«МУК 4.2.2939-11. 4.2. Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы. Порядок организации и проведения лабораторной диагностики туляремии для лабораторий территориального, регионального и федерального уровней. Методические указания» (утв. Роспотребнадзором 14.07.2011) <Письмо> Минздравсоцразвития России от 14.07.2011 N 16-4/10/2-6874 <О направлении сокращенной основной профессиональной образовательной программы среднего профессионального образования по специальности "Стоматология профилактическая" квалификация "Гигиенист стоматологический" для выпускников, имеющих среднее профессиональное медицинское образование по специальности: "Стоматология (базовый уровень)">

new_adm

11 лет назад

Документ введен в действие с 14 июля 2011 года. Текст документа

Утверждаю
Руководитель Федеральной
службы по надзору в сфере
защиты прав потребителей
и благополучия человека,
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации
Г.Г.ОНИЩЕНКО
14 июля 2011 года

Дата введения —
с момента утверждения

4.2. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ.
БИОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

ПОРЯДОК
ОРГАНИЗАЦИИ И ПРОВЕДЕНИЯ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ТУЛЯРЕМИИ ДЛЯ ЛАБОРАТОРИЙ ТЕРРИТОРИАЛЬНОГО, РЕГИОНАЛЬНОГО И ФЕДЕРАЛЬНОГО УРОВНЕЙ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
МУК 4.2.2939-11

Разработаны Федеральным казенным учреждением здравоохранения «Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб» Роспотребнадзора; Федеральным казенным учреждением здравоохранения «Иркутский научно-исследовательский противочумный институт» Роспотребнадзора; Федеральным казенным учреждением здравоохранения «Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт» Роспотребнадзора; Федеральным казенным учреждением здравоохранения «Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт» Роспотребнадзора; Федеральным казенным учреждением здравоохранения «Ростовский-на-Дону научно-исследовательский противочумный институт» Роспотребнадзора; Федеральным казенным учреждением здравоохранения «Противочумный центр» Роспотребнадзора; Федеральным бюджетным учреждением здравоохранения «Федеральный центр гигиены и эпидемиологии» Роспотребнадзора; Федеральным государственным учреждением науки «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии» Роспотребнадзора; Федеральным государственным бюджетным учреждением «ГИСК им. Л.А. Тарасевича» Минздравсоцразвития.
Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.
Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 14 июля 2011 г.
Введены в действие с 14 июля 2011 г.
Область применения

1.1. Настоящие Методические указания определяют порядок организации и проведения лабораторной диагностики туляремии для лабораторий территориального, регионального и федерального уровней, формы и методы их взаимодействия, номенклатуру и объем исследования, требования к лабораториям, специалистам и персоналу, участвующим в выполнении исследований, материально-техническому обеспечению исследований, к биологической безопасности проведения работ. 1.2. Настоящие Методические указания предназначены для специалистов бактериологических лабораторий учреждений, осуществляющих государственный санитарно-эпидемиологический надзор за туляремией в Российской Федерации, лечебно-профилактических и противочумных учреждений.

2. Нормативные ссылки

2.1. Федеральный закон от 03.03.1999 N 52-ФЗ «О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения». 2.2. Постановление Правительства Российской Федерации от 29.10.2007 N 720 «О внесении изменений в пункт 5 Положения о лицензировании деятельности, связанной с использованием возбудителей инфекционных заболеваний, утвержденного Постановлением Правительства Российской Федерации от 22.01.2007 N 31». 2.3. Постановление Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 24.02.2009 N 11 «О представлении внеочередных донесений о чрезвычайных ситуациях в области общественного здравоохранения санитарно-эпидемиологического характера» (зарегистрировано в Минюсте Российской Федерации 10.04.2009 N 13745). 2.4. Приказ Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации от 07.07.2009 N 415н «Об утверждении квалификационных требований к специалистам с высшим и послевузовским медицинским и фармацевтическим образованием в сфере здравоохранения» (зарегистрирован в Минюсте Российской Федерации 09.07.2009 N 14292). 2.5. Приказ Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека от 17.03.2008 N 88 «О мерах по совершенствованию мониторинга за возбудителями инфекционных и паразитарных болезней». 2.6. СП 1.2.036-95 «Порядок учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I — IV групп патогенности» (утв. Постановлением Госкомсанэпиднадзора Российской Федерации от 28.08.1995 N 14). 2.7. СП 3.1.7.2642-10 «Профилактика туляремии» (утв. Постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 31.05.2010 N 61 «Об утверждении СП 3.1.7.2642-10″. Зарегистрировано в Минюсте РФ 07.07.2010 N 7745). 2.8. СП 1.3.1285-03 «Безопасность работы с микроорганизмами I — II групп патогенности (опасности)» (утв. Постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 15.04.2003 N 42 «О введении в действие санитарно-эпидемиологических правил СП 1.3.1285-03». Зарегистрировано в Минюсте Российской Федерации 15.05.2003 N 4545).

Примечание.
В официальном тексте документа, видимо, допущена опечатка: «Порядок выдачи санитарно-эпидемиологического заключения о возможности проведения работ с возбудителями инфекционной заболеваемости человека I-IV групп патогенности (опасности), генно-инженерно-модифицированными микроорганизмами, ядами биологического происхождения и гельминтами» имеет номер СП 1.2.1318-03, а не СП 1.3.1318-03.

2.9. СП 1.3.1318-03 «Порядок выдачи санитарно-эпидемиологического заключения о возможности проведения работ с возбудителями инфекционных заболеваний человека I — IV групп патогенности (опасности), генно-инженерно-модифицированными микроорганизмами, ядами биологического происхождения и гельминтами» (утв. Постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 30.04.2003 N 85 «О введении в действие санитарно-эпидемиологических правил СП 1.2.1318-03». Зарегистрировано в Минюсте Российской Федерации 19.05.2003 N 4558). 2.10. СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III — IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней» (утв. Постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 28.01.2008 N 4 «Об утверждении санитарно-эпидемиологических правил СП 1.3.2322-08». Зарегистрировано в Минюсте Российской Федерации 21.02.2008 N 11197). 2.11. СП 1.3.2518-09 «Безопасность работы с микроорганизмами III — IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней». Дополнения и изменения 1 к СП 1.3.2322-08″ (утв. Постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 02.06.2009 N 42. Зарегистрировано в Минюсте Российской Федерации 08.07.2009 N 14280). 2.12. СП 3.4.2318-08 «Санитарная охрана территории Российской Федерации» (утв. Постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 22.01.2008 N 3 «Об утверждении санитарно-эпидемиологических правил СП 3.4.2318-08». Зарегистрировано в Минюсте Российской Федерации 03.04.2008 N 11459). 2.13. СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами» (утв. Постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 09.12.2010 N 163. Зарегистрировано в Минюсте Российской Федерации 17.02.2011 N 19871). 2.14. СанПиН 2.1.3.2630-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к организациям, осуществляющим медицинскую деятельность» (утв. Постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 18.05.2010 N 58. Зарегистрировано в Минюсте Российской Федерации 09.08.2010 N 18094). 2.15. Санитарные правила по устройству, оборудованию и содержанию экспериментально-биологических клиник (вивариев) (утв. главным государственным санитарным врачом СССР от 06.04.73 N 1045-73). 2.16. МУ 3.1.2007-05 «Эпидемиологический надзор за туляремией». 2.17. МУ 3.3.2.2124-06 «Контроль диагностических питательных сред по биологическим показателям для возбудителей чумы, холеры, сибирской язвы, туляремии». 2.18. МУК 4.2.2316-08 «Методы контроля бактериологических питательных сред». 2.19. МУ 1.3.2569-09 «Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I — IV групп патогенности». 2.20. МУ 4.2.2495-09 «Определение чувствительности возбудителей опасных бактериальных инфекций (чумы, сибирской язвы, холеры, туляремии, бруцеллеза, сапа и мелиоидоза) к антибактериальным препаратам».

3. Перечень сокращений

ЛПС — липополисахарид
ЛПУ — лечебно-профилактическое учреждение ООИ — особо опасные инфекции
СП — санитарно-эпидемиологические правила СанПиН — санитарно-эпидемиологические правила и нормативы МУ — методические указания
ПБА — патогенный биологический агент
МФА — метод флуоресцирующих антител
ИФА — иммуноферментный анализ
ПЦР — полимеразная цепная реакция
РА — реакция агглютинации
РнГА — реакция непрямой гемагглютинации РТНГА — реакции торможения непрямой гемагглютинации РНАт — реакция нейтрализации антител
МИС — магноиммуносорбенты
РЛА — реакция латекс-агглютинации
ИХ — иммунохроматография
ИХ-тест — иммунохроматографический тест

4. Общие положения

Характеристика болезни и возбудителя туляремии Туляремия — зоонозная системная природно-очаговая бактериальная инфекционная болезнь, характеризующаяся симптомами общей интоксикации, лихорадкой, воспалительными изменениями в области ворот инфекции, регионарным лимфаденитом, склонностью к затяжному течению. Основными резервуарами и источниками возбудителя туляремии в естественных условиях являются дикие животные (около 50 видов), главным образом различные виды грызунов, и зайцы. На территории природных очагов туляремии могут заражаться овцы, свиньи, крупный рогатый скот. Резервуаром и переносчиками возбудителя являются также кровососущие членистоногие: иксодовые и гамазовые клещи, комары, слепни, блохи. Больной человек эпидемиологической опасности не представляет. Как и для всех зоонозов, для туляремии характерна множественность механизмов (аспирационный, контактный, фекально-оральный, трансмиссивный), а также путей и факторов передачи. В соответствии с Международной статистической классификацией болезней и проблем, связанных со здоровьем (Десятый пересмотр. Женева, 2003 (МКБ-10)), и по локализации основного патологического процесса различают следующие формы туляремии: — A21.0 — ульцерогландулярную (язвенно-бубонную); — A21.1 — окулогландулярную (глазо-бубонную); — A21.2 — легочную;
— A21.3 — желудочно-кишечную (абдоминальную); — A21.7 — генерализованную;
— A21.8 — другие формы туляремии (ангинозно-бубонную); — A21.9 — туляремия неуточненная.

Возбудитель туляремии относится к гамма-подклассу протобактерий, семейству Francisellaceae, роду Francisella. В настоящее время род Francisella представлен тремя видами: Francisella tularensis, Francisella philomiragia и Francisella hispaniensis. Внутри вида Francisella tularensis выделяют 4 подвида (subspecies): tularensis (синоним — nearctica), holarctica, mediasiatica и novicida. Голарктический подвид имеет три

R S
биовара: japonica, Ery и Ery .
Туляремийный микроб представляет собой мелкие кокковидные (до эллипсовидных) плеоморфные грамотрицательные палочки, окруженные слизистым (капсульным) веществом, неподвижные, не образующие спор. Факультативный анаэроб, но оптимальный рост наблюдается только в аэробных условиях. Температурный оптимум 36 — 37 °С, оптимум pH 6,8 — 7,4. Факультативный внутриклеточный паразит. Бактерии культивируют на сложных агаровых или желточных средах с добавлением тканевых экстрактов, цистеина, кроличьей дефибринированной крови и других питательных веществ. Включение в питательную среду некоторых антибиотиков (полимиксина B или пенициллина) подавляет рост других микроорганизмов. Возбудитель туляремии не растет на простых питательных средах (мясопептонном агаре и бульоне), что служит одним из признаков при идентификации культуры. На плотных средах образует мелкие S-колонии молочно-белого цвета с голубоватым отливом, круглые, с ровным краем, выпуклые и блестящие. На жидких средах размножается хуже и только у поверхности среды, что связано с аэрофильностью бактерий. Хорошо культивируется в желточном мешке куриного эмбриона. Возбудитель туляремии обладает слабой биохимической активностью. Имеет ферменты: каталазу, глутаминазу, аспарагиназу, дез- и трансаминазу, цитруллинуреидазу. Индол не образует. Образует сероводород. Ферментирует до кислоты глюкозу, мальтозу, левулозу и маннозу. На средах Гисса не растет, при необходимости дифференциации подвидов туляремийного микроба определяют ферментативную активность в отношении глицерина, наличие цитруллинуреидазной, фосфатазной и пенициллиназной активности, чувствительность к эритромицину, вирулентность для кроликов, наличие видо- и подвидспецифических генетических маркеров с помощью ПЦР, наличие SNP, специфичного для подвидов и биоваров. Структура и антигенная специфичность ЛПС бактерий F.tularensis трех основных подвидов идентична. ЛПС туляремийного микроба является основным иммунодоминантным антигеном и мишенью специфического антительного ответа макроорганизма на возбудителя. Именно на выявлении специфических туляремийных антител против эпитопов ЛПС основана серологическая диагностика туляремии у человека и животных. Геном туляремийного микроба представлен молекулой ДНК, размер которой около 1830 т.п.н. У большинства Francisella spp. не обнаружены собственные фаги и плазмиды. Исключение составляет только F.novicida, у которой обнаружена мелкая критическая плазмида pFN. На хромосоме туляремийного микроба располагается остров патогенности FPI (от англ. — pathogenicity island of F.tularensis) размером 30 т.п.н. В его состав входят оперон iglABCD, отвечающий за синтез белков, играющих решающую роль в персистенции возбудителя в макрофагах, и оперон pdp ABC (от англ. — pathogenicity determinant protein), продукты которого необходимы туляремийному микробу для проявления патогенных свойств. Генетическая вариабельность подвидов и отдельных штаммов туляремийного микроба связана с наличием областей дифференциации RD, с вариабельными тандемными повторами (VNTR) и полиморфизмом единичных нуклеотидов (SNP). Установлено, что VNTR- и SNP-типы F.tularensis имеют связь с географическим происхождением штаммов. При выраженной общей резистентности при низких температурах окружающей среды возбудитель туляремии весьма чувствителен к различным физическим (солнечные, ультрафиолетовые лучи, ионизирующая радиация, высокая температура) и химическим воздействиям. Возбудитель туляремии чувствителен к аминогликозидам (стрептомицину, гентамицину, канамицину), тетрациклинам, хлорамфениколу и хинонам, но резистентен к пенициллинам, цефалоспоринам и полимиксину. Для всех штаммов туляремийного микроба выявлена бета-лактамазная активность, за исключением культур F.tularensis подвида mediasiatica.

