Введен в действие с 29 октября 2008 года (пункт 3 данного документа) Текст документа
УТВЕРЖДАЮ
Руководитель Федеральной
службы по надзору в сфере
защиты прав потребителей
и благополучия человека,
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации
Г.Г.ОНИЩЕНКО
29 октября 2008 г.
Дата введения —
с момента утверждения
4.2. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ.
БИОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
МЕТОД МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО ИЗМЕРЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИИ КЛЕТОК МИКРООРГАНИЗМА ACINETOBACTER SPECIES JN-2 (ПРЕПАРАТА ДЕСТРОЙЛ) В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
МУК 4.2.2427-08
- Разработаны в ФГУН «Новосибирский научно-исследовательский институт гигиены Роспотребнадзора».
- Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 3 июля 2008 г. N 2).
- Утверждены и введены в действие Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 29 октября 2008 г.
- Введены впервые.
- Общие положения и область применения
Настоящие Методические указания устанавливают методику проведения микробиологического количественного анализа концентрации клеток штамма Acinetobacter species JN-2 (препарата Дестройл) в воздухе рабочей зоны в диапазоне концентраций от 10 до 500000 клеток в 1 куб. м воздуха. Методические указания разработаны в соответствии с требованиями ГОСТов 12.1.005-88 «ССБТ. Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования» и Р 8.563-96 «Методики выполнения измерений». Методические указания предназначены для применения в учреждениях Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, а также в лабораториях других предприятий, организаций и учреждений, аккредитованных в установленном порядке на право проведения микробиологических исследований. Методические указания одобрены и рекомендованы секцией «Гигиенические аспекты биотехнологии и микробного загрязнения окружающей среды» Проблемной комиссии «Научные основы гигиены окружающей среды».
2. Характеристика препарата Дестройл
Бактериальный препарат Дестройл является продуктом микробиологического синтеза на основе культуры Acinetobacter species JN-2. Препарат Дестройл представляет собой тонко измельченный порошок, состоящий из вегетативных клеток культуры-продуцента, остатков питательной среды и метаболитов, стабилизирующих добавок и наполнителей. Препарат обладает высоко выраженной окислительной активностью в отношении углеводородов нефти и нефтепродуктов, вызывая в них глубокие необратимые процессы деградации до остаточных продуктов, относящихся к экологически нейтральным соединениям. Дестройл применяют для очистки почвы и воды, кроме водоемов 1-го и 2-го классов водопользования, от загрязнений сырой нефтью и ее продуктами.
В воздухе может находиться в виде аэрозоля. Препарат не обладает раздражающим и резорбтивным действиями, кумулятивные свойства выражены слабо (К > 5).
кум
ПДК в воздухе рабочей зоны — 50000 м. кл/куб. м
3. Физико-химические и биологические показатели препарата Дестройл
Мелкодисперсный порошок
Цвет от светло-желтого до светло-коричневого. Фракционный состав 500 мкм - 3,5%; 150 мкм - 70%. Массовая доля влаги (%) не более 10,0. Растворимость в воде 0,8-1,1%. Степень биохимического окисления нефтепродуктов (%) не менее 75,0. Количество жизнеспособных бактериальных 8 клеток в 1 г не менее 1 х 10 .
4. Биологическая характеристика Acinetobacter species JN-2
Бактерии — неспоровые, неподвижные, грамотрицательные. Культура представлена очень короткими, толстыми палочками (коккоидными палочками), преимущественно в парах в молодом возрасте, в стационарной фазе роста — кокками. Средний размер клеток (20 ч, среда Хоттингера) 1,0-1,5 мкм. Двухсуточные колонии, выращенные при 32 град. C, — круглые, каплевидные, бесцветные, непрозрачные, диаметр — 1-2 мм. Пятисуточные колонии — диаметр 2-3 мм. Устойчивы к пенициллину.
Штамм депонирован во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов под названием Acinetobacter species JN.
5. Пределы измерений
Методика обеспечивает выполнение измерений количества клеток микроорганизма в воздухе рабочей зоны в диапазоне концентраций от 10 до 500000 клеток в 1 куб. м воздуха при доверительной вероятности 0,95. Пределы относительной погрешности при отборе заданного объема воздуха — 25%.
