Утверждаю
Начальник Главного управления
лечебно-профилактической помощи
детям и матерям Минздрава СССР
Е.И.АНДРЕЕВА
2 июля 1980 г. N 11-53/6
ИНСТРУКЦИЯ
ПО УНИФИКАЦИИ МИКРОСКОПИЧЕСКИХ МЕТОДОВ ИССЛЕДОВАНИЯ СЕКЦИОННОГО И БИОПСИЙНОГО МАТЕРИАЛА ДЛЯ ПАТОЛОГОАНАТОМОВ ПЕДИАТРИЧЕСКОГО ПРОФИЛЯ
Патологоанатомическая диагностика заболеваний детского возраста особенно в перинатальном периоде, имеет свои особенности в отличие от патологии взрослых. Объективный анализ детской патологии нередко представляет значительные трудности в связи с невыраженностью макроскопических изменений, определяющих нозологические формы. Наиболее полное раскрытие патологических процессов при анализе детского секционного материала возможно при условии широкого микроскопического, бактериологического, бактериоскопического и вирусологического исследований. В изданных ранее инструкциях:
«Инструкция по исследованию биопсий и цитологического материала» МЗ СССР, М., 08.07.72; и «Инструкция по унификации гистологических и гистохимических методов исследований биопсийного и секционного материала» МЗ СССР, М., 02.03.76, не выделены особенности макро- и микроскопического исследования в патологии детского возраста. Предлагаемая инструкция является дополнением к изданным инструкциям, в которой уточняется необходимый объем исследований с учетом основных форм патологии детского возраста.
ПЕРЕЧЕНЬ
РЕКОМЕНДУЕМОГО ОБЪЕМА ГИСТОЛОГИЧЕСКОГО
ИССЛЕДОВАНИЯ СЕКЦИОННОГО МАТЕРИАЛА
Минимальный объем гистологического исследования, обязательный для всех секционных случаев. Во время аутопсии для гистологического исследования берутся кусочки из следующих органов: 1. Головной мозг — 4 кусочка (кора, центральные извилины, подкорковая область — зрительный бугор со стенкой бокового желудочка, продолговатый мозг, варолиев мост). 2. Легкие — 4 — 5 кусочков (верхние и нижние доли, прикорневые и периферические отделы). 3. Сердце — 2 кусочка (стенка левого и правого желудочков). 4. Тонкая кишка — 2 кусочка (подвздошная и тощая кишка с групповыми фолликулами). 5. Толстая кишка — 2 кусочка (прямая и сигмовидная). 6. Печень — 2 — 3 кусочка (1 кусочек для окраски на жир). 7. Поджелудочная железа — 3 кусочка (головка, тело, хвост). 8. Слюнные железы — 1 — 2 кусочка (околоушные, подчелюстные). 9. Селезенка — 1 — 2 кусочка.
10. Почки — 2 кусочка.
11. Надпочечники — 2 кусочка (один для окраски на жир). 12. Зобная железа — 2 кусочка (левая и правая доли). 13. Лимфатические узлы — 3 железы: шейные, бронхо-пульмональные, мезентериальные.
ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЙ ОБЪЕМ ИССЛЕДОВАНИЙ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ РАЗЛИЧНЫХ ФОРМ ЗАБОЛЕВАНИЯ
Формы Микроскопи- Бактерио- Бактери- Вирусо- Цитологи- заболевания ческое скопическое ологическое логическое ческое исследование исследова- исследова- исследова- исследова- ние ние ние ние 1 2 3 4 5 6
I. Инфекционно- паразитарные заболевания
- Острые Трахея — 1 Отпечатки с Кусочки Кусочки респираторные кусочек трахеи, трахеи, трахеи инфекции Бронхи — 2 бронхов, бронхов, бронхов,
кусочка легкого <*> легкого легкого
- Острые кишечные инфекции стафилококковая, Желудок — Мазки слизи Изолирован- При колиинфекция, 2 кусочка из ные петли энтеро- сальмонеллез, 12-ти кишечника тонкой и вирусных кандидоз, пищевые перстная толстой инфекциях токсикоинфекции, кишка — 1 кишки, тонкая энтеровирусные и кусочек, желчный кишка — 1 др. тонкая кишка пузырь кусочек,
- 1 кусочек, толстая толстая кишка — 1 кишка — 1 кусочек кусочек Желчный пузырь — 1 кусочек, мезенте- ральные лимфоузлы — 2 кусочка, диафрагма — 1 кусочек
- Нейроинфекция Трахея — 1 Кусочки Кусочки (менингококковая кусочек мозга с мозга инфекция, Бронхи — 2 оболочками, энцефалиты, кусочка кровь из полиомиэлиты и Кожа — правого др.) элементы желудочка
сыпи — 2 сердца, кусочка селезенка Мозг — 10 кусочков (кора, подкорковые узлы, стенка бокового желудочка, Варолиев мост, про- долговатый, спинной мозг
- шейный, грудной, поясничный отделы)
- Сепсис При пупочном Мазки и Содержимое
сепсисе: отпечатки септических пупочная содержимого очагов, ямка — 2 септических кровь из кусочка, очагов, правого пупочная селезенки желудочка вена — 2 — 3 сердца кусочка, кусочек пупочные селезенки артерии 4 — 6 кусочков (с каждой артерии по 2
- 3 кусочка) Первичный очаг при другой локализации
- 2 кусочка
- Токсоплазмоз Глаз — 2 При
кусочка возможности (рекоменду- произвести ется заливка биопробы. в целлоидин) Посылаются
кусочки мозга, печени, селезенки, легкого, взятые стерильно
- Врожденный Кости — 2 сифилис кусочка
(нижний эпифиз бедренной кости) Кожа — сифилиды 1 — 2 кусочка Печень — 1 кусочек Легкое — 1 кусочек для импрегнации серебром по Левадити (выявление спирохет)
II. Коллагеновые заболевания
Ревматизм Ушко левого Иммунофлю- предсердия - оресцент- 1 кусочек ное иссле- Клапаны - 2 дование - 3 кусочка тканей Сосочковые мышцы - 2 - 3 кусочка Хордальные нити - 1 - 2 кусочка Ревматоидный Ткань сино-
артрит системная виальной красная волчанка оболочки — 1
Системная - 2 кусочка склеродермия Фрагменты Узелковый хряща - 1 - периартериит 2 кусочка Кожа - 2 - 3 кусочка Подкожная жировая клетчатка 1 - 2 кусочка Мышцы - 1 - 2 кусочка Добавочно кусочки из других органов в зависимости от выраженности тканевых изменений III. Болезни Сосудистая обмена оболочка (диабет, глаза - 1 - болезни 2 кусочка накопления, Печень - 2 адрено- кусочка генитальный Почки - 1 синдром и др.) кусочек Сердце - 1 кусочек Скелетные мышцы - 2 - 3 кусочка
IV. Болезни желез Щитовидная
внутренней железа - 2 секреции кусочка Пара- щитовидная железа - 2 кусочка Семенники - 2 кусочка Яичник - 2 кусочка
V. Пороки развития ЦНС
Сердечно-сосудис- Кроме той системы указанных в Органов дыхания перечне Желудочно-кишеч- обязатель-
ного тракта ного Мочеполовой количества системы кусочков Опорно-двигатель- берутся ной системы дополни- тельно 2 - 3 кусочка из порочно развитых участков
VI. Перинатальная Плацента — 4
патология - 6 кусочков (участки хориальной и базальной пластины в краевых и центральных отделах) Плодные оболочки - 1 - 2 кусочка (плацентар- ный и плод- ный концы) Спинной мозг - 2 кусочка (шейный, грудной отдел)
VII. Иммунодефи- Тимус — 1 цитные заболевания кусочек
Селезенка - 1 кусочек Лимфатичес- кие узлы - 4 кусочка (паратрахе- альные, брыжеечные, шейные, подмышечные) Костный мозг (грудина, позвонок) Групповые фолликулы подвздошной кишки - 2 кусочка Аппендикс - 1 кусочек Миндалины - 1 - 2 кусочка VIII. Болезни Измененная органов аорта - 1 кровообращения кусочек Измененные артерии - 2 кусочка IX. Болезни Костный мозг Мазки органов - 3 - 4 костного кроветворения кусочка мозга (гемобластозы, (тела апемин, позвонков, остеомиелосклероз) грудины, ребро, бедренная кость)
X. Болезни органов дыхания
Хр. пневмония и 3 - 4 Кусочки бронхоэктерическая кусочка легкого, болезнь (участок содержимое поражения на абсцесса границе с неповрежден- ной тканью, стенка абсцесса, бронхо- эктазы) Туберкулез 3 - 4 Кусочки кусочка легкого, (пораженная стенка ткань, каверны, стенка лимфати- каверны, ческие узлы непораженная ткань, регионарные лимфатичес- кие узлы Опухоли Кусочки Мазки легкого с опухоли опухолью, опухоль - 3 - 4 кусочка XI. Болезни Пораженные и Участок Мазки из органов неизмененные кишки опухоли пищеварения участки -
(неспецифический 4 — 6 язвенный колит, кусочков.