5. Порядок организации и проведения лабораторной диагностики туляремии для лабораторий территориального уровня

5.1. Порядок организации и проведения лабораторной диагностики туляремии для бактериологических лабораторий лечебно-профилактических учреждений

5.1.1. Требования к лабораториям лечебно-профилактических учреждений, осуществляющим исследования на туляремию Наличие разрешительных и регламентирующих работу документов Лечебно-профилактические учреждения, лаборатории которых осуществляют диагностические исследования на туляремию, должны иметь лицензию на осуществление деятельности, связанной с использованием возбудителей III — IV групп патогенности (опасности). Лаборатории ЛПУ должны иметь санитарно-эпидемиологическое заключение о возможности проведения работ с микроорганизмами III — IV групп патогенности (опасности) в соответствии с действующими СП о порядке выдачи санитарно-эпидемиологического заключения о возможности проведения работ с возбудителями инфекционных заболеваний человека I — IV групп патогенности (опасности), генно-инженерно-модифицированными микроорганизмами, ядами биологического происхождения и гельминтами. Учет, хранение, передача и транспортирование выделенных культур холерных вибрионов (подозрительных) должны осуществляться в соответствии с действующими нормативными документами о порядке учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I — IV групп патогенности. Утилизация отходов должна осуществляться в соответствии с действующими санитарно-эпидемиологическими требованиями к обращению с медицинскими отходами. Проведение исследований на всех этапах — отбор проб, их хранение, доставка в лабораторию, регистрация, порядок исследования, выдача результатов, взаимодействие с учреждениями Роспотребнадзора — должно соответствовать требованиям действующих нормативных и распорядительных документов. Требования к специалистам и персоналу, участвующим в выполнении исследований на туляремию Исследования на туляремию могут выполнять специалисты не моложе 18 лет с высшим и средним медицинским, биологическим образованием, окончившие курсы подготовки по специальности «Бактериология» с освоением методов безопасной работы с возбудителями инфекционных болезней III — IV групп патогенности (опасности), имеющие допуск к работе с ПБА III — IV групп патогенности на основании приказа руководителя учреждения. Специалисты, проводящие диагностические исследования на туляремию, должны иметь необходимые профессиональные навыки в соответствии с номенклатурой проводимых исследований (Прилож. 8). Специалисты, осуществляющие деятельность, связанную с использованием возбудителей инфекционных болезней, должны повышать квалификацию не реже одного раза в пять лет и иметь сертификат специалиста. Требования к обеспечению безопасности работы персонала Каждая лаборатория, выполняющая исследования на туляремию, должна иметь пакет документов, определяющих режим безопасной работы сотрудников с учетом характера работ, особенностей технологии, свойств микроорганизмов. Документы должны быть согласованы с комиссией по контролю соблюдения требований биологической безопасности, специалистами по охране труда, противопожарным мероприятиям и утверждены руководителем учреждения. Результаты проверок знаний правил техники безопасности персонала при проведении работ фиксируются в специальном журнале. Все сотрудники должны выполнять требования по обеспечению безопасности работы с материалом, подозрительным или зараженным возбудителями инфекционных болезней III — IV групп патогенности (опасности), в соответствии с действующими нормативными документами. Порядок организации внутреннего контроля качества лабораторных исследований Контроль качества диагностических исследований на туляремию в лабораториях ЛПУ включает: — контроль качества диагностических препаратов и тест-систем, дистиллированной воды, химических реактивов и дезинфицирующих средств; — своевременную поверку средств измерений, аттестацию испытательного оборудования; — контроль качества стерилизации лабораторной посуды; — контроль работы паровых и суховоздушных стерилизаторов; — контроль работы бактерицидных ламп;
— контроль температурного режима холодильников; — контроль температурного режима термостатов; — проверку состояния воздуха производственных помещений и боксов, температурного режима, влажности; — проверку санитарного состояния помещений, включая условия уборки, дезинфекции, контроль смывов с поверхностей и оборудования. Результаты контроля фиксируют в специальных журналах. Правила ведения документации
Ведение лабораторной документации, включая регистрационные и рабочие журналы, осуществляют в соответствии с требованиями действующих нормативно-методических документов. Требования к материальным ресурсам, необходимым для выполнения диагностических исследований на туляремию Для забора материала и проведения диагностических исследований на туляремию в бактериологических лабораториях ЛПУ должны быть в наличии: — диагностические препараты, тест-системы, зарегистрированные в установленном порядке (Прилож. 3); — химические реактивы (Прилож. 4);
— приборы, оборудование, расходные материалы (Прилож. 5, 6); — комплект медицинский (укладка универсальная для забора материала от людей и из объектов окружающей среды для исследования на особо опасные инфекционные болезни). Персонал должен быть обеспечен спецодеждой и средствами индивидуальной защиты (для отбора проб клинического материала и проведения иммуносерологических реакций). 5.1.2. Номенклатура и объем исследований В ЛПУ производят отбор клинического материала от лиц с подозрением на туляремию, больных различными формами туляремии и вакцинированных, а также секционного материала от умерших лиц. В бактериологических лабораториях ЛПУ проводят исследования сывороток крови от больных туляремией и вакцинированных против туляремии лиц иммуносерологическими и аллергологическим методами: 1) выявление антител в парных сыворотках; 2) проведение реакции лизиса лейкоцитов. Врач-инфекционист ЛПУ осуществляет оценку аллергологического статуса больных путем постановки аллергической пробы с тулярином. 5.1.3. Порядок лабораторной диагностики туляремии в лабораториях лечебно-профилактических учреждений Отбор и транспортирование проб клинического материала Материал от больных забирает медицинский персонал ЛПУ при поступлении больного, до начала лечения антибактериальными препаратами. Забор проб осуществляют два медицинских работника, один из которых врач-инфекционист или терапевт (хирург), подготовленный по вопросам диагностики особо опасных инфекций и соблюдения требований биологической безопасности при работе с клиническим материалом, подозрительным на содержание возбудителей инфекционных болезней I — II групп патогенности. Материал от вакцинированных лиц забирает медицинский персонал ЛПУ. Секционный материал забирают медицинские работники патологоанатомических отделений (или БСМЭ) в присутствии специалиста по особо опасным инфекциям, руководствуясь действующими методическими указаниями по организации и проведению первичных противоэпидемических мероприятий в случаях выявления больного (трупа), подозрительного на заболевания инфекционными болезнями, вызывающими чрезвычайные ситуации в области санитарно-эпидемиологического благополучия населения, с соблюдением регламентированных требований биологической безопасности при работе с патогенными биологическими агентами I — II групп. Для направления в бактериологические лаборатории учреждений Роспотребнадзора забирают: — от больных людей в зависимости от клинической формы болезни: содержимое бубона, материал из зева, с конъюнктивы глаза, отделяемое язвы, мокроту, кровь; — от умерших людей: увеличенные лимфатические узлы, измененные участки легких и селезенки, трахеи; — от вакцинированных людей: кровь.
Забор проб всех видов материала осуществляют в стерильную стеклянную или пластиковую посуду, соответствующую объему проб. Пунктат из бубона берут до 14 — 20 суток болезни шприцем емкостью не менее 5 мл. Кожу на участке, намеченном для прокола, обрабатывают 70%-м спиртом, а затем смазывают 5%-м раствором йода и вновь протирают 70%-м спиртом. Иглу вводят с таким расчетом, чтобы ее острие достигло центральной части бубона, после чего, оттянув до отказа поршень, медленно вынимают иглу. Содержимое переносят в стерильную пробирку с завинчивающейся пробкой. Можно перед взятием материала ввести в бубон 0,3 — 0,5 мл стерильного 0,9%-го раствора натрия хлорида и затем отобрать содержимое. При вскрывшемся бубоне забирают материал отдельно из периферической плотной части и отделяемое свища. Перед взятием отделяемого язвы, папулы, везикулы или отторгнутого струпа прединъекционной дезинфицирующей салфеткой осторожно очищают кожу вокруг пораженного места, при необходимости стерильной марлевой салфеткой удаляют некротические массы, гной. Прокатывая тампон по раневой поверхности от центра к периферии в течение 5 — 10 с абсорбируют материал на тампон. Тампон с материалом помещают в пробирку или транспортную среду. При использовании шприца иглу вводят у края везикулы (пустулы) и затем продвигают к середине. У язв пунктируют плотный край. Мокроту собирают в специальные широкогорлые контейнеры с завинчивающейся крышкой. Отделяемое слизистой зева забирают натощак или через 3 — 4 ч после еды. Аккуратно прижимая язык шпателем, вводят тампон между дужками миндалин и язычком (нельзя касаться тампоном губ, щек, языка) и собирают материал с задней поверхности глотки, миндалин и участков воспаления или изъязвления слизистой. Тампон с материалом помещают в стерильную пробирку или в пробирку с транспортной или питательной средой. Кровь для исследований берут с соблюдением правил асептики и мер индивидуальной защиты. Кровь забирают из локтевой вены в количестве 10 — 20 мл одноразовым шприцем и переносят в пробирку для посева на питательные среды и заражения биопробных животных, в пробирку с антикоагулянтом (4%-й раствор натрия цитрата в отношении 1:10 к объему крови или 6%-й раствор ЭДТА в отношении 1:20 к объему крови) для ПЦР-анализа, в пробирку для получения сыворотки для иммуносерологических реакций. Для постановки кровяно-капельной реакции агглютинации и реакции лейкоцитолиза кровь берут из пальца. Отделяемое конъюнктивы глаза следует забирать до 17 суток болезни с помощью стерильного тампона, предварительно увлажненного 0,9%-ным раствором натрия хлорида. Пробы из каждого глаза собирают отдельными тампонами двумя-тремя круговыми движениями по слизистой оболочке глаза. Тампон с материалом помещают в стерильную пробирку или транспортную среду. При наличии обильного гнойного отделяемого стерильным сухим ватным тампоном берут гной с внутренней поверхности нижнего века движением к внутреннему углу глазной щели. Необходимо следить, чтобы ресницы не касались тампона (придерживать веко рукой). Доставка материала в лабораторию в течение 1 ч, если используются специальные транспортные среды — в течение суток. Емкости с пробами маркируют, обрабатывают снаружи дезинфицирующим раствором, упаковывают в полиэтиленовый пакет с застежкой-молнией и помещают в контейнер для транспортирования биологического материала на исследование. Контейнер с упакованным материалом опечатывают и отправляют в лабораторию с нарочным на специально выделенном транспорте. Поверхность стола после упаковки проб обрабатывают дезинфицирующим раствором. На доставляемые в лабораторию пробы заполняют направление (Прилож. 1), в котором указывают: адрес учреждения, в которое направляется проба (пробы); фамилию, имя, отчество больного (умершего); пол, возраст, место жительства, дату заболевания, дату обращения за медицинской помощью, дату госпитализации, предварительный диагноз; особенности эпидемиологического анамнеза; проводилась ли больному до взятия материала антибактериальная терапия (когда, какие использовались препараты, в какой дозе); вид материала, взятого для бактериологического исследования; цель исследования; дату и час забора материала; адрес, по которому следует сообщить результаты бактериологического исследования; наименование учреждения, должность, фамилию и инициалы лица, направляющего пробу (пробы), подпись; время доставки пробы; должность, фамилию и инициалы принявшего пробы. Материал транспортируют в лабораторию в сумке-холодильнике. В случае отсутствия условий для хранения материала на холоде время от момента взятия материала до начала исследования не должно превышать 5 — 6 ч. Порядок исследования клинического материала Постановку и учет иммуносерологических реакций проводят в бактериологической лаборатории ЛПУ в соответствии с инструкциями по применению диагностических препаратов. В динамике заболевания исследуют парные сыворотки с интервалом 7 — 10 дней. Диагностически достоверным является 4-кратное и более увеличение титра антител. Гиперчувствительность у больных и вакцинированных лиц определяют in vitro в реакции лейкоцитолиза в соответствии с действующими методическими указаниями по эпидемиологическому надзору за туляремией. Постановку и учет результатов аллергической пробы с тулярином (аллерген туляремийный жидкий, суспензия для накожного скарификационного нанесения) у лиц, зараженных или подозрительных на зараженность туляремией, осуществляет врач-инфекционист ЛПУ в соответствии с инструкцией по применению препарата. Следует помнить, что аллергическая проба остается положительной у лиц, переболевших туляремией. 5.1.4. Оформление результатов исследования Регистрацию результатов серологического и аллергического исследования сывороток на туляремию в бактериологических лабораториях ЛПУ осуществляют в соответствии с учетными формами, установленными в учреждении. Выдача ответов для историй болезней — по унифицированным формам. 5.1.5. Порядок взаимодействия лечебно-профилактических учреждений с организациями Роспотребнадзора Информацию о положительных результатах серологического исследования на туляремию направляют в установленном порядке в соответствии с требованиями действующей нормативной документации. Материал для бактериологических исследований на туляремию направляют в лабораторию особо опасных инфекций ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъекте Российской Федерации. При ее отсутствии материал направляют в Региональный центр по мониторингу за возбудителями инфекционных и паразитарных болезней II — IV групп патогенности, Региональный центр по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I — II групп патогенности или Центр индикации и диагностики опасных инфекционных болезней (по согласованию). Если лаборатория ЛПУ не выполняет серологические исследования на туляремию, материал, подлежащий исследованию, направляют в филиал ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъекте Российской Федерации или в ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъекте Российской Федерации. Передачу и транспортирование осуществляют в соответствии с действующими СП по порядку учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I — IV групп патогенности (опасности).