6. Метод измерений
Определение основано на использовании пробоотборного устройства электрического ПУ-1Б, предназначенного для автоматического отбора проб биологических аэрозолей при проведении санитарного контроля воздуха рабочей зоны. Устройство обеспечивает отбор проб аэрозолей на плотную питательную среду имплактационным осаждением аэрозольных частиц размером 1,5 мкм.
7. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы
При выполнении измерений применяют следующие средства измерений, вспомогательные устройства и материалы.
7.1. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы
Устройство пробоотборное ПУ-1Б
Прибор для бактериологического анализа воздуха, модель 818 (щелевой прибор Кротова) ТУ 64-12791-77 Прибор для подсчета колоний микроорганизмов Термостаты электрические суховоздушные или водяные Автоклав электрический ГОСТ 9586-75 Бокс, оборудованный бактерицидными лампами Холодильник бытовой
Весы лабораторные аналитические типа ВЛА-200 Микроскоп биологический с иммерсионной системой типа «Биолам Л-211»
Лупа с увеличением х10 ГОСТ 25706-83 Чашки Петри бактериологические плоскодонные, стеклянные диаметром 90 мм ГОСТ 23932-90 Пробирки бактериологические П и П вместимостью
1 2 15 и 20 мл ГОСТ 25336-82 Пипетки мерные на 1, 5 и 10 мл ГОСТ 1770-74 Колбы конические вместимостью 250 и 500 мл ГОСТ 1770-74 Секундомер ГОСТ 9586-75 Барометр ГОСТ 24696-79
Примечание.
ГОСТ 9412-77 утратил силу с 1 января 1996 года в связи с введением в действие ГОСТа 9412-93 «Марля медицинская. Общие технические условия».
Марля медицинская ГОСТ 9412-77 Вата медицинская гигроскопическая ГОСТ 25556-81
7.2. Реактивы, растворы
Агар микробиологический ГОСТ 17206-84 Вода дистиллированная ГОСТ 6709-72 Антибиотик: бензилпенициллина натриевая соль Спирт этиловый ректификат ГОСТ 5962-67
Агаризованная среда МПА (агар — 1,5-1,8%, pH 7,5-7,8, режим стерилизации 1,1-1,2 ати в течение 30 мин.)
8. Требования безопасности
При выполнении измерений концентрации клеток штамма-продуцента в воздухе рабочей зоны соблюдают следующие требования. 8.1. Санитарные правила СП 1.2.731-99 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности и гельминтами». 8.2. Правила техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.005-88. 8.3. Электробезопасность при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019-79 и инструкции по эксплуатации прибора. 8.4. Руководство «Положение об организации работы по технике безопасности в микробиологической промышленности» (1980), «Инструкции по устройству, требованиям безопасности и личной гигиены при работе в микробиологических лабораториях предприятий микробиологической промышленности» (1977). 8.5. Все виды работ с реактивами проводят только в вытяжном шкафу при работающей вентиляции, работа с биологическим материалом осуществляется в боксе, оборудованном бактерицидными лампами.
9. Требования к квалификации операторов
К выполнению измерений и обработке их результатов допускают лиц с высшим или средним специальным образованием, прошедших соответствующую подготовку и имеющих навыки работы в области микробиологических исследований.
10. Условия измерений
Процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят в нормальных условиях при температуре воздуха (20 +/- 5) град. C, атмосферном давлении 630-800 мм рт. ст. и влажности воздуха не более 80%.
11. Проведение измерения
11.1. Условия отбора проб воздуха
Для определения концентрации клеток микроорганизма воздух аспирируют при помощи пробоотборника со скоростью 10 л/мин. на поверхность плотной питательной агаризованной среды. Время аспирации воздуха (1-10 мин.) зависит от предполагаемой концентрации клеток штамма-продуцента. Аппарат перед каждым отбором пробы воздуха протирают спиртом. Особенно тщательно обрабатывают поверхность подвижного диска и внутреннюю стенку прибора; наружную и внутреннюю стенку крышки. На подвижный диск устанавливают подготовленную чашку Петри со средой, снимают с нее крышку. Прибор закрывают. Соприкосновение крышки прибора со средой недопустимо. После отбора пробы воздуха и остановки диска прибор открывают, быстро снимают чашку Петри и закрывают крышкой. На дне чашки Петри стеклографом отмечают точку контроля, время аспирации и дату отбора пробы.