болезнь Крона, При опухолях опухоли и др.) - регионар- ные лимфати- ческие узлы - 1 - 3 XII. Болезни 5 - 7 Мазки из органов кусочков опухоли мочеполовой (корковое системы (гломеру- вещество, лонефрит, мозговое, пиэлонефрит, стенка почечнокаменная лоханки, болезнь) мочеточники, мочевой пузырь) Опухоли (чаще 3 - 4 опухоль Вильмса) кусочка из разных участков XIII. Болезни ЦНС 3 - 4 Мазки из (опухоли и др.) кусочка из опухоли разных участков XIV. Болезни 3 - 4 опорно-двигатель- кусочка из ного аппарата разных
(рахит, опухоли и участков др.)
<*> Исследование отпечатков с трахеи, бронхов и легкого методом иммунофлюоресцирующих антител даны в методических рекомендациях Н.А. Максимович и А.Г. Васиной "Экспресс диагностика острых респираторных вирусных инфекций методом флюоресцирующих антител у больных и умерших". Киев, 1977 г.
В дополнение к «Инструкции по исследованию биопсийного и цитологического материала» МЗ СССР, 1972 г. предлагаем примерный перечень и объем наиболее часто встречающихся патологических процессов в биопсийном и цитологическом материале в прозектурах детских больниц:
Патологические процессы Доставлено Количество кусочков для исследования 1 2 3 I. Воспалительные процессы острые Аппендицит Аппендикс 3 кусочка Лимфаденит Лимфатические узлы С каждого узла по 2 - 3 кусочка Отит Фрагменты костной ткани Весь материал и кусочки слизистой оболочки Остеомиэлит различной Фрагменты костной ткани Наиболее измененные локализации кусочки костной ткани, костного мозга Синусит придаточных Кусочки слизистой Весь материал пазух лицевого скелета оболочки, мелкие костные фрагменты Стафилококковая Легкое (сегмент, доля) 3 - 4 кусочка деструктивная пневмония прикорневой, субплевральный участок, наиболее измененные участки Хроническое воспаление Бронхоэктатическая Легкое (доля, сегмент, От 6 - 12 кусочков болезнь, хроническая отрезки бронхов) (прикорневые и пневмония субплевральные зоны из всех сегментов). Из 1-го - 2-х кусочков желательно приготовить Кристеллеровские срезы Туберкулез Легкое (сегмент, 3 - 4 кусочка из доля) каждого узла Лимфатические узлы 1 - 2 кусочка Почка - аспирационная Целиком биопсия Болезнь Крона Отрезки кишечника 3 - 4 кусочка Хронический гепатит Печень (пункционная Весь кусочек биопсия) Актипомикоз Кишечник 2 - 3 кусочка Сальник 2 - 3 кусочка Лимфатические узлы Каждый узел 3 - 4 кусочка Плевра 2 - 3 кусочка Легкое (сегмент, доля) 4 - 5 кусочков в зависимости от объема Эхипококк Печень (участки с 2 - 3 кусочка эхинококком) Легкое (участки с 2 - 3 кусочка эхинококком) II. Пороки развития
а. Легкое (врожденная Легкое (доля, сегмент) 4 — 6 кусочков лобарная эмфизема, поликистоз, киста легкого и др.) б. Желудочно-кишечный Отрезки кишечника 2 — 3 кусочка тракт (атрезия кишок, тонкого и толстого, удвоение кишечной меккелев дивертикул трубки, болезнь Гиршпрунга. Меккелев дивертикул Атрезия желчных протоков Печень — аспирационная Весь кусочек
биопсия в. Мочевыводящая система Отрезки мочеточников, 2 — 3 кусочка с
(стеноз мочеточников, участки лоханки с участками сужения, выше дивертикул мочевого мочеточником и ниже расположенные пузыря, удвоение, участки гидронефроз) Почка (дисплазия, Почка - аспирационная Весь кусочек поликистоз и др.) биопсия г. Половая система Яичко 2 - 3 кусочка из разных Крипторхизм участков Кисты яичника, переакрут Яичник 1 - 2 кусочка яичника д. Сосуды (варикоцеле) Отрезки вены Весь отрезок сосуда делится на несколько столбиков е. Костная система Фрагменты кости и хрящей 1 - 2 кусочка с (костно-хрящевые хрящевыми разрастаниями экзостозы) на границе с костной тканью ж. Различные Различные ткани В зависимости от эмбриональные структуры количества (добавочные органы доставленного материала урахус, остаточные 3 - 4 кусочка
эмбриональные структуры, гидатиды и др.)