5.2. Порядок организации и проведения лабораторной диагностики туляремии для филиалов ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в муниципальном образовании (городе и административных районах субъекта, объединенных по территориальному признаку) в субъекте Российской Федерации

5.2.1. Требования к лабораториям филиалов ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в муниципальном образовании в субъекте Российской Федерации, осуществляющим исследования на туляремию Наличие разрешительных и регламентирующих работу документов ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъекте Российской Федерации, на базе филиалов которого функционируют бактериологические лаборатории, должен иметь лицензию на осуществление деятельности, связанной с использованием возбудителей II — IV (или III — IV) групп патогенности (опасности). Лаборатории филиалов ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в муниципальном образовании в субъекте Российской Федерации, выполняющие исследования на туляремию, должны иметь санитарно-эпидемиологическое заключение о возможности проведения работ с микроорганизмами III — IV групп патогенности (опасности) в соответствии с действующими СП о порядке выдачи санитарно-эпидемиологического заключения о возможности проведения работ с возбудителями инфекционных болезней человека I — IV групп патогенности (опасности), генно-инженерно-модифицированными микроорганизмами, ядами биологического происхождения и гельминтами. Лаборатории филиалов ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в муниципальном образовании в субъекте Российской Федерации должны быть аккредитованы на техническую компетентность в установленном порядке в соответствии с действующей законодательной базой Российской Федерации. Учет, хранение, передача и транспортирование проб клинического материала должны осуществляться в соответствии с действующими СП о порядке учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I — IV групп патогенности. Утилизация отходов должна осуществляться в соответствии с действующими санитарно-эпидемиологическими требованиями к обращению с медицинскими отходами. Проведение исследований на всех этапах: отбор проб, их хранение, доставка в лабораторию, регистрация, порядок исследования, выдача результатов, взаимодействие с организациями Роспотребнадзора должны соответствовать требованиям действующих нормативных документов. Требования к специалистам и персоналу, участвующим в выполнении исследований на туляремию Исследования на туляремию могут выполнять специалисты не моложе 18 лет с высшим и средним медицинским, биологическим образованием, окончившие курсы подготовки по специальности «Бактериология» с освоением методов безопасной работы с возбудителями инфекционных болезней III — IV групп патогенности (опасности), имеющие допуск к работе с ПБА III — IV групп на основании приказа руководителя учреждения. Специалисты, проводящие диагностические исследования на туляремию, должны иметь необходимые профессиональные навыки в соответствии с номенклатурой проводимых исследований (Прилож. 8). Специалисты, осуществляющие деятельность, связанную с использованием возбудителей инфекционных болезней, должны иметь сертификат специалиста и повышать квалификацию не реже одного раза в пять лет. Требования к обеспечению безопасности работы персонала Каждая лаборатория, выполняющая исследования на туляремию, должна иметь пакет документов, определяющих режим безопасной работы сотрудников с учетом характера работ, особенностей технологии, свойств микроорганизмов. Документы должны быть согласованы с комиссией по контролю соблюдения требований биологической безопасности, специалистами по охране труда, противопожарным мероприятиям и утверждены руководителем учреждения. Результаты проверок знаний правил техники безопасности персонала при проведении работ фиксируются в специальном журнале. Все сотрудники должны выполнять требования по обеспечению безопасности работы с материалом, подозрительным или зараженным возбудителями инфекционных болезней III — IV групп патогенности (опасности), в соответствии с действующими нормативными документами. Сотрудники учреждения, привлекаемые к эпизоотологическому обследованию энзоотичной территории, должны быть вакцинированы против туляремии с последующим контролем уровня иммунитета и регистрацией результатов в специальном журнале. Порядок организации внутреннего контроля качества лабораторных исследований Контроль качества диагностических исследований на туляремию в лабораториях включает: — контроль качества диагностических препаратов и тест-систем, дистиллированной воды, химических реактивов и дезинфицирующих средств; — своевременную поверку средств измерений, аттестацию испытательного оборудования; — контроль качества стерилизации лабораторной посуды; — контроль работы паровых и суховоздушных стерилизаторов; — контроль работы бактерицидных ламп;
— контроль температурного режима холодильников; — контроль температурного режима термостатов; — проверку состояния воздуха производственных помещений и боксов, температурного режима, влажности; — проверку санитарного состояния помещений, включая условия уборки, дезинфекции, контроль смывов с поверхностей и оборудования. Результаты контроля фиксируют в специальных журналах. Правила ведения документации
Ведение лабораторной документации, включая регистрационные и рабочие журналы, осуществляют в соответствии с требованиями действующих нормативно-методических документов. Требования к материальным ресурсам, необходимым для выполнения диагностических исследований на туляремию Для проведения диагностических исследований на туляремию в бактериологических лабораториях филиалов ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» должны быть в наличии: — диагностические препараты, тест-системы, зарегистрированные в установленном порядке (Прилож. 3); — химические реактивы (Прилож. 4);
— приборы, оборудование, расходные материалы (Прилож. 5, 6). Рекомендуется для забора материала иметь комплект медицинский (укладку универсальную для забора материала от людей и из объектов окружающей среды для исследования на особо опасные инфекционные болезни). Персонал должен быть обеспечен спецодеждой и средствами индивидуальной защиты. 5.2.2. Номенклатура и объем исследований Лаборатории филиалов ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в муниципальных образованиях в субъекте Российской Федерации при осуществлении эпидемиологического надзора проводят контроль состояния противотуляремийного иммунитета у вакцинированных людей. Исследования осуществляют в следующем объеме: 1) выявление антител;
2) постановка реакции лизиса лейкоцитов. Если лаборатория ЛПУ не выполняет серологические исследования на туляремию, сыворотку больных или с подозрением на это заболевание исследуют в филиале ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъекте Российской Федерации (по договоренности). 5.2.3. Порядок лабораторной диагностики туляремии в лабораториях филиалов ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в муниципальном образовании в субъекте Российской Федерации Состояние иммунитета у вакцинированных проверяют через 5 лет после вакцинации и в последующем — 1 раз в 2 года. Контроль состояния противотуляремийного иммунитета осуществляют с помощью аллергологического (реакция лейкоцитолиза) или одного из серологических методов исследования (РА, реакция объемной агломерации, РнГА, ИФА). При этом предпочтительнее использовать серологические методы исследования. Материалом для исследования являются кровь и сыворотка крови вакцинированного. При необходимости можно использовать кровяно-капельную реакцию, которая позволяет выдать ответ в течение 5 мин. и может быть поставлена с сухой каплей крови. От больных или лиц с подозрением на туляремию в динамике заболевания исследуют парные сыворотки с интервалом 7 — 10 дней. Диагностически достоверным является 4-кратное и более увеличение титра антител. Гиперчувствительность у вакцинированных и больных лиц определяют in vitro в реакции лейкоцитолиза в соответствии с действующими методическими указаниями по эпидемиологическому надзору за туляремией. 5.2.4. Оформление результатов исследования Регистрацию результатов исследований в лабораториях филиалов ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в муниципальном образовании в субъекте Российской Федерации осуществляют в соответствии с учетными формами, установленными в учреждении. Выдача ответов — по унифицированным формам. 5.2.5. Порядок взаимодействия филиалов ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в муниципальном образовании в субъекте Российской Федерации с другими организациями Роспотребнадзора Информация о результатах лабораторной диагностики туляремии в лаборатории филиала ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в субъекте Российской Федерации» передается в соответствии с действующими нормативными документами.

5.3. Порядок организации и проведения
лабораторной диагностики туляремии для ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъекте Российской Федерации

5.3.1. Порядок организации и проведения лабораторной диагностики туляремии для ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъекте Российской Федерации, в структуре которых отсутствуют отделы и лаборатории особо опасных инфекций Порядок организации и проведения лабораторной диагностики туляремии для лабораторий ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъектах Российской Федерации, в структуре которых отсутствуют отделы или лаборатории особо опасных инфекций, соответствует порядку организации и проведения лабораторной диагностики туляремии для лабораторий филиалов ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъекте Российской Федерации (раздел 5.2). 5.3.2. Порядок организации и проведения лабораторной диагностики туляремии для лабораторий особо опасных инфекций ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъекте Российской Федерации 5.3.2.1. Требования к лабораториям особо опасных инфекций ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъекте Российской Федерации, осуществляющим исследования на туляремию. Наличие разрешительных и регламентирующих работу документов ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъекте Российской Федерации, на базе которых функционируют лаборатории особо опасных инфекций, выполняющие исследования на туляремию, должны иметь лицензию на осуществление деятельности, связанной с использованием возбудителей II — IV групп патогенности (опасности). Лаборатории ООИ ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъекте Российской Федерации, осуществляющие исследования на туляремию, должны иметь санитарно-эпидемиологическое заключение о возможности проведения работ с микроорганизмами II — IV групп патогенности (опасности) в соответствии с действующими СП о порядке выдачи санитарно-эпидемиологического заключения о возможности проведения работ с возбудителями инфекционных болезней человека I — IV групп патогенности (опасности), генно-инженерно-модифицированными микроорганизмами, ядами биологического происхождения и гельминтами. Лаборатории ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъекте Российской Федерации должны быть аккредитованы на техническую компетентность в установленном порядке в соответствии с действующей законодательной базой Российской Федерации. Учет, хранение, передача и транспортирование выделенных подозрительных культур возбудителя туляремии и/или проб клинического материала должны осуществляться в соответствии с действующими СП о порядке учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I — IV групп патогенности. Утилизация отходов должна осуществляться в соответствии с регламентированными санитарно-эпидемиологическими требованиями к обращению с медицинскими отходами. Проведение исследований на всех этапах: отбор проб, их хранение, доставка в лабораторию, регистрация, порядок исследования, выдача результатов, взаимодействие с организациями Роспотребнадзора должны соответствовать требованиям действующих нормативных документов. Требования к специалистам и персоналу, участвующим в выполнении исследований на туляремию Исследования на туляремию могут выполнять специалисты не моложе 18 лет с высшим и средним медицинским, биологическим образованием, окончившие курсы подготовки по специальности «Бактериология» с основами безопасной работы с патогенными биологическими агентами (ПБА) I — II групп, имеющие допуск к работе с ПБА II — IV групп на основании приказа руководителя учреждения. Специалисты, проводящие исследования на туляремию, должны иметь необходимые профессиональные навыки (Прилож. 8). Специалисты, осуществляющие деятельность, связанную с использованием возбудителей инфекционных болезней, должны иметь сертификаты и повышать квалификацию не реже одного раза в пять лет. Требования к обеспечению безопасности работы персонала Каждая лаборатория, осуществляющая исследования на туляремию, должна иметь пакет документов, определяющих режим безопасной работы сотрудников с учетом характера работ, особенностей технологии, свойств микроорганизмов. Документы должны быть согласованы с комиссией по контролю соблюдения требований биологической безопасности, специалистами по охране труда, противопожарным мероприятиям и утверждены руководителем учреждения. Результаты проверок знаний правил техники безопасности персонала при проведении работ фиксируются в специальном журнале. Специалисты, осуществляющие эпизоотологическое обследование энзоотичной по туляремии территории и его лабораторное обеспечение, должны быть вакцинированы против туляремии с последующим контролем уровня иммунитета и регистрацией результатов в специальном журнале. Все сотрудники должны выполнять требования по обеспечению безопасности работы с материалом, подозрительным или зараженным возбудителями инфекционных болезней I — II групп патогенности (опасности), в соответствии с действующими нормативными документами. Порядок организации внутреннего контроля качества лабораторных исследований Контроль качества диагностических исследований на туляремию в лабораториях ООИ ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» включает: — контроль качества питательных сред, диагностических препаратов и тест-систем, дисков с антибактериальными препаратами, дистиллированной воды, химических реактивов и дезинфицирующих средств; — своевременную поверку средств измерений, аттестацию испытательного оборудования; — контроль качества стерилизации лабораторной посуды; — контроль работы паровых и суховоздушных стерилизаторов; — контроль работы бактерицидных ламп;
— контроль температурного режима холодильников; — контроль температурного режима термостатов; — проверку состояния воздуха производственных помещений и боксов, температурного режима, влажности; — проверку санитарного состояния помещений, включая условия уборки, дезинфекции, контроль смывов с поверхностей и оборудования. Результаты контроля фиксируют в специальных журналах. Правила ведения документации
Ведение лабораторной документации, включая регистрационные и рабочие журналы, осуществляют ежедневно в соответствии с требованиями действующих методических документов. Требования к материальным ресурсам, необходимым для выполнения диагностических исследований на туляремию Для проведения диагностических исследований на туляремию в лабораториях должны быть в наличии: — питательные среды, зарегистрированные в установленном порядке (Прилож. 2); — диагностические препараты, тест-системы, антибактериальные препараты, зарегистрированные в установленном порядке (Прилож. 3, 7); — химические реактивы (Прилож. 4);
— приборы, оборудование, расходные материалы (Прилож. 5, 6); — комплект медицинский (укладка универсальная для забора материала от людей и из объектов окружающей среды для исследования на особо опасные инфекционные болезни). Питательные среды подлежат обязательному контролю согласно действующим методическим указаниям по контролю диагностических питательных сред по биологическим показателям (для возбудителя туляремии). 5.3.2.2. Номенклатура и объем исследований. Лаборатории ООИ ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъектах Российской Федерации проводят: — исследование материала от больных и умерших с подозрением на туляремию; — исследование материала от лиц, подлежащих обследованию на туляремию в соответствии с требованиями эпиднадзора (по согласованию); — исследование проб, собранных в ходе эпизоотологического обследования территории; — исследование проб из объектов окружающей среды; — идентификацию выделенных культур возбудителя туляремии по сокращенной схеме; — контроль качества и ингибирующих свойств питательных сред. Диагностические исследования материала осуществляют в следующем объеме: а) индикация возбудителя в нативном материале методами экспресс- и ускоренной диагностики (МФА, ПЦР, ИФА, РА, РНГА, РНАт, селективное концентрирование на МИС с последующей постановкой ИФА); б) постановка биологической пробы;
в) посев на питательные среды с целью выделения чистой культуры возбудителя; г) выявление антител к возбудителю туляремии; д) идентификация выделенной культуры по сокращенной схеме. 5.3.2.3. Порядок диагностических исследований на туляремию в лабораториях особо опасных инфекций ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъекте Российской Федерации. Порядок исследования клинического материала Отбор материала осуществляют в соответствии с п. 5.1. Для выявления возбудителя туляремии используют диагностические препараты и сложные агаровые или желточные среды с добавлением цистеина, тканевых экстрактов, дефибринированной крови, глюкозы, зарегистрированные в установленном порядке. Каждая серия агара должна быть проверена на чувствительность к росту туляремийного микроба согласно действующим нормативно-методическим документам. Для подавления роста посторонней микрофлоры используют пенициллин (100 ед./мл), ампициллин (100 ед./мл), полимиксин B (50 — 100 мкг/мл), кефзол (или цефалексин), амфотерицин B (или амфоглюкамин), ристомицина сульфат и некоторые другие антибактериальные препараты. Объекты с посевами инкубируют при температуре 37 °С. Просмотр посевов осуществляют через 24 — 48 ч (далее — ежедневно в течение 10 суток от момента посева). Подготовку проб для ПЦР осуществляют в соответствии с требованиями методических указаний по организации работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I — IV групп патогенности. Исследование материала от больного человека (трупа) I этап:
— приготовление мазков, окраска фиксированных мазков по Граму, Романовскому-Гимзе, иммуноглобулинами флюоресцирующими туляремийными; — постановка ПЦР;
— постановка иммуносерологических реакций для обнаружения антигенов и антител к возбудителю туляремии (РА, МФА, РНГА, РНАт, ИФА и др.); — постановка реакции лейкоцитолиза (кровь больного); — заражение биопробных животных (морские свинки внутрибрюшинно; белые мыши внутрибрюшинно или подкожно (кровь, пунктат бубона), подкожно (мокрота, мазок из зева, вскрывшийся бубон, отделяемое язвы, конъюнктивы)); — посев на плотные питательные среды (кровь, пунктат бубона); — посев на плотные питательные среды с ингибиторами посторонней флоры (мокрота, мазок из зева, субстрат из вскрывшегося бубона, отделяемое язвы, конъюнктивы). II этап (2 — 6 ч от начала исследования): — учет результатов МФА, ИФА, ПЦР;
— учет результатов РА, РНГА и РНАт через 18 — 24 ч; — выдача предварительного положительного ответа на основании наличия в мазках мелких кокковидных палочек грамотрицательных или сиреневого цвета при окраске по Романовскому-Гимзе, их специфического свечения при окраске мазка иммуноглобулинами флуоресцирующими туляремийными, положительного результата ПЦР, положительных иммуносерологических реакций при отрицательных контролях. III этап (48 — 72 ч от начала исследования):