11.2. Выполнение анализа
При выполнении анализа воздуха прямым методом агаризованную среду МПА расплавляют, остужают до 50-60 град. C, добавляют свежеприготовленный в стерильной дистиллированной воде раствор антибиотика бензилпенициллина натриевая соль из расчета 180-210 мкг/мл среды (для подавления посторонней бактериальной микрофлоры), тщательно перемешивают и разливают в чашки Петри. Чашки с застывшей средой помещают в термостат на сутки при температуре 37 град. С, после чего проросшие чашки бракуют, стерильные чашки используют для контроля воздуха. После отбора проб воздуха чашки Петри помещают в термостат с температурой 29-31 град. C. Через 24 часа производят подсчет выросших колоний по культурально-морфологическим признакам (прямой метод). Ростовые свойства всех используемых питательных сред должны быть проверены в соответствии с «Требованиями к ростовым свойствам питательных сред» (Государственная Фармакопея СССР, изд. XI, вып. 2, с. 208), что позволит более полно оценить пределы ошибки метода. Для этого эталонный музейный штамм-продуцент высевается на 2-3 чашки каждой используемой среды.
12. Вычисление результатов измерения
Расчет концентрации клеток продуцента в пересчете на 1 куб. м воздуха производят по формуле:
С = 1000 х(Р / Q),
где:
С — количество микробных клеток в воздухе (кл./куб. м); Р — число микробных клеток в отобранной пробе воздуха; Q — объем отобранной пробы, л.
В случае невозможности использования пробоотборника рекомендуем применять метод седиментации клеток продуцента из воздуха непосредственно на чашки Петри с плотной питательной средой. Время отбора проб воздуха может составлять до 30 мин. При использовании этого метода пользуются следующим расчетом концентрации клеток продуцента: эмпирически установлено, что за 5 мин. на площадь 100 кв. см оседает количество бактерий, содержащееся в 10 л воздуха, следовательно, за 1 мин. — количество бактерий из 2 л воздуха. Площадь чашки Петри диаметром 100 мм равна 78,54 кв. см. Составляя пропорцию, определяем, что за 1 мин. на стеклянную чашку Петри оседают клетки из 1,57 л. Количество клеток в 1 куб. м воздуха определяем по вышеприведенной формуле, где Q = 1,57 л/мин. х t (время аспирации, мин.). Предлагаемый метод является ориентировочным и может быть использован как вспомогательный.
13. Оформление результатов измерений
Результаты измерений оформляют протоколом по нижеприведенной форме.
Протокол N ________ количественного микробиологического анализа штамма-продуцента Acinetobacter species JN (препарат Дестройл) в воздухе рабочей зоны
- Дата проведения анализа ________________________________________________
- Место отбора пробы _____________________________________________________
- Название лаборатории ___________________________________________________
- Юридический адрес организации __________________________________________
Результаты микробиологического анализа
Шифр или N пробы Определяемый Концентрация, микроорганизм кл./куб. м
Ответственный исполнитель _________________________________________________ Научный руководитель ______________________________________________________
14. Список литературы
- ГОСТ 12.1.005-88 «ССБТ. Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования».
- ГОСТ Р 8.563-96 «ГСИ. Методики выполнения измерений».
- Положение об организации работы по технике безопасности в микробиологической промышленности. М., 1980, 27 с.
- Инструкции по устройству, требованиям безопасности и личной гигиены при работе в микробиологических лабораториях предприятий микробиологической промышленности. М., 1977, 7 с.
Гигиенические нормативы, утвержденные данным документом, введены в действие с 1 января 2009 года. Текст документа
Зарегистрировано в Минюсте РФ 24 ноября 2008 г. N 12720
ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА ПО НАДЗОРУ В СФЕРЕ ЗАЩИТЫ ПРАВ ПОТРЕБИТЕЛЕЙ И БЛАГОПОЛУЧИЯ ЧЕЛОВЕКА
ГЛАВНЫЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ САНИТАРНЫЙ ВРАЧ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ПОСТАНОВЛЕНИЕ
28 октября 2008 г.
