезенка:
а) ознакомление с нормальной эхографической картиной
селезенки с учетом размера, формы, эхогенности паренхимы, формы и размеров селезеночной вены;
б) разбор эхо — признаков диффузных и очаговых
изменений в селезенке при гепатолиенальном синдроме, фиброзе печени, гематологических расстройствах.
- желудочно — кишечный тракт:
а) ознакомление с возможностями исследования желудка и
12-перстной кишки с учетом их формы, нормальной эхоструктуры; б) методика эхографического исследования желудка при
подозрении на пилоростеноз, пилороспазм, оценки эвакуаторной функции, функциональная оценка 12-перстной кишки.
III. Органы мочевыделительной системы и надпочечники.
- Краткое повторение анатомии почек, мочеточников, мочевого пузыря и надпочечников.
- Методика исследования органов мочевыделения и надпочечников со спины и через переднюю брюшную стенку.
- Ознакомление с эхографической картиной нормальных почек, мочевого пузыря, надпочечников, с учетом их размеров, формы, эхоструктуры.
- Разбор эхо — признаков диффузных и объемных поражений почек на различных уровнях, ознакомление с методикой определения остаточной мочи.
- Разбор эхо — признаков патологических изменений в надпочечниках.
IV. Сердце
1) Краткое повторение анатомии сердца и крупных сосудов. 2) Освоение методики эхографического исследования сердца в режимах М и М-В. 3) Освоение методики эхографического исследования сердца в режиме В. 4) Ознакомление с методами функциональной оценки сердца. 5) Ознакомление с нормальной эхографической картиной сердца при исследованиях в режиме М и В, включая правый и левый желудочки, правое и левое предсердия, межжелудочковую и межпредсердную перегородки, митральный и трикуспидальный клапаны, аорту и аортальный клапан, легочную артерию. 6) Разбор эхографических признаков пороков сердца. 7) Разбор эхографических признаков кардиопатий.
Заключительное занятие. Ответы на вопросы.
V. Исследование головного мозга у новорожденных детей.
- Ознакомление с принципами работы ультразвуковых диагностических аппаратов, выбор датчика и режима работы.
- Краткое повторение анатомии головного мозга.
- Методика исследования головного мозга (секторальное сканирование через большой родничок, плоскости сканирования) и измерения (желудочковая система, патологические очаги).
- Нормальная эхографическая картина головного мозга новорожденного ребенка.
- Особенности эхокартины в зависимости от гестационного возраста ребенка.
- Разбор эхо — признаков внутричерепных кровоизлияний, особенности их локализации и их динамика.
- Разбор эхо — признаков гипоксически — ишемических поражений головного мозга.
- Разбор эхо — признаков инфекционных поражений и вариантов отека головного мозга.
- Диагностика пороков развития мозга.
- Заключительное занятие. Ответы на вопросы.
Примечание
1. Персональные заявки на командируемых для первичного обучения педиатров по ультразвуковой диагностике патологии новорожденных детей в НИИ педиатрии АМН СССР, Центральном ордена Ленина институте усовершенствования врачей Минздрава СССР, детской клинической больнице N 13 г. Москвы согласуются с руководством учреждений. 2. Заявки на циклы усовершенствования по ультразвуковой диагностике патологии новорожденных детей подаются в ЦОЛИУВ в установленном порядке.
Заместитель начальника Управления
лечебно — профилактической помощи
детям и матерям
Н.Н.ВАГАНОВ
Приложение N 2
к приказу Министерства
здравоохранения СССР
от 10.08.1987 г. N 943
РАСПРЕДЕЛЕНИЕ МЕСТ
ПЕРВИЧНОЙ ПОДГОТОВКИ ПЕДИАТРОВ СОЮЗНЫХ РЕСПУБЛИК ПО УЛЬТРАЗВУКОВОЙ ДИАГНОСТИКЕ НОВОРОЖДЕННЫХ И НЕДОНОШЕННЫХ ДЕТЕЙ НА 1987 Г. (С УЧЕТОМ ВЫДЕЛЕННОЙ АППАРАТУРЫ)
НИИ ЦИУв б-ца НИИ ЦИУв б-ца НИИ ЦИУв б-ца НИИ ЦИУв б-ца пед. N 13 пед. N 13 пед. N 13 пед. N 13 АМН АМН АМН АМН СССР СССР СССР СССР IX - X X - XI XI - XII II - III РСФСР 2 1 2 2 1 2 2 2 2 2 УССР 1 2 2 1 БССР 1 Узб. ССР 1 1 Каз. ССР 1 Кирг. ССР 1 Молд. ССР 1 Аз. ССР 1 Арм. ССР 1 Груз. ССР 1 Лат. ССР 1 Лит. ССР 1 Эст. ССР 1 Тад. ССР 1 Турк. ССР 1
Примечание: число обучающихся на рабочем месте в учреждении не должно превышать 4 специалистов одновременно.