просмотр посевов нативного материала на агаровых пластинках;
бактериоскопия мазков из подозрительных колоний (окраска по Граму);
постановка ИХ-теста для экспресс-идентификации туляремийного микроба с материалом из подозрительных колоний;
отсев подозрительных колоний туляремийного микроба на питательный агар для выделения чистой культуры;
выдача подтверждения предварительного положительного ответа на основании наличия характерного роста на плотных питательных средах, наличия в мазках из колоний мелких грамотрицательных кокковидных палочек, положительного ИХ-теста для экспресс-идентификации туляремийного микроба. IV этап (3 — 5-е сутки от начала исследования):
после накопления чистой культуры постановка тестов для ее идентификации. Идентификацию выделенной культуры проводят по следующим тестам: морфология клетки, характер окраски по Граму и иммуноглобулинами флуоресцирующими туляремийными; характер роста на питательных средах FT-агаре или на свернутой желточной среде Мак-Коя; отсутствие роста на простых питательных средах (мясопептонном агаре и/или бульоне); агглютинация культур специфической туляремийной сывороткой или постановка РЛА с выделенной культурой; экспресс-идентификация туляремийного микроба с использованием ИХ-теста; выявление видоспецифичных ДНК-мишеней методом ПЦР;
вскрытие павших биопробных животных, посев органов и крови на плотные питательные среды, приготовление и просмотр мазков-отпечатков органов, постановка ПЦР с суспензиями органов. V этап (5 — 15-е сутки от начала исследования):
учет результатов идентификации культур;
просмотр посевов материала от павших биопробных животных;
вскрытие и исследование забитых биопробных животных;
выдача окончательного положительного ответа проводится на основании выделения чистой культуры туляремийного микроба из посевов нативного материала, его идентификации по морфологическим, культуральным свойствам, положительных результатов иммуносерологических реакций, наличию ДНК возбудителя, а также на основании выделения идентичных культур от павших или забитых лабораторных животных. VI этап (15 — 25-е сутки от начала исследования):
выдача отрицательного ответа на основании отсутствия специфического роста на питательных средах при посеве нативного материала и органов забитых биопробных животных, отрицательных результатов ПЦР, отрицательных результатов иммуносерологических реакций с нативным материалом и суспензиями органов забитых или павших биопробных животных, отсутствия патологоанатомических изменений у последних, отсутствия в парных сыворотках больного нарастания титров специфических антител к туляремийному микробу. Запрещается давать окончательный (отрицательный или положительный) ответ на основании результатов экспресс- и ускоренной диагностики. Исследование материала от вакцинированных туляремийной вакциной Исследование проводят в соответствии с п. 5.2.3. Порядок исследования проб, собранных в ходе эпизоотологического обследования территории природного очага туляремии В ходе эпизоотологического обследования природного очага туляремии лабораторному исследованию подвергают: мелких млекопитающих или их трупы; собранных с них эктопаразитов (вшей, иксодовых, гамазовых и краснотелковых клещей, блох); подснежные гнезда грызунов; продукты жизнедеятельности мелких млекопитающих; погадки птиц; помет хищных млекопитающих; солому; мякину; талую воду и другие объекты, загрязненные выделениями грызунов; воду из естественных водоемов и колодцев; гидробионтов и др. Среди членистоногих переносчиков основное внимание уделяют иксодовым клещам. При трансмиссивных вспышках исследуют кровососущих двукрылых (комаров, москитов, слепней и др.). Кроме того, при соответствующих эпизоотологических и эпидемиологических показаниях исследуют кровь домашних животных серологическими методами. Сбор, упаковку материала для исследования, доставку его в лабораторию осуществляют в соответствии с действующими нормативными документами. Всех млекопитающих по отношению к туляремийной инфекции и их роли в эпизоотическом процессе разделяют на три группы. Первая группа. Высоковосприимчивые и высокочувствительные млекопитающие (заражаются при попадании в организм единичных микробных клеток возбудителя туляремии, остро болеют и быстро погибают с интенсивным обсеменением органов и тканей возбудителем). К этой группе относятся все виды мелких мышевидных грызунов, кроме полевой мыши, зайцеобразные и насекомоядные, за исключением ежей, куторы, выхухоли. Вторая группа. Высоковосприимчивые, но малочувствительные млекопитающие (заражаются при попадании в организм единичных микробных клеток возбудителя туляремии, болеют тяжело, но быстро освобождаются от микроба, приобретая устойчивый иммунитет). К этой группе относятся полевая мышь, все виды крыс и сусликов, белки, бурундуки, бобры, ежи, выхухоль, кутора, белозубка и некоторые другие виды млекопитающих. Третья группа. Маловосприимчивые и практически нечувствительные млекопитающие. К ним относится большинство хищных млекопитающих и сельскохозяйственных животных. Схема исследования полевого материала Лабораторное исследование полевого материала начинают сразу же после его поступления. Допускается его кратковременное хранение (не более 20 ч) при температуре от 4 до 6 °С. При вскрытии зверьков на месте сбора возможно хранение органов и доставка их в лабораторию в консерванте. Консервантами могут служить вазелино-парафиновая смесь (1 часть парафина и 10 частей вазелинового масла смешивают и стерилизуют 45 мин. прогреванием на кипящей водяной бане), 5%-ный раствор поваренной соли, кроме того, используют глубокое замораживание в жидком азоте и др. В консервантах и при низкой температуре органы животных можно сохранять в течение одного месяца. Исследование проводят биологическим, бактериоскопическими (световая и люминесцентная микроскопия), бактериологическими (посев на питательные среды, выделение чистых культур и их идентификация), молекулярно-генетическим (ПЦР-анализ) и иммуносерологическими (РА, РЛА, РНГА, РНАт, РНАг, ИФА) методами. Схема исследования материала зависит от группы чувствительности животных и от того, в каком виде доставлен материал. Мелких млекопитающих, добытых в природе орудиями лова или живыми, исследуют групповым методом, объединяя в одну пробу органы нескольких зверьков (5 — 10) одного вида и пойманных в одном месте. Для исследования отбирают кусочки селезенки, печени, лимфатические узлы, кровь или «смывы» из грудной полости. Материал исследуют биологическим, молекулярно-генетическим и иммуносерологическими методами. Суспензию органов используют для заражения биопробных животных и выявления антигенов и ДНК возбудителя туляремии. Сыворотку крови или «смывы» из грудной полости исследуют на наличие антител к возбудителю туляремии. Трупы зверьков, погибших в природе, павших в лаборатории, или животных, у которых при вскрытии обнаружены патологоанатомические изменения, характерные для туляремии, подвергают индивидуальному исследованию. Кусочки селезенки, печени, почек, лимфатические узлы, костный мозг исследуют биологическим, бактериологическим, молекулярно-генетическим и иммуносерологическими методами. В условиях установленной эпизоотии при исследовании животных первой группы можно ограничиться посевом органов на питательные среды и бактериоскопией мазков из органов, сохраняя часть их на холоде до получения результатов исследований. В сомнительных случаях прибегают к биологическому методу. Животных второй и третьей групп биологическим методом исследуют обязательно. Вероятность обнаружения возбудителя туляремии в органах животных первой группы при микроскопическом исследовании (лучше использовать люминесцентную микроскопию) значительно выше, чем при бактериоскопии мазков из органов трупов животных второй группы. Домашние животные (крупный рогатый скот, свиньи, овцы, северные олени) относятся к видам, малочувствительным к туляремии (третья группа). При их исследовании используют главным образом иммуносерологические методы (РА, РНГА, ИФА), реже — внутрикожную пробу с тулярином. Бактериологический и биологический методы применяют только при обследовании павших, забитых или больных животных. Исследуют в первую очередь лимфатические узлы и селезенку. При серологическом исследовании следует учитывать возможность обнаружения перекрестных реакций с бруцеллами и микробной флорой кишечника животных. Целесообразно исследовать сыворотки домашних животных, по крайней мере, в двух серологических реакциях. Положительные реакции в РНГА следует контролировать в РТНГА. Погадки хищных птиц и помет хищных млекопитающих рекомендуется исследовать индивидуально. Гибель туляремийного микроба в погадках и помете происходит быстро (в первые сутки; при отрицательных температурах, возможно, медленнее), в связи с чем биологическое и бактериологические исследования этого материала нецелесообразны. Пробы погадок и помета используют для поиска антигена возбудителя туляремии иммуносерологическими методами и ДНК методом ПЦР. Кровососущих насекомых и других беспозвоночных животных исследуют групповым методом, в одну пробу объединяют насекомых или беспозвоночных животных одного вида (рода) и добытых из одного места. Взрослых иксодовых клещей объединяют до 50 особей. Личинок объединяют по 100 — 200 экземпляров, нимф — по 50 — 100 в зависимости от степени их упитанности. Промывание личинок и нимф иксодовых клещей в спирте не проводят, т.к. это может повредить анализу. Блох, гамазовых клещей, вшей сортируют по видам (родам), а также по видам зверьков, с которых они были собраны, помещают в стерильные пробирки и далее подвергают обработке по той же методике, что личинок и нимф иксодовых клещей. Кровососущих двукрылых насекомых усыпляют парами эфира для ограничения подвижности. У слепней предварительно отстригают конечности и крылья, комаров и мошек исследуют целиком. В один анализ включают до 25 — 50 слепней или до 100 комаров, или до 250 мошек. Гидробионтов — ручейников, бокоплавов, дафний, циклопов и других перед исследованием промывают в нескольких порциях воды и 1 — 2 порциях стерильной дистиллированной воды. У животных, имеющих чехлики или раковинки, последние по возможности удаляют. Животных объединяют в группы по 5 — 10 — 50 экземпляров в зависимости от размеров особей отдельных видов. Обнаружение туляремийного микроба или его ДНК в организме беспозвоночных наиболее эффективно при использовании биологического метода и ПЦР. Также возможно обнаружение специфического антигена туляремийного ЛПС с помощью ИХ-теста. Пробы воды (100 — 200 мл) берут из различных водоемов: речек, ручьев, прудов, озер, болот, колодцев и т.п. Наиболее эффективно исследование воды в пойменно-болотных очагах туляремии в зимнее время. Пробы берутся в затененном месте, на глубине 10 — 20 см от поверхности стоячей или слабопроточной воды. Из каждой точки следует брать по 2 пробы. Отбирают пробы в местах обитания зверьков (возле кормовых столиков, нор, хаток бобров или ондатр). Для концентрирования возбудителя используют фильтрование, центрифугирование, магнитные сорбенты и другие приемы. Для исследования используют биологический метод (белой мыши вводят подкожно до 1 мл, а морской свинке — до 5 мл воды), молекулярно-генетический и иммуносерологические методы, направленные на выявление ДНК и антигенов возбудителя туляремии. Зерно, солому, гнездовой материал и другие субстраты (5 — 10 г) исследуют биологическим, молекулярно-генетическим и иммуносерологическими методами, направленными на выявление возбудителя туляремии, его антигенов или ДНК. Этапы исследования проб, собранных в ходе эпизоотологического обследования, соответствуют этапам исследования материала от больного человека (трупа) в зависимости от используемых методов 5.3.2.4. Оформление результатов исследования. Регистрация результатов анализа и выдача ответов в лаборатории ООИ ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъекте Российской Федерации проводится по унифицированным формам. 5.3.2.5. Порядок взаимодействия лабораторий особо опасных инфекций ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъекте Российской Федерации с организациями Роспотребнадзора. Информация о выделенных подозрительных или идентифицированных штаммах возбудителя туляремии передается в соответствии с действующей нормативной документацией и направляется в Региональный центр по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I — II групп патогенности или Центр индикации и диагностики опасных инфекционных болезней (противочумное учреждение) и в Референс-центр по мониторингу за туляремией. Штаммы возбудителя туляремии, выделенные от людей, из объектов окружающей среды и идентифицированные в лаборатории ООИ ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъекте Российской Федерации передаются в установленном порядке в Региональный центр по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I — II групп патогенности или Центр индикации и диагностики опасных инфекционных болезней (противочумное учреждение (по согласованию)). Передачу и транспортирование осуществляют в соответствии с действующими СП по порядку учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I — IV групп патогенности. Прилагаются паспорт на штамм в одном экземпляре, сопроводительное письмо, акт упаковки и акт передачи.6. Порядок организации и проведения лабораторной диагностики туляремии для лабораторий регионального уровня