N 63
ОБ УТВЕРЖДЕНИИ ГИГИЕНИЧЕСКИХ НОРМАТИВОВ ГН 2.2.6.2425-08
На основании Федерального закона от 30.03.1999 N 52-ФЗ «О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения» (Собрание законодательства Российской Федерации, 1999, N 14, ст. 1650; 2002, N 1 (ч. I), ст. 1; 2003, N 2, ст. 167; N 27 (ч. I), ст. 2700; 2004, N 35, ст. 3607; 2005, N 19, ст. 1752; 2006, N 1, ст. 10; N 52 (ч. I), ст. 5498; 2007, N 1 (ч. I), ст. 21, ст. 29; N 27, ст. 3213; N 46, ст. 5554; N 49, ст. 6070) и Постановления Правительства Российской Федерации от 24.07.2000 N 554 «Об утверждении Положения о государственной санитарно-эпидемиологической службе Российской Федерации и Положения о государственном санитарно-эпидемиологическом нормировании» (Собрание законодательства Российской Федерации, 2000, N 31, ст. 3295, 2005, N 39, ст. 3953) постановляю: 1. Утвердить гигиенические нормативы ГН 2.2.6.2425-08 — «Дополнение N 2 к гигиеническим нормативам «Предельно допустимые концентрации (ПДК) микроорганизмов-продуцентов, бактериальных препаратов и их компонентов в воздухе рабочей зоны. ГН 2.2.6.2178-07 <>» (приложение).
<> Зарегистрированы в Министерстве юстиции Российской Федерации, регистрационный N 9256 от 5 апреля 2007 г.
Примечание.
В официальном тексте документа, видимо, допущена опечатка: гигиенические нормативы имеют номер ГН 2.2.6.2425-08, а не ГН 2.2.6.2425-07.
2. Ввести в действие гигиенические нормативы ГН 2.2.6.2425-07 с 1 января 2009 года.
Г.Г.ОНИЩЕНКО
Приложение
УТВЕРЖДЕНО
Постановлением
Главного государственного
санитарного врача
Российской Федерации
от 28 октября 2008 г. N 63
ПРЕДЕЛЬНО ДОПУСТИМЫЕ КОНЦЕНТРАЦИИ (ПДК) МИКРООРГАНИЗМОВ-ПРОДУЦЕНТОВ, БАКТЕРИАЛЬНЫХ ПРЕПАРАТОВ И ИХ КОМПОНЕНТОВ В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
Примечание.
В официальном тексте документа, видимо, допущена опечатка: имеется ввиду Дополнение N 2, а не Дополнение N 1.
ДОПОЛНЕНИЕ N 1 К ГН 2.2.6.2178-07
ГН 2.2.6.2425-08
ПРЕДЕЛЬНО ДОПУСТИМАЯ КОНЦЕНТРАЦИЯ (ПДК) БАКТЕРИАЛЬНЫХ ПРЕПАРАТОВ И ИХ КОМПОНЕНТОВ В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
N Наименование Назначение ПДК, Класс Особенности бактериального кл/ опасности действия на препарата куб. м организм 1 Дестройл (на основе Очистка нефтяных 50000 4
Acinetobacter species загрязнений воды и почвы JN-2)
Зарегистрировано в Минюсте РФ 13 ноября 2008 г. N 12628
ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА ПО НАДЗОРУ В СФЕРЕ ЗАЩИТЫ ПРАВ ПОТРЕБИТЕЛЕЙ И БЛАГОПОЛУЧИЯ ЧЕЛОВЕКА
ГЛАВНЫЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ САНИТАРНЫЙ ВРАЧ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ПОСТАНОВЛЕНИЕ
28 октября 2008 г.