Заместитель начальника Управления
лечебно — профилактической помощи
детям и матерям
Н.Н.ВАГАНОВ
Приложение N 3
к приказу Министерства
здравоохранения СССР
от 10.08.1987 г. N 943
ОРГАНИЗАЦИЯ РАБОТЫ
КАБИНЕТОВ УЛЬТРАЗВУКОВОГО ОБСЛЕДОВАНИЯ
НОВОРОЖДЕННЫХ И НЕДОНОШЕННЫХ ДЕТЕЙ ГОРОДСКИХ И ОБЛАСТНЫХ БОЛЬНИЦ
В республиканских, областных и городских больницах, имеющих суммарно не менее 90 коек в отделениях новорожденных в недоношенных детей и отделениях детей раннего возраста при получении ультразвукового аппарата с секторальным датчиком в отделении новорожденных организуют кабинет ультразвукового обследования. В больницах, имеющих меньшее число коек для детей раннего возраста для проведения функциональных, рентгенологических и ультразвуковых обследований у новорожденных могут быть использованы соответствующие службы больницы (при первоочередном обследовании больных из отделений для новорожденных и недоношенных детей и при условии строгого выполнения санитарно — противоэпидемического режима). Кабинет ультразвукового обследования отделения для новорожденных и недоношенных детей является структурным подразделением этого отделения. Как и все кабинеты и палаты в отделении для новорожденных и недоношенных детей, он имеет подводку горячей и холодной воды, подводку кислорода, стационарные бактерицидные облучатели (над входом и с противоположной стороны). В кабинете на специальной передвижной подставке устанавливается ультразвуковой аппарат (обязательно с секторальными датчиками 5,0 и 7,5 МГгерц, обеспечивающих высокую информативность патологии мозга у новорожденных детей). Для осмотра новорожденных в кабинете устанавливается пеленальник, рабочий стол и стулья для врача и медицинской сестры. Для хранения медицинской документации, фотографий в кабинете устанавливают небольшой шкаф и холодильник для хранения поляроидной бумаги и фотопленки. Перед осмотром детей на ультразвуковом аппарате медицинская сестра готовит аппарат и все необходимое для ребенка: пеленки и питьевой раствор с соской. Ультразвуковое обследование детей, которые находятся в тяжелом состоянии и нуждаются в постоянном пребывании в кювезе, производят в кювезах, палатах, боксах, где находится ребенок. Персонал, проводящий ультразвуковое обследование новорожденных детей, должен иметь специальную подготовку по вопросам реанимации и интенсивной терапии новорожденных детей. Подготовку новорожденного, уход за ним и лечебные назначения медицинская сестра выполняет без привлечения младшего медицинского персонала с соблюдением правил санитарно — гигиенического и противоэпидемического режимов отделения новорожденных. Температура воздуха в кабинете ультразвукового обследование как и в палатах для новорожденных, поддерживается на уровне 22-24 град. С. Проветривание палаты осуществляют не реже 3-4 раз в смену. Перед началом работы кабинета и в конце смены помещение подвергается влажной уборке. Пеленальник, куда укладывается ребенок, по окончании обследования каждого ребенка протирают стерильной ветошью, смоченной 3% раствором перекиси водорода или 1% раствором хлорамина, которые содержат в закрытой из темного стекла бутыли. Содержимое бутыли меняют ежедневно. Обработку ультразвукового аппарата одним из дезинфицирующих средств (3% раствором перекиси водорода, 1% раствором хлорамина) производят перед осмотром и после осмотра детей. При осмотре детей в боксе переносной аппарат обрабатывают (протирают) стерильной ветошью, смоченной дезинфицирующим средством, после окончания осмотра каждого ребенка (перед занесением его в следующий бокс, палату). Датчики аппарата перед каждым осмотром ребенка протирают стерильным тампоном, смоченном в спирте. Перед осмотром каждого ребенка врач и медицинская сестра моют руки, используя хозяйственное, детское или туалетное мыло, предназначенное только для этих целей. После осмотра новорожденного ребенка, имеющего гнойничковые заболевания кожных покровов, персонал (перед мытьем рук с мылом) 2-3 мин. обеззараживает руки раствором