6.1. Порядок организации и проведения лабораторной диагностики туляремии для лабораторий Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных и паразитарных болезней II — IV групп патогенности в федеральных округах Российской Федерации

Порядок организации и проведения лабораторной диагностики туляремии для лабораторий Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных и паразитарных болезней II — IV групп патогенности в федеральных округах Российской Федерации соответствует п. 5.3.2 «Порядок организации и проведения лабораторной диагностики туляремии для лабораторий особо опасных инфекций ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъекте Российской Федерации». 6.1.1. Порядок взаимодействия лабораторий Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных и паразитарных болезней II — IV групп патогенности в федеральных округах Российской Федерации с организациями Роспотребнадзора Информация о выделенных подозрительных или идентифицированных штаммах возбудителя туляремии передается в соответствии с действующей нормативной документацией и направляется в Региональный центр по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I — II групп патогенности или Центр индикации и диагностики опасных инфекционных болезней (противочумное учреждение) и в Референс-центр по мониторингу за туляремией. Штаммы возбудителя туляремии, выделенные от людей, из объектов окружающей среды и идентифицированные в лаборатории Регионального центра по мониторингу за возбудителями инфекционных и паразитарных болезней II — IV групп патогенности в федеральных округах Российской Федерации передаются в установленном порядке в Региональный центр по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I — II групп патогенности или Центр индикации и диагностики опасных инфекционных болезней (по согласованию). Передачу и транспортирование осуществляют в соответствии с действующими СП по порядку учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I — IV групп патогенности. Прилагаются паспорт на штамм в одном экземпляре, сопроводительное письмо, акт упаковки и акт передачи.

6.2. Порядок организации и проведения лабораторной диагностики туляремии для лабораторий Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I — II групп патогенности (противочумные учреждения)

6.2.1. Требования к лабораториям Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I — II групп патогенности Наличие разрешительных и регламентирующих работу документов Учреждения, на базе которых функционируют лаборатории Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных и паразитарных болезней I — II групп патогенности, выполняющие исследования на туляремию, должны иметь лицензию на осуществление деятельности, связанной с использованием возбудителей I — II групп патогенности (опасности). Лаборатории Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных и паразитарных болезней I — II групп патогенности, осуществляющие исследования на туляремию, должны иметь санитарно-эпидемиологическое заключение о возможности проведения работ с микроорганизмами I — II групп патогенности (опасности) в соответствии с действующими СП о порядке выдачи санитарно-эпидемиологического заключения о возможности проведения работ с возбудителями инфекционных болезней человека I — IV групп патогенности (опасности), генно-инженерно-модифицированными микроорганизмами, ядами биологического происхождения и гельминтами. Лаборатории Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I — II групп патогенности и их подразделения должны быть аккредитованы на техническую компетентность в установленном порядке в соответствии с действующей законодательной базой Российской Федерации. Учет, хранение, передача и транспортирование выделенных подозрительных культур возбудителя туляремии, утилизация отходов осуществляются в соответствии с действующими СП. Требования к специалистам и персоналу, участвующим в выполнении исследований на туляремию, требования к обеспечению безопасности работы персонала, порядок организации внутреннего контроля лабораторных исследований, правила ведения документации и требования к материальным ресурсам, необходимым для выполнения диагностических исследований на туляремию, аналогичны п. 5.3.2.1. 6.2.2. Номенклатура и объем исследований Лаборатории сезонных формирований (противоэпидемических отрядов) проводят: — исследования проб, собранных в ходе эпизоотологического обследования территории природного очага туляремии; — идентификацию выделенных культур возбудителя туляремии по сокращенной схеме. Диагностические исследования материала осуществляют в следующем объеме: а) постановка биологической пробы;
б) посев на питательные среды с целью выделения чистой культуры возбудителя туляремии; в) выявление антигенов возбудителя туляремии и антител к ним; г) идентификация выделенной культуры по следующим тестам: — морфология клеток в мазках и отношение к окраске по Граму или Романовскому-Гимзе; — характер роста на питательных средах (FT-агаре или свернутой желточной среде Мак-Коя); — отсутствие роста на простых питательных средах (мясопептонном агаре и/или бульоне); — экспресс-идентификация туляремийного микроба с использованием ИХ-теста; — агглютинация сывороткой туляремийной диагностической или постановка РЛА с выделенной культурой. Стационарные лаборатории Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I — II групп патогенности проводят: — исследования материала от больных и умерших с подозрением на туляремию (по согласованию); — исследования объектов окружающей среды (по согласованию); — исследования проб, собранных в ходе эпизоотологического обследования территории природного очага туляремии; — идентификацию культур возбудителя туляремии, выделенных на территории прикрепленных субъектов Российской Федерации; — проверку качества и ингибирующих свойств питательных сред. Диагностические исследования полевого материала осуществляют в следующем объеме: а) индикация возбудителя в нативном материале методами экспресс- и ускоренной диагностики; б) посев на питательные среды с целью выделения чистой культуры возбудителя туляремии и изучения культуральных свойств; в) постановка биологической пробы;
г) выявление антител к возбудителю туляремии; д) идентификация выделенной культуры по следующим тестам: — морфология клеток в мазках, тинкториальные свойства бактерий при окраске по Граму или Романовскому-Гимзе и МФА; — характер роста на питательных средах (FT-агаре или свернутой желточной среде Мак-Коя); — отсутствие роста на простых питательных средах (мясопептонном агаре и/или бульоне); — экспресс-идентификация туляремийного микроба с использованием ИХ-теста; — агглютинация сывороткой туляремийной диагностической или постановка РЛА с выделенной культурой; — определение вирулентности для белых мышей и морских свинок; — выявление в ПЦР видоспецифичных ДНК-мишеней; — определение чувствительности к антибактериальным препаратам диско-диффузионным методом. 6.2.3. Порядок диагностических исследований на туляремию в лабораториях противоэпидемических отрядов Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I — II групп патогенности Порядок диагностических исследований на туляремию в лабораториях противоэпидемических отрядов Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I — II групп патогенности соответствует порядку исследования проб, отобранных в ходе эпизоотологического обследования территории природного очага туляремии для лабораторий ООИ ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъекте Российской Федерации п. 5.3.2.3 (не используют ПЦР, МФА). Штаммы возбудителя туляремии, выделенные в лабораториях противоэпидемических отрядов, направляют на соответствующую противочумную станцию — Региональный центр по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I — II групп патогенности. Передачу и транспортирование осуществляют в соответствии с действующими СП по порядку учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I — IV групп патогенности. 6.2.4. Порядок диагностических исследований на туляремию в стационарных лабораториях Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I — II групп патогенности Порядок диагностических исследований на туляремию в стационарных лабораториях Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I — II групп патогенности соответствует порядку диагностических исследований на туляремию в лабораториях особо опасных инфекций ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъекте Российской Федерации п. 5.3.2.3. В схему идентификации дополнительно входят тесты по определению вирулентности для белых мышей и морских свинок и чувствительности возбудителя к антибактериальным препаратам диско-диффузионным методом. 6.2.5. Порядок взаимодействия лабораторий Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I — II групп патогенности с организациями Роспотребнадзора Информация о выделенных и/или идентифицированных штаммах возбудителя туляремии передается в соответствии с действующей нормативной документацией и направляется в Центр индикации и диагностики возбудителей опасных инфекционных болезней, Референс-центр по мониторингу за туляремией, Национальный Центр верификации диагностической деятельности Роспотребнадзора, осуществляющий функцию Государственной коллекции возбудителей особо опасных бактериальных инфекций I — II групп патогенности. Штаммы возбудителя туляремии, выделенные от людей, из объектов окружающей среды и/или идентифицированные в лабораториях Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I — II групп патогенности, направляют в Центр индикации и диагностики возбудителей опасных инфекционных болезней (противочумные учреждения, курирующие прикрепленные субъекты Российской Федерации). Заключение о результатах идентификации присланного на исследование штамма направляют в учреждение, из которого штамм получен. Передачу и транспортирование осуществляют в соответствии с действующими СП по порядку учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I — IV групп патогенности. Прилагаются паспорт на штамм в одном экземпляре, сопроводительное письмо, акт упаковки и акт передачи.

6.3. Порядок организации и проведения лабораторной диагностики туляремии для лабораторий Центров индикации и диагностики возбудителей опасных инфекционных болезней

6.3.1. Требования к лабораториям Центров индикации и диагностики возбудителей опасных инфекционных болезней Наличие разрешительных и регламентирующих работу документов, требования к специалистам и персоналу, участвующим в выполнении исследований на туляремию, требования к обеспечению безопасности работы персонала, порядок организации внутреннего контроля лабораторных исследований, правила ведения документации и требования к материальным ресурсам, необходимым для выполнения диагностических исследований на туляремию, аналогичны п. 6.2.1. 6.3.2. Номенклатура и объем исследований Лаборатории Центров индикации и диагностики возбудителей опасных инфекционных болезней проводят: — исследования материала от больных и умерших с подозрением на туляремию (по согласованию); — исследования проб из объектов окружающей среды (по согласованию); — идентификацию культур возбудителя туляремии, выделенных в прикрепленных субъектах, дают оценку вирулентности штаммов, проводят определение подвидов туляремийного микроба; — определение чувствительности к антибактериальным препаратам; — проверку качества и ингибирующих свойств питательных сред. 6.3.3. Порядок диагностических исследований на туляремию в лабораториях Центров индикации и диагностики возбудителей опасных инфекционных болезней Порядок диагностических исследований на туляремию в лабораториях Центров индикации и диагностики возбудителей опасных инфекционных болезней соответствует порядку диагностических исследований на туляремию в лабораториях особо опасных инфекций ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъекте Российской Федерации п. 5.3.2.3. В схему идентификации дополнительно входят тесты по определению вирулентности для белых мышей или морских свинок и чувствительности возбудителя к антибактериальным препаратам, а также тесты внутривидового типирования: — определение ферментативной активности по отношению к глицерину; — определение цитрулинуреидазной, фосфатазной и пенициллиназной активности; — определение вирулентности для кроликов; — выявление подвидоспецифичных генетических маркеров с помощью ПЦР. 6.3.4. Порядок взаимодействия лабораторий Центров индикации и диагностики возбудителей опасных инфекционных болезней с организациями Роспотребнадзора Информация о выделенных и/или идентифицированных штаммах возбудителя туляремии передается в соответствии с действующей нормативной документацией и направляется в Референс-центр по мониторингу за туляремией, Национальный Центр верификации диагностической деятельности Роспотребнадзора, осуществляющий функцию Государственной коллекции возбудителей особо опасных бактериальных инфекций I — II групп патогенности. Штаммы возбудителя туляремии, выделенные от людей, из объектов окружающей среды и идентифицированные в лабораториях Центров индикации и диагностики возбудителей опасных инфекционных болезней, направляют в Референс-центр по мониторингу за туляремией. Заключение о результатах идентификации присланного на исследование штамма направляют в учреждение, из которого штамм получен. Передачу и транспортирование осуществляют в соответствии с действующими СП по порядку учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I — IV групп патогенности. Прилагаются паспорт на штамм в одном экземпляре, сопроводительное письмо, акт упаковки и акт передачи.