N 61
ОБ УСТАНОВЛЕНИИ РАЗМЕРА САНИТАРНО-ЗАЩИТНОЙ ЗОНЫ СИБИРЕЯЗВЕННОГО СКОТОМОГИЛЬНИКА НА ТЕРРИТОРИИ СИНЬЯЛЬСКОГО СЕЛЬСКОГО ПОСЕЛЕНИЯ ЧЕБОКСАРСКОГО РАЙОНА ЧУВАШСКОЙ РЕСПУБЛИКИ
Я, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации Г.Г.Онищенко, рассмотрев материалы по вопросу об установлении размера санитарно-защитной зоны сибиреязвенного скотомогильника, расположенного на правом берегу р. Волга в районе деревни Типсирима Синьяльского сельского поселения Чебоксарского района Чувашской Республики на расстоянии 350 м севернее от автомагистрали Чебоксары — Новочебоксарск, имеющего «Ветеринарно-санитарную карточку на скотомогильник N 71», установил, что результаты эпизоотолого-эпидемиологического мониторинга, гидрогеологического заключения, а также результаты проведенных санитарно-химических, паразитологических и микробиологических исследований проб почвы, отобранных по периметру границы скотомогильника, позволяют сократить санитарно-защитную зону данного сибиреязвенного скотомогильника. Географические координаты границы скотомогильника установлены с использованием навигационной системы GPS: Восточная граница (широта — 56 градусов 4 минуты 32.6 секунды; долгота — 47 градусов 14 минут 46.2 секунды), Юго-восточная граница (широта — 56 градусов 4 минуты 32.5 секунды; долгота — 47 градусов 14 минут 45.5 секунды), Южная граница (широта — 56 градусов 4 минуты 32.9 секунды; долгота — 47 градусов 14 минут 44.9 секунды), Юго-западная граница (широта — 56 градусов 4 минуты 33.0 секунды; долгота — 47 градусов 14 минут 43.9 секунды), Западная (широта — 56 градусов 4 минуты 33.6 секунды; долгота — 47 градусов 14 минут 43.6 секунды), Северо-западная (широта — 56 градусов 4 минуты 33.9 секунды; долгота — 47 градусов 14 минут 44.8 секунды), Северная граница (широта — 56 градусов 4 минуты 33.3 секунды; долгота — 47 градусов 14 минут 45.6 секунды), Северо-восточная граница (широта — 56 градусов 4 минуты 33.2 секунды; долгота — 47 градусов 14 минут 46.0 секунды), Территория сибиреязвенного скотомогильника имеет форму вытянутого эллипса и ориентирована длинной осью с северо-запада на юго-восток и составляет в длину 82 м, в ширину — 28 м. В целях обеспечения безопасности среды обитания для здоровья человека на основании ст. 21 и 51 Федерального закона от 30.03.1999 N 52-ФЗ «О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения» (Собрание законодательства Российской Федерации, 2002, N 1 (ч. I), ст. 2; 2003, N 2, ст. 167; N 27 (ч. I), ст. 2700; 2004, N 35, ст. 3607; 2005, N 19, ст. 1752; 2006, N 1, ст. 10; N 52 (ч. I), ст. 5498; 2007, N 1 (ч. I), ст. 21, ст. 29; N 27, ст. 3213; N 46, ст. 5554; N 49, ст. 6070; 2008, N 24, ст. 2801; N 29 (ч. I), ст. 3418) и в соответствии с п. 2.10 СанПиН 2.2.1./2.1.1.1200-03 «Санитарно-защитные зоны и санитарная классификация предприятий, сооружений и иных объектов» (утверждены Постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 25.09.2007 N 74, зарегистрированы в Минюсте России от 25.01.2008 N 10995) постановляю: 1. Установить санитарно-защитную зону в размере 50 м от границы территории сибиреязвенного скотомогильника, расположенного на правом берегу р. Волга в районе деревни Типсирима Синьяльского сельского поселения Чебоксарского района Чувашской Республики, имеющего «Ветеринарно-санитарную карточку на скотомогильник N 71», с учетом географических координат границы скотомогильника. 2. Руководителю Управления Роспотребнадзора по Чувашской Республике Е.Ф.Работаеву обеспечить контроль за соблюдением размера санитарно-защитной зоны сибиреязвенного скотомогильника, расположенного на правом берегу р. Волга в районе деревни Типсирима Синьяльского сельского поселения Чебоксарского района Чувашской Республики, имеющего «Ветеринарно-санитарную карточку на скотомогильник N 71», от установленных географических координат границы скотомогильника. 3. Заместителю Главного государственного санитарного врача Российской Федерации Л.П.Гульченко довести настоящее Постановление до сведения заинтересованных лиц. 4. Контроль за выполнением настоящего Постановления возложить на заместителя Главного государственного санитарного врача Российской Федерации Л.П.Гульченко.
Г.Г.ОНИЩЕНКО