бактерицидных препаратов. Последовательность обследования детей организуют с учетом тяжести состояния новорожденных (первыми осматривают детей в отделениях реанимации и интенсивной терапии). Дети с гнойно — воспалительными заболеваниями кожных покровов осматриваются в последнюю очередь. Учитывая опыт работы с новорожденными детьми кафедры неонатологии ЦОЛИУВ (ультразвуковой аппарат фирмы «Аусоникс») и отделения ультразвуковой диагностики НИИ педиатрии АМН СССР (ультразвуковой аппарат «Аусоникс», «Ташиба-38»), за час рабочего времени специалист обследует 2-х новорожденных детей. Специальной медикаментозной подготовки для проведения ультразвукового обследования детей не требуется. Учитывая высокую информативность ультразвукового обследования больных, при необходимости, ультразвуковой аппарат, выделенный для отделений новорожденных детей, во второй половине дня (при двухсменной работе) может быть использован для обследования новорожденных детей и детей грудного возраста, направленных из других стационаров, поликлиник, а также для осмотра детей в катамнезе, которые ранее находились на госпитализации. Ультразвуковое обследование амбулаторных больных организуют в помещении вне отделения новорожденных, куда медицинская сестра, работающая с аппаратом в отделении новорожденных, переносит или перевозит его на каталке. После окончания амбулаторного обследования больных медицинская сестра, работающая с аппаратом, возвращает его в отделение новорожденных детей (после соответствующей обработки аппарата стерильной ветошью, смоченной дезинфицирующим раствором), о чем ставит в известность дежурного врача отделения. При необходимости использования аппарата в отделения в последующие часы аппарат должен быть прокварцован в помещении кабинета ультразвуковой диагностики не менее 30 мин. Медицинский персонал, работающий с ультразвуковыми аппаратами в отделениях новорожденных детей, строго выполняет режим работы и санитарно — противоэпидемический режим этих отделений (Приказ Минздрава СССР N 440 от 20 апреля 1983 г. «О дополнительных мерах по совершенствованию медицинской помощи новорожденным детям»). Медицинские халаты персонал меняет ежедневно, в боксах персонал обязан работать в масках, при осмотре детей в кабинетах ультразвуковой диагностики масочный режим может соблюдаться только при введении карантина в учреждении (городе). Заболевший персонал для работы с новорожденными детьми не допускается. Во время обследования детей медицинский персонал должен работать без часов, колец, браслетов. При выделении помещения для осмотра амбулаторных больных (лучше один из мельцеровских боксов больницы) необходимо предусмотреть помещение, в котором мать может снять верхнюю одежду и обувь, при необходимости — перепеленать ребенка. Переносные ультразвуковые диагностические аппараты могут быть использованы консультативными бригадами врачей — реаниматологов, работающих на специализированных транспортно — реанимационных машинах для новорожденных и недоношенных детей (при условии, что врач — реаниматолог владеет ультразвуковой диагностикой патологии новорожденных и недоношенных детей). Рациональное, бережное использование ультразвукового диагностического аппарата на всех этапах оказания медицинской помощи новорожденным детям в акушерских и детских лечебных учреждениях позволит улучшить своевременную диагностику и лечение новорожденных и недоношенных детей.
<*> Указания подготовлены сотрудниками кафедры неонатологии ЦОЛИУВ Минздрава СССР М.С.Ефимовым, В.А.Мачинской, В.Г.Аксельродом (зав. кафедрой - профессор В.В.Гаврюшов); руководителем отдела ультразвуковой диагностики НИИ педиатрии АМН СССР И.В.Дворяковским (директор - академик АМН СССР М.Я. Студеникин); Главным управлением лечпрофпомощи детям и матерям Минздрава СССР.
Заместитель Начальника
Главного управления
лечпрофпомощи детям и матерям
Н.Н.ВАГАНОВ
Товары
-
Netter Interactive Atlas of Clinical Anatomy
479 ₽
-
ABC of Dermatology
342 ₽
-
Histology Books 2
342 ₽
-
Oncology Books 10
342 ₽