7. Порядок организации и проведения лабораторной диагностики туляремии для лабораторий федерального уровня

7.1. Порядок организации и проведения лабораторной диагностики туляремии для Референс-центра по мониторингу за туляремией

7.1.1. Требования к лабораториям Референс-центра по мониторингу за туляремией Наличие разрешительных и регламентирующих работу документов, требования к специалистам и персоналу, участвующим в выполнении исследований на туляремию, требования к обеспечению безопасности работы персонала, порядок организации внутреннего контроля лабораторных исследований, правила ведения документации и требования к материальным ресурсам, необходимым для выполнения диагностических исследований на туляремию, аналогичны п. 6.2.1. 7.1.2. Номенклатура и объем исследований Лаборатории Референс-центра по мониторингу за туляремией проводят: — полную идентификацию и изучение биологических, молекулярно-генетических, биохимических свойств возбудителя туляремии, в том числе культур с атипичными свойствами и вновь выделенных культур, явившихся причиной эпидемической вспышки; — определение чувствительности возбудителя туляремии к антибактериальным препаратам, в том числе методом серийных разведений; — исследование клинического материала и проб объектов окружающей среды — по эпидемическим показаниям. 7.1.3. Организация и обеспечение диагностической деятельности при мониторинге за туляремией Материалом для исследования служат штаммы возбудителя туляремии, в том числе штаммы с атипичными свойствами, выделенные в лабораториях территориального и регионального уровней; вновь выделенные штаммы, явившиеся причиной вспышки; материал от больных туляремией, объекты окружающей среды — по эпидемическим показаниям. При исследовании штаммов возбудителя туляремии, материала от людей и проб объектов окружающей среды используют весь комплекс методов, включая современные высокотехнологичные методы бактериологического, иммуносерологического и молекулярно-генетического анализа с использованием как зарегистрированных, так и экспериментально-лабораторных серий диагностических препаратов. Порядок исследования клинического материала, проб из объектов окружающей среды на туляремию соответствует п. 6.3.3. Идентификация поступивших культур осуществляется по полной схеме. Для характеристики штаммов по генам, ассоциированным с вирулентностью и персистенцией возбудителя в макроорганизме, таксономическим положением (с учетом рекомендаций ВОЗ), филогенетическим положением (16S рРНК, штаммовые отличия, происхождение), проводят расширенную идентификацию на основе генамплификационных, рестрикционных и секвенационных технологий (включая полногеномное секвенирование), в том числе с применением алгоритмов VNTR-, MLST-, RFLP- и SNP-типирования. При идентификации культур возбудителя туляремии с атипичными свойствами осуществляется использование дополнительных молекулярно-биологических, серологических, иммунологических, биохимических и других методов для подтверждения видовой или подвидовой принадлежности штаммов возбудителя туляремии: — ПЦР с использованием дополнительных видоспецифических подвидоспецифических праймеров и зондов; — постановка иммуносерологических реакций с использованием моноклональных антител в частности, ИХ-тестов для экспресс-идентификации туляремийного микроба. 7.1.4. Порядок взаимодействия лабораторий Референс-центра по мониторингу за туляремией с организациями Роспотребнадзора Информация о выделенных и/или идентифицированных штаммах возбудителя туляремии передается в соответствии с действующими нормативными документами и направляется в Национальный Центр верификации диагностической деятельности Роспотребнадзора, осуществляющий функцию Государственной коллекции возбудителей особо опасных бактериальных инфекций I — II групп патогенности. Штаммы возбудителя туляремии, идентифицированные в лабораториях Референс-центра по мониторингу за туляремией, передают в Национальный Центр верификации диагностической деятельности Роспотребнадзора, осуществляющий функцию Государственной коллекции возбудителей особо опасных бактериальных инфекций I — II групп патогенности. Заключение о результатах идентификации присланного на исследование штамма направляют в учреждение, из которого штамм получен. Передачу и транспортирование осуществляют в соответствии с действующими СП по порядку учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I — IV групп патогенности. Прилагаются паспорт на штамм в одном экземпляре, сопроводительное письмо, акт упаковки и акт передачи.

7.2. Порядок организации и проведения лабораторной диагностики туляремии для Национального Центра верификации диагностической деятельности возбудителей особо опасных бактериальных инфекций I — II групп патогенности Роспотребнадзора

7.2.1. Требования к лабораториям Национального Центра верификации диагностической деятельности Наличие разрешительных и регламентирующих работу документов, требования к специалистам и персоналу, участвующим в выполнении исследований на туляремию, требования к обеспечению безопасности работы персонала, порядок организации внутреннего контроля лабораторных исследований, правила ведения документации и требования к материальным ресурсам, необходимым для выполнения диагностических исследований на туляремию, аналогичны п. 6.2.1. 7.2.2. Номенклатура и объем исследований Лаборатории Национального Центра верификации диагностической деятельности осуществляют: — верификацию результатов диагностики туляремии и идентификации культур, полученных из Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I — II групп патогенности, Центров индикации и диагностики опасных инфекционных болезней Роспотребнадзора, Референс-центра по мониторингу за туляремией; — диагностические исследования материала от больных туляремией и умерших от этой болезни; — хранение коллекционных штаммов, охраноспособное и авторское депонирование. 7.2.3. Организация и обеспечение диагностической деятельности Порядок исследования клинического материала, проб из объектов окружающей среды на туляремию соответствует п. 5.3.2.3. Идентификацию культур осуществляют по полной схеме, дополнительно проводят: — определение чувствительности штаммов возбудителя туляремии к антибактериальным препаратам, в том числе методом серийных разведений; — выявление родо-, видо- и подвидспецифичных локусов с учетом рекомендаций ВОЗ; — секвенирование важных для филогенетического анализа генов (16S рРНК, sdhA, pilT и др.); — типирование штаммов возбудителя туляремии с помощью молекулярно-биологических подходов: выявление генов, связанных с вирулентностью и аттенуированием возбудителя; получение VNTR-, MLST-, RFLP- и SNP-профилей;

составление геномного портрета на основе результатов расширенной идентификации культур туляремийного микроба с помощью генамплификационных, рестрикционных и секвенационных (включая полногеномное секвенирование) технологий с целью создания электронного каталога. 7.2.4. Порядок взаимодействия лабораторий Национального Центра верификации диагностической деятельности с организациями Роспотребнадзора Национальный Центр верификации диагностической деятельности направляет в Региональные центры по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I — II групп патогенности, Центры индикации и диагностики возбудителей опасных инфекционных болезней, Референс-центр по мониторингу за туляремией результаты проведенных исследований.

Приложение 1

                                 Направление                   на исследование клинического материала

Наименование и адрес учреждения, куда направляется проба (пробы) _______
Фамилия, имя, отчество больного (умершего) _____________________________

пол __________________________, возраст ___________________________________ Место жительства __________________________________________________________

Дата заболевания __________________________________________________________ Дата обращения за медицинской помощью _____________________________________ Дата госпитализации _______________________________________________________ Диагноз предварительный ___________________________________________________
Особенности эпидемиологического анамнеза _______________________________
Проводилась ли антибактериальная терапия до взятия материала: — дата проведения _________________________________________________________ — какие использовались препараты __________________________________________ — какая доза ______________________________________________________________
Вид материала, взятого для исследования ________________________________
Дата и время забора материала __________________________________________
Цель исследования ______________________________________________________
Наименование учреждения должность, фамилия и инициалы лица, направляющего пробу (пробы)

(подпись)
Время доставки пробы (проб) (час, минуты, число, месяц, год)
Кто доставил пробы ____________________________________________________
(Ф.И.О., занимаемая должность, подпись)
Кто принял пробы ______________________________________________________
(Ф.И.О., занимаемая должность, подпись)
Адрес, по которому следует сообщить результаты исследования __________________________________________________________________________, контактный телефон/факс ___________________________________________________

Приложение 2

ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ПРИ ПРОВЕДЕНИИ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ТУЛЯРЕМИИ

   N  Наименование среды      Номер       Нормативная документация Изготовитель (разработчик)    п/п                    регистрационного                                                                                удостоверения                                                                                                                                                          1          2                 3                    4                          5                                                                                                                                           Зарегистрированные питательные среды                                                                                                                              1   Набор реагентов    ФСР 2007/0089    ТУ                       ФБУН ГНЦ ПМБ                      для бактериологи-                   9398-028-78 095 326-2007 142279, Московская область,       ческих исследова-                   ПР 78095326-17-2006      Серпуховский район,               ний - "Питательный                                           п. Оболенск                       агар для культиви-                                           Тел.: (4967) 36-00-09             рования и выделе-                                            Тел./факс: (4967) 36-00-20        ния туляремийного                                            E-mail: info@obolensk.org         микроба сухой                                                Веб-сайт: www.obolensk.org        (FT-агар)"                                                                                                                                                                                2   Глюкозо-витаминная                                           ФБУН ГНЦ ПМБ                      добавка к                                                    142279, Московская область,       питательной среде                                            Серпуховский район,                                                                            п. Оболенск                                                                                    Тел.: (4967) 36-00-09                                                                          Тел./факс: (4967) 36-00-20                                                                     E-mail: info@obolensk.org                                                                      Веб-сайт: www.obolensk.org                                                                                                   3   Ингибиторная                                                 ФБУН ГНЦ ПМБ                      добавка к                                                    142279, Московская область,       питательной среде                                            Серпуховский район,                                                                            п. Оболенск                                                                                    Тел.: (4967) 36-00-09                                                                          Тел./факс: (4967) 36-00-20                                                                     E-mail: info@obolensk.org                                                                      Веб-сайт: www.obolensk.org                                                                                                                     Незарегистрированные и разрабатываемые питательные среды                                                                                                                    4   Основа питательной                  ФСП 42-0291-2707-02      ФКУЗ ИркутскНИПЧИ                 среды для культи-                   ПР N 01 898 090-03-06    664047, г. Иркутск,               вирования туляре-                                            ул. Трилиссера, 78                мийного микроба                                              Тел./факс: (3952) 22-01-35                                                                     E-mail:                                                                                        adm@chumin.irkutsk.ru                                                                          Веб-сайт:                                                                                      www.irkutsk.ru/chumin/                                                                                                       5   Питательная среда  Эксперименталь-                           ФКУЗ Ростовский НИПЧИ             элективная для вы- ные серии                                 344007, г. Ростов-на-Дону,        деления возбудите-                                           ул. М. Горького, 117              ля туляремии сухая                                           Тел./факс: (863) 234-13-76        (АДЭТ)                                                       E-mail: garry@donpac.ru                                                                        Веб-сайт:                                                                                      hp.ic.ru/rostovpci                                                                                                           6   Среда для культи-  Эксперименталь-                           ФГУП "НПО "Микроген"              вирования и выде-  ные серии                                 127473, г. Москва, 2-й            ления туляремийно-                                           Волконский пер., 10               го микроба                                                   Тел.: (495) 790-77-73                                                                          НПО "Питательные среды"                                                                        Факс: (495) 783-88-04                                                                                                                                Питательные среды иностранного производства                                                                                                                           7   Brain Heart                                                  HiMedia, Индия                    Infusion Agar                                                124498, Москва, а/я 130                                                                        Тел.: (495) 536-43-00                                                                          www.himedialabs.com                                                                                                          8   Cystine Heart Agar                                           -"-                                                                                                                          9   Cystine Tryotone                                             -"-                               Agar                                                                                                                                                                                      10  Blood Agar Base                                              -"-

Приложение 3

ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫ, ТЕСТ-СИСТЕМЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ПРИ ПРОВЕДЕНИИ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ТУЛЯРЕМИИ

N Наименование Номер Нормативная документация Изготовитель (разработчик) п/п препарата или регистрационного

тест-системы удостоверения

1 2 3 4 5

Зарегистрированные препараты

  1   Набор реагентов.    ЛС-000195        ТУ                       Филиал "Медгамал" ФГБУ           Иммуноглобулины                      9389-023-01894956-2009   "НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи"         диагностические                                               Минздравсоцразвития России       флюоресцирующие                                               123098, г. Москва,               туляремийные сухие                                            ул. Гамалеи, 18                                                                                Тел.: (499) 193-30-50;                                                                         190-44-59                                                                                      Факс: (499) 190-66-71                                                                          Веб-сайт: www.medgamal.ru                                                                                                   2   Набор реагентов.    ФСР 2010/08410   ТУ                       Филиал "Медгамал" ФГБУ           Альбумин бычий или                   9389-015-01894956-2009   "НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи"         бараний, меченный                                             Минздравсоцразвития России       родамином, сухой                                              123098, г. Москва,                                                                             ул. Гамалеи, 18                                                                                Тел.: (499) 193-30-50;                                                                         190-44-59                                                                                      Факс: (499) 190-66-71                                                                          Веб-сайт: www.medgamal.ru