III. Болезни нарушения обмена
- Энтеропатии (синдром Кишечник — аспирационная Весь материал целиком нарушения всасываемости) биопсия
- Мезенхимальные Печень — аспирациционная Весь материал целиком диспротеинозы биопсия (амилоидоз) Почки — аспирационная
биопсия
- Гликогенозы (болезнь Печень, почки — Весь материал целиком накопления) аспирационная биопсия
IV. Опухоли Кожа В зависимости от Лимфатические узлы размеров удаленной Мягкие ткани опухоли и ткани Внутренние органы материал обрабатывается (печень, почки, кишечник весь целиком или и др.) берутся кусочки 4 - 6 Эндокринные органы из различных отделов (щитовидная железа, яичники, семенники и др.) Кости скелета Опухоли, в том числе обязательно на границе здоровой ткани. Исследуются все доставленные регионарные лимфатические узлы V. Травматические повреждения Разрыв селезенки Селезенка 2 - 3 кусочка (в местах Рубцовые сужения Участок пищевода повреждения и в пищевода после ожога неизмененных участках) Травматическая ампутация Конечности 2 - 3 кусочка конечностей Другие различные Различные ткани 2 - 3 кусочка
повреждения тканей
VI. Цитологические исследования
Цитомегалия Осадок мочи Мазки 2 - 3 Диагностические Гнойное содержимое Мазки исследования Отпечатки тканей Отпечатки
(неспецифическое воспаление, грибки, туберкулез, опухоли и др.)
ПЕРЕЧЕНЬ
РЕКОМЕНДУЕМЫХ ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ И ГИСТОХИМИЧЕСКИХ МЕТОДОВ ИССЛЕДОВАНИЯ СЕКЦИОННОГО И БИОПСИЙНОГО МАТЕРИАЛА <*>
<*> Описание методик см. в Инструкции по унификации гистологических и гистохимических методов исследования биопсийного и секционного материала. МЗ СССР. М. 02.03.1976.
- Окраска гематоксилин-эозин
- Окраска пикрофуксином (Ван-Гизон)
- Комбинированная окраска пикрофуксином и фуксилином
- Окраска реактивом Шиффа
- Комбинированная окраска реактивом Шиффа и альцеановым синим (для выявления мукополисахаридов)
- Импрегнация серебром ретикулярных волокон по методу Гомори или Футу
- Окраска эластических волокон резорцин-фуксилином по Вейгерту и фуксилином по Харту
- Окраска клеток нервной ткани по Нисслю (кризил-виолетом и тионином)
- Импрегнация нервной ткани: а) выявление осевых цилиндров по Бильшевскому; б) выявление астроцитов по Ромон-Кахалю; в) выявление миэлиновых оболочек по Шпильмейеру.
- Окраска фибрина по Шуенинову
- Окраска по Перлсу (выявление железа)
- Окраска по Коссу (выявление извести)
- Окраска на жир Суданом III — IV или Суданом черным
- Окраска амилоида Конго-Красным и метил-виолетом
- Окраска альфа-нафтол-суданом по методу Гольдмана (выявление лейкоцитов в органах и тканях)
- Реакция Браше (на РНК)
- Реакция по Фельгену (на ДНК)
Методы выявления ферментов
Определение кислой фосфатазы и определение щелочной фосфатазы (при опухолях, системных заболеваниях, иммунодефицитах). Определение неспецифической эстеразы (выявление макрофагов, моноцитов).
Окраска мазков
- Метиленовый синий
- По Павловскому (метиленовым синим — основным фуксином)
- По Романовскому — Гимза
- По Паппенгейму
- Грам-Вейгерту
- Окраска фуксином Циля микобактерий туберкулеза