3 Набор реагентов. ФСР 2010/06744 ТУ 9388-010-018978-2009 ФКУЗ СтавНИПЧИ

      Тест-система диаг-                                            355035, г. Ставрополь,           ностическая для                                               ул. Советская, 13                выявления возбуди-                                            Тел./факс: (6522) 26-03-12       теля туляремии в                                              E-mail: labdiagn@yandex.ru       иммуноферментном                                              Веб-сайт:                        анализе (ИФА) "ИФА-                                           www.stavnipchi.ru                Тул-СтавНИПЧИ"                                                                                                                                                                            4   Набор реагентов для ФСР 2009/05486   ТУ                       ФБУН ГНЦ ПМБ                     иммунохроматографи-                  9398-092-78095326-2000   142279, Московская               ческого экспресс-                                             область, Серпуховский            выявления и иденти-                                           район, п. Оболенск               фикации возбудителя                                           Тел./факс: (4967) 36-00-10       туляремии (ИХ-тест                                            E-mail: info@obolensk.org        F.tularensis)                                                 Веб-сайт: www.obolensk.org                                                                                                  5   Аллерген туляремий- 01-11/191-07     ФСП 42-0504-7374-06      ФГУП "НПО "Микроген"             ный жидкий (Туля-                                             127473, г. Москва, 2-й           рин), суспензия для                                           Волконский пер., 10              накожного скарифи-                                            Тел.: (495) 790-77-73            кационного нанесе-                                            Факс: (495) 783-88-04;           ния                                                           644080, Омск, пр. Мира, 7                                                                      Предприятие по производст-                                                                     ву бактерийных препаратов                                                                      Тел.: (3812) 65-14-63                                                                                                       6   Диагностикум        ФСР 2008/03073   ТУ 9388-084-14237183-08  ФГУП "НПО "Микроген"             туляремийный жидкий                                           127473, г. Москва, 2-й           для объемной и                                                Волконский пер., 10              кровянокапельной                                              Тел.: (495) 790-77-73            реакции                                                       Факс: (495) 783-88-04;           агглютинации                                                  644080, Омск, пр. Мира, 7                                                                      Предприятие по производст-                                                                     ву бактерийных препаратов                                                                      Тел.: (3812) 65-14-63                                                                                                               Незарегистрированные и разрабатываемые препараты (используются лабораториями                        территориального и регионального уровней только после регистрации)                                                                                                               7   Сыворотка           На регистрации   ТУ                       ФКУЗ ИркутскНИПЧИ                диагностическая                      8852-003-01898090-2010   664047, г. Иркутск,              туляремийная сухая                                            ул. Трилиссера, 78               для РА, лиофилизат                                            Тел./факс: (3952) 22-01-40       для микробиологи-                                             E-mail:                          ческих целей                                                  adm@chumin.irkutsk.ru                                                                          Веб-сайт:                                                                                      www.irkutsk.ru/chumin/                                                                                                      8   Набор реагентов для Прошел приемоч-                           ФБУН ГНЦ ПМБ                     определения возбу-  но-технические                            142279, Московская               дителя туляремии    испытания в                               область, Серпуховский            Francisella         аккредитованном                           район, п. Оболенск               tularensis в        Росздравнадзором                          Тел./факс: (4967) 36-00-10       реакции латекс-     испытательном                             E-mail: info@obolensk.org        агглютинации        центре                                    Веб-сайт: www.obolensk.org                                                                                                  9   Набор реагентов.    Прошел приемоч-                           ФБУН ГНЦ ПМБ                     Тест-система        но-технические                            142279, Московская               иммуноферментная    испытания в                               область, Серпуховский            магноиммуносорбент- аккредитованном                           район, п. Оболенск               ная для выявления   Росздравнадзором                          Тел./факс: (4967) 36-00-10       возбудителя туляре- испытательном                             E-mail: info@obolensk.org        мии моноклональная  центре                                    Веб-сайт: www.obolensk.org                                                                     ФКУЗ СтавНИПЧИ                                                                                 355035, г. Ставрополь,                                                                         ул. Советская, 13 - 15                                                                         Тел./факс: (8652) 26-40-39                                                                     E-mail: anthraxlab@mail.ru                                                                     Веб-сайт:                                                                                      www.stavnipchi.ru                                                                                                           10  Иммуномагнитная     Прошла приемоч-                           ФБУН ГНЦ ПМБ                     латексная тест-     но-технические                            142279, Московская               система на          испытания в                               область, Серпуховский            туляремию           аккредитованном                           район, п. Оболенск                                   Росздравнадзором                          Тел./факс: (4967) 36-00-10                           испытательном                             E-mail: info@obolensk.org                            центре                                    Веб-сайт: www.obolensk.org                                                                                                  11  Диагностикум        Эксперимен-                               ФКУЗ ИркутскНИПЧИ                туляремийный        тальные серии                             664047, г. Иркутск,              цветной сухой для                                             ул. Трилиссера, 78               РА и МРА                                                      Тел./факс: (3952) 22-01-35                                                                     E-mail:                                                                                        adm@chumin.irkutsk.ru                                                                          Веб-сайт:                                                                                      www.irkutsk.ru/chumin/                                                                                                      12  Диагностикум        Эксперимен-                               ФКУЗ СтавНИПЧИ                   эритроцитарный      тальные серии                             355035, г. Ставрополь,           туляремийный                                                  ул. Советская, 13 - 15           антигенный жидкий                                             Тел./факс: (8652) 26-40-39                                                                     E-mail: labdiagn@yandex.ru                                                                     Веб-сайт:                                                                                      www.stavnipchi.ru                                                                                                           13  Диагностикум        Эксперимен-                               ФКУЗ СтавНИПЧИ                   эритроцитарный      тальные серии                             355035, г. Ставрополь,           туляремийный                                                  ул. Советская, 13 - 15           иммуноглобулиновый                                            Тел./факс: (8652) 26-40-39       жидкий                                                        E-mail: labdiagn@yandex.ru                                                                     Веб-сайт:                                                                                      www.stavnipchi.ru                                                                                                           14  Тест-система для    Эксперимен-                               ФКУЗ РосНИПЧИ "Микроб"           выявления ДНК       тальные серии                             410005, г. Саратов,              Francisella                                                   ул. Университетская, д. 46       tularensis методом                                            Тел.: (8452) 26-21-31            полимеразной цепной                                           Факс: (8452) 51-52-12            реакции (Ген-Тул)                                             E-mail: microbe@san.ru                                                                         Веб-сайт: www.microbe.ru                                                                                                    15  Набор реагентов для На регистрации   ТУ                       ФКУЗ РосНИПЧИ "Микроб"           выявления ДНК                        9398-035-01898109-2011   410005, г. Саратов,              Francisella                                                   ул. Университетская, д. 46       tularensis методом                                            Тел.: (8452) 26-21-31            полимеразной цепной                                           Факс: (8452) 51-52-12            реакции с гибриди-                                            E-mail: microbe@san.ru           зационно-флуорес-                                             Веб-сайт: www.microbe.ru         центным учетом ре-                                                                             зультатов в режиме                                                                             реального времени                                                                              (Ген Francisella                                                                               tularensis - РГФ)                                                                                                                                                                         16  Набор реагентов для На регистрации   ТУ                       ФКУЗ РосНИПЧИ "Микроб"           выявления ДНК                        9398-036-01898109-2011   410005, г. Саратов,              Francisella                                                   ул. Университетская, д. 46       tularensis методом                                            Тел.: (8452) 26-21-31            полимеразной цепной                                           Факс: (8452) 51-52-12            реакции с электро-                                            E-mail: microbe@san.ru           форетическим учетом                                           Веб-сайт: www.microbe.ru         результатов (Ген                                                                               Francisella                                                                                    tularensis - РЭФ)                                                                                                                                                                             Тест-система для    Эксперимен-                               ФКУЗ РосНИПЧИ "Микроб"           одновременной       тальные серии                             410005, г. Саратов,              детекции ДНК возбу-                                           ул. Университетская, д. 46       дителей сибирской                                             Тел.: (8452) 26-21-31            язвы, чумы, туляре-                                           Факс: (8452) 51-52-12            мии методом мульти-                                           E-mail: microbe@san.ru           плексной полимераз-                                           Веб-сайт: www.microbe.ru         ной цепной реакции                                                                                                                                                                            Тест-система для    Эксперимен-                               ФКУЗ РосНИПЧИ "Микроб"           детекции и харак-   тальные серии                             410005, г. Саратов,              теристики возбуди-                                            ул. Университетская, д. 46       теля туляремии ме-                                            Тел.: (8452) 26-21-31            тодом мультиплекс-                                            Факс: (8452) 51-52-12            ной полимеразной                                              E-mail: microbe@san.ru           реакции                                                       Веб-сайт: www.microbe.ru

Приложение 4

ХИМИЧЕСКИЕ РЕАКТИВЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ
ПРИ ПРОВЕДЕНИИ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ТУЛЯРЕМИИ

N п/п Реактив

1 0,9%-й раствор хлористого натрия

2 Вода дистиллированная

3 ЭДТА (этилендиаминтетрауксусная кислота)

4 Трис(гидроксиметил)аминометан, хч

5 Борная кислота, ч

6 Бромистый этидий («Serva», Германия)

7 Агар-агар «Дифко»

8 Агароза

9 Спирт этиловый ректификованный

10 Набор реактивов для окрашивания мазков по Граму

11 Масло иммерсионное

12 Масло иммерсионное нефлуоресцирующее

13 Глицерин

14 Цитруллин

15 Краска по Романовскому-Гимзе

16 Цитрат натрия 5%-й раствор

17 Кислота уксусная 3%-я, подкрашенная метиленовой синькой

до светло-голубого цвета

18 Мертиолят натрия (1:10000)

19 Лизирующий буфер с гуанидинтиоцианатом

20 Калий гидрофосфат

21 L-цистеин гидрохлорид

22 Феноловый красный

23 Сахароза

24 Индикатор бромтимоловый синий

25 Глюкоза

26 Мальтоза

27 Манноза

28 Левулеза

29 Соляная кислота

30 Натрия гидроксид

31 Крезоловый красный

32 Фенолфталеиндифосфат

Приложение 5

ПРИБОРЫ И ОБОРУДОВАНИЕ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ
ПРИ ПРОВЕДЕНИИ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ТУЛЯРЕМИИ

   N     Наименование оборудования          Область применения       Кол-во   п/п                                                                 <>                                                                                  1                 2                              3                  4                                                                                            Лаборатории территориального и регионального уровней                                                                                                    Лаборатории ООИ ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии",                 Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных           и паразитарных болезней II - IV групп патогенности, Региональных            центров по мониторингу за возбудителями I - II групп патогенности                          (лаборатории противочумных станций)                                                                                                                       Оборудование общего назначения                                                                                                     1   Автоклав                        Обеспечение лабораторных       2                                            исследований                                                                                                        2   Сухожаровой шкаф                Обеспечение лабораторных       1            стерилизационный                исследований                                                                                                        3   Аквадистиллятор                 Обеспечение лабораторных       1                                            исследований                                                                                                        4   pH-метр                         Обеспечение лабораторных       1                                            исследований                                                                                                        5   Центрифуга до 9000 об./мин. для Подготовка проб                1            центрифужных стаканов (в том                                                числе конических) объемом до                                                50 мл                                                                                                                                                           Оборудование для бактериологических исследований                                                                                            6   Морозильная камера -20 °С       Хранение диагностических       1                                            препаратов и реактивов                                                                                              7   Холодильник                     Хранение диагностических       2                                            препаратов и реактивов.                                                     Хранение исследуемого                                                       материала

8 Бокс биологической безопасности Разбор и сортировка исследуе- 2

      II класса защиты                мого материала.                                                             Бактериологические, иммуно-                                                 серологические исследования

9 Бокс биологической безопасности Для розлива питательных сред 1

с ламинарным потоком воздуха

  10  Термостат                       Бактериологические             3                                            исследования                                                                                                        11  Аппарат для инактивирования     Для иммуносерологических       1            сывороток                       исследований                                                                                                        12  Микроскоп бинокулярный          Бактериоскопические            1            биологический иммерсионный      исследования                                                                                                        13  Микроскоп люминесцентный        Иммунофлуоресцентный анализ    1                                                                                    14  Оптический стандарт для приго-  Бактериологические             1            товления взвеси микроорганизмов исследования                                                                                                        15  Весы лабораторные               Приготовление сред. Подготовка 2                                            проб                                                                                                                16  Комплект автоматических         Обеспечение лабораторных       4            дозаторов                       исследований                                                                                                        17  Облучатели бактерицидные        Обеспечение лабораторных       4            (передвижные и стационарные)    исследований                                                                                                        18  Баня водяная                    Для иммуносерологических и     1                                            бактериологических                                                          исследований                                                                                                                              Оборудование для ПЦР-анализа                                                                                                      19  Морозильная камера -20 °С       Хранение диагностических       2                                            препаратов и реактивов.                                                     Хранение исследуемого                                                       материала                                                                                                           20  Холодильник                     Хранение диагностических       2                                            препаратов и реактивов.                                                     Хранение исследуемого                                                       материала                                                                                                           21  Бокс биологической безопасности Разбор и сортировка            1            II класса защиты                исследуемого материала.                                                     Выделение ДНК/РНК                                                                                                   22  Вакуумный отсасыватель          Выделение ДНК/РНК              1            медицинский                                                                                                                                         23  Микроцентрифуга для пробирок    Подготовка проб, выделение     1            1,5 мл; скорость до 13400       ДНК/РНК                                     об./мин.                                                                                                                                            24  Миницентрифуга-вортекс          Подготовка проб, выделение     3                                            ДНК/РНК, проведение                                                         амплификации                                                                                                        25  Термостат твердотельный         Подготовка проб, выделение     2                                            ДНК/РНК                                                                                                             26  ПЦР-бокс настольный             Проведение амплификации        1                                                                                    27  Охладитель проб                 Проведение амплификации        1                                                                                    28  Амплификатор                    Проведение амплификации        1                                                                                    29  Флуоресцентный анализатор       Учет результатов ПЦР по        1            (ПЦР-детектор)                  конечной точке                                                                                                      30  Амплификатор с системой         Проведение амплификации        1            детекции результатов в режиме                                               реального времени                                                                                                                                   31  Весы лабораторные               Приготовление гелей            1                                                                                    32  Электроплитка                   Приготовление гелей            1                                                                                    33  Камера для горизонтального      Учет результатов ПЦР           1            электрофореза с заливочным                                                  устройством для подготовки                                                  гелей                                                                                                                                               34  Источник постоянного тока       Учет результатов ПЦР           1                                                                                    35  Система фотодокументации        Учет результатов ПЦР           1            (УФ-трансиллюминатор,                                                       фотокамера с бокс- штативом)                                                                                                                        36  Комплект автоматических         Подготовка проб,               4            дозаторов переменного объема    выделение ДНК/РНК, проведение                                               амплификации, проведение                                                    электрофореза                                                                                                       37  Облучатели бактерицидные        Обеспечение лабораторных       4            (передвижные и стационарные)    исследований                                                                                                                                  Оборудование для ИФА                                                                                                          38  Морозильная камера -20 °С       Хранение исследуемого          1                                            материала                                                                                                           39  Холодильник                     Хранение диагностических       2                                            препаратов и реактивов.                                                     Хранение исследуемого                                                       материала                                                                                                           40  Комплект автоматических         Обеспечение лабораторных       1            дозаторов переменного объема    исследований                                                                                                        41  Планшетный спектрофотометр      Учет результатов реакции       1                                                                                    42  Термошейкер на 37 °С (или       Инкубирование планшет          1            термостат)                                                                                                                                          43  Промыватель планшет                                            1                                                                                    44  Облучатели бактерицидные        Обеспечение лабораторных       1            (передвижные и стационарные)    исследований                                                                                                            Лаборатории Центров индикации и диагностики возбудителей опасных               инфекционных болезней (лаборатории научно-исследовательских                    противочумных институтов) (дополнительно к комплекту                           оборудования лабораторий противочумных станций)                                                                                                                 Оборудование общего назначения                                                                                                     45  Машина для мойки лабораторной   Обеспечение лабораторных       1            посуды                          исследований                                                                                                                    Оборудование для бактериологических исследований                                                                                            46  Бокс биологической безопасности Разбор и сортировка            1            III класса защиты               исследуемого материала.                                                     Бактериологические и                                                        иммуносерологические                                                        исследования                                                                                                        47  Микроскоп световой с системой   Бактериоскопические            1            фото- и видеодокументирования   исследования                                                                                                                                  Оборудование для ИФА                                                                                                          48  Бокс биологической безопасности Разбор и сортировка            1            II класса защиты                исследуемого материала.                                                     Иммуносерологические                                                        исследования                                                                                                        49  Система для анализа             Проведение многофакторного     1            биологических маркеров          иммунологического анализа                                                                                           50  Флуоресцентный сканер для       Учет результатов на            1            биочипов                        иммуночипах                                                                                                         51  Центрифуга низкоскоростная      Подготовка образцов            1                                                                                    52  Облучатели бактерицидные        Обеспечение лабораторных       1            (передвижные и стационарные)    исследований                                                                                                                              Оборудование для ПЦР-анализа                                                                                                      53  Низкотемпературный морозильник  Хранение исследуемого          1            (-70 °С)                        материала                                                                                                           54  Автоматическая станция для      Выделение ДНК/РНК              1            выделения ДНК/РНК (на основе                                                принципа нуклеосорбции на                                                   магносорбенте или на основе                                                 систем фильтрации на                                                        спин-колонках)                                                                                                                                      55  Компьютерная система для        Учет результатов реакции       1            гель-документирования                                                                                                                                   Флуоресцентный сканер для       Учет результатов на ДНК-чипах  п. 50        биочипов <*>                                                                                                                                           Система для анализа биологичес- Проведение многофакторного     п. 49        ких маркеров <**>               генетического анализа                                                                                                                   Лаборатории национального уровня                                                                                                         Лаборатории Референс-центра по туляремии, Национального центра            верификации диагностической деятельности (дополнительно к комплекту                   оборудования лабораторий регионального уровня)                                                                                                         Оборудование для бактериологических исследований

56 Низкотемпературный морозильник Хранение банка генетического 1

      (-70 °С)                        материала. Хранение                                                         коллекционного материала                                                    (чистая культура возбудителя)                                                                                       57  Система для лиофильного         Хранение коллекционного        1            высушивания микроорганизмов     материала                                   (с устройством для вакуумного                                               запаивания ампул)                                                                                                                                   58  Микроскоп универсальный         Бактериоскопические исследова- 1            (с системой фото- и             ния, иммунофлуоресцентный                   видеодокументирования)          анализ                                                                                                              59  Сканирующий зондовый микроскоп  Углубленное изучение и         1                                            характеристика ультраструктуры                                              возбудителя                                                                                                         60  Микробиологический анализатор   Бактериологические             1            для учета результатов           исследования                                антибиотикочувствительности и                                               биохимической идентификации                                                 микроорганизмов                                                                                                                                     61  Диспенсер автоматический для    Бактериологические             1            нанесения дисков с              исследования                                антибиотиками                                                                                                                                       62  Денситометр с оптическими       Обеспечение лабораторных       1            стандартами для приготовления   исследований                                взвесей микроорганизмов                                                                                                                                      Оборудование для молекулярно-биологических исследований                                                                                        63  Печь гибридизационная           Углубленное изучение и         1                                            характеристика возбудителя на                                               геномном уровне                                                                                                     64  Универсальный мультиканальный   Углубленное изучение и         1            сканер-ридер                    характеристика возбудителя на                                               геномном уровне                                                                                                     65  Персональный миниплоттер для    Углубленное изучение и         1            печати биочипов                 характеристика возбудителя на                                               молекулярном уровне                                                                                                 66  Флуоресцентный сканер для       Учет результатов на ДНК-чипах  1            биочипов                                                                                                                                            67  ДНК-анализатор (секвенатор)     Углубленное изучение и         1                                            характеристика возбудителя на                                               геномном уровне                                                                                                     68  Комплект оборудования для       Углубленное изучение и         1            PFGE-типирования (типирование   характеристика возбудителя на               методом электрофореза в         геномном уровне                             переменном поле): источник                                                  тока, электрофоретическая                                                   камера, насос, холодильник                                                                                                                          69  Автоматизированная система для  Молекулярное типирование       1            типирования бактериальных       штаммов возбудителей                        штаммов (РибоПринтер)                                                                                                                               70  Бокс биологической безопасности Подготовка проб для            1            II класса защиты                секвенирования                                                                                                      71  ПЦР-бокс настольный             Подготовка проб для            1                                            секвенирования                                                                                                      72  Настольная центрифуга с         Подготовка проб для            1            охлаждением, максимум скорости  секвенирования                              13200 об./мин.                                                                                                                                      73  Миницентрифуга-вортекс          Подготовка проб для            1                                            секвенирования                                                                                                      74  Термостат твердотельный         Подготовка проб для            1                                            секвенирования                                                                                                      75  Амплификатор с "горячей         Подготовка проб для            1            крышкой"                        секвенирования                                                                                                      76  Комплект автоматических         Обеспечение этапа подготовки   4            дозаторов переменного объема    проб для секвенирования, этапа                                              секвенирования;                                                             подготовки чипов для                                                        молекулярного типирования                                                                                                          Оборудование для биохимических исследований                                                                                              77  Холодильник                     Хранение диагностических       2                                            препаратов и реактивов.                                                     Хранение исследуемого                                                       материала                                                                                                           78  Масс-спектрометр                Углубленное изучение и         1                                            характеристика возбудителя на                                               протеомном уровне                                                                                                   79  Аналитический ВЭЖХ-хроматограф  Углубленное изучение и         1                                            характеристика возбудителя на                                               протеомном уровне                                                                                                   80  Комплект оборудования для       Углубленное изучение и         1            двумерного электрофореза        характеристика возбудителя на               (источник тока, электро-        протеомном уровне                           форетическая камера)                                                                                                                                81  Электронный микроскоп           Углубленное изучение и         1                                            характеристика ультраструктуры                                              возбудителя                                                                                                         82  Цитометр проточный (с модулем   Углубленное изучение и         1            сортировки клеток)              характеристика иммуногенных                                                 свойств возбудителя                                                                                                 83  Спектрофотометр для измерения   Обеспечение лабораторных       1            концентрации веществ в          исследований                                сверхмалых объемах (мкл)                                                                                                                            84  Установка для получения         Обеспечение лабораторных       1            высококачественной              исследований                                деионизованной воды                                                                                                                                 85  Весы лабораторные аналитические Обеспечение лабораторных       1                                            исследований                                                                                                        86  pH-метр                         Обеспечение лабораторных       1                                            исследований                                                                                                            <> Указано минимальное количество единиц лабораторного оборудования.   В     зависимости      от      объемов      выполняемых     исследований,

структурно-функциональной организации лаборатории количество единиц лабораторного оборудования может быть увеличено.

<*> Оборудование используется для учета результатов как на иммуночипах, так и на ДНК-чипах

Приложение 6

РАСХОДНЫЕ МАТЕРИАЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ПРИ ПРОВЕДЕНИИ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ТУЛЯРЕМИИ

N п/п Наименование материала

1 Пинцеты

2 Ножницы

3 Скальпель

4 Часы песочные на 1, 2 и 5 мин.

5 Петля бактериологическая

6 Штативы для пробирок бактериологических

7 Штативы для микропробирок 1,5 мл

8 Штативы для микропробирок 0,5 мл

9 Штативы для микропробирок 0,2 мл

10 Микроцентрифужные полипропиленовые пробирки с крышками типа

«Эппендорф» объемом 1,5 мл

11 Пробирки с винтовой горловиной объемом 1,5 мл, снабженные крышкой с

петлей и кольцевой прокладкой 1,5 мл, стерильные

12 Тонкостенные полипропиленовые пробирки (плоская крышка) для ПЦР

объемом 0,6 мл

13 Наконечники универсальные для дозаторов объемом 200 и 1000 мкл

14 Наконечники универсальные для дозаторов с фильтром объемом 10, 100,

200 и 1000 мкл

15 Перчатки латексные

16 Чашки Петри пластиковые одноразовые

17 Пробирка П1-16-150 ХС

18 Стекла предметные

19 Стекла покровные

20 Пипетки 4-1-1, 4-1-2, 6-1-5, 6-1-10

21 Спиртовки СЛ-1, СЛ-2

22 Ступки фарфоровые с пестиками

23 Колбы стеклянные 200, 250, 500 мл

24 Химические стаканы вместимостью 500, 750, 1000 мл

25 Цилиндры мерные вместимостью 10, 25, 50, 500, 1000 мл

26 Полистироловые пластины с лунками вместимостью 2 мл

27 Микротитровальные пластины с вместимостью лунок 0,2 мл

28 Оптический стандарт мутности на 10 ед.

28 Емкость для промывания мазков

29 Мостик для мазков

30 Камера Горяева

31 Бумага фильтровальная лабораторная

32 Вата медицинская гигроскопическая

33 Марля медицинская

Приложение 7

АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫЕ ПРЕПАРАТЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ПРИ ПРОВЕДЕНИИ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ТУЛЯРЕМИИ

N п/п Препарат Производитель

  1     Стрептомицин                      НИЦФ                                                                        192236, Россия, Санкт-Петербург,    2     Амикацин                          ул. Белы Куна, д. 30, лит. А,                                               офис 400.                           3     Канамицин                         Многоканальный тел./факс:                                                   +7 (812) 327-5581; 320-7169;        4     Гентамицин                        320-7138                                                                    mail@nicf.spb.ru                    5     Доксициклин                       http://www.nicf.spb.ru                                                                                          6     Налидиксовая кислота                                                                                                                              7     Ципрофлоксацин                                                                                                                                    8     Офлоксацин                                                                                                                                        9     Пефлоксацин

10 Ломефлоксацин

11 Левофлоксацин

12 Эритромицин

13 Пенициллин

14 Ампициллин

15 Кефзол (или цефалексин)

16 Полимиксин B

17 Рифампицин

18 Амфотерицин B (или амфоглюкамин)

19 Ристомицин

20 Набор дисков с антибиотиками

Приложение 8

ТРЕБОВАНИЯ
К ПРОФЕССИОНАЛЬНЫМ НАВЫКАМ СПЕЦИАЛИСТОВ, ОСУЩЕСТВЛЯЮЩИХ ЛАБОРАТОРНУЮ ДИАГНОСТИКУ ТУЛЯРЕМИИ

Врачи-бактериологи и биологи должны знать: — основные положения эпидемиологического надзора за туляремией; — нормативные документы, используемые при проведении лабораторных исследований на туляремию; — вопросы организации лабораторных исследований на туляремию; — требования биологической безопасности при работе с зараженным и подозрительным на заражение микроорганизмами I — II групп патогенности материалом; — таксономию и классификацию представителей рода Francisella семейства Francisellaceae; — морфологические, культуральные, биохимические свойства возбудителя туляремии; — бактериологический, иммуносерологические, молекулярно-генетические методы изучения возбудителя туляремии; — методы определения вирулентности возбудителя; — методы определения чувствительности к антибиотикам, химиопрепаратам и дезинфектантам; — этапы лабораторного исследования на туляремию, сроки выдачи ответов, правила и сроки передачи выделенных культур; — требования к доставке материала, его хранению, регистрации, уничтожению, подготовке к передаче и транспортированию; — этапы подготовительной работы (подготовку питательных сред для выделения и идентификации возбудителя туляремии, диагностических препаратов, реактивов); — критерии оценки качества питательных сред, используемых для диагностики туляремии, ингибиторов посторонней микрофлоры.
Врачи-бактериологи и биологи должны уметь: — провести полное исследование по схеме лабораторной диагностики туляремии материала от больных и умерших с подозрением на туляремию, проб из объектов окружающей среды; — идентифицировать выделенные культуры возбудителя туляремии по сокращенной и полной схеме; — определить вирулентность возбудителя; — определить чувствительность выделенных культур к антибактериальным препаратам; — установить таксономическую принадлежность возбудителя туляремии; — осуществлять контроль качества питательных сред и ингибиторов посторонней микрофлоры; — вести необходимую документацию.
Лаборанты, медицинские лабораторные техники и медицинские технологи должны знать: — морфологические, культуральные и основные биохимические свойства возбудителя туляремии; — этапы лабораторного исследования; — методы полной и сокращенной идентификации культур возбудителя туляремии; — правила работы с материалом, зараженным или подозрительным на заражение возбудителем туляремии; — этапы подготовительной работы (подготовку посуды, красок, питательных сред для выделения и идентификации возбудителя туляремии, диагностических препаратов, реактивов); — методы определения качества питательных сред и ингибиторов посторонней микрофлоры.
Лаборанты, медицинские лабораторные техники и медицинские технологи должны уметь: — приготовить или подготовить к работе питательные среды для выделения и идентификации возбудителя туляремии (приложение — не приводится); — приготовить основные ингредиенты для окраски мазков по Граму и Романовскому-Гимзе; — приготовить реактивы для постановки идентификационных тестов; — подготовить разведения сывороток для постановки иммуносерологических тестов; — осуществить вскрытие животных и подготовку проб; — произвести первичные посевы и пересевы поступившего материала; — сделать мазки, зафиксировать их и окрасить; — провести определение качества питательных сред; — подготовить отработанный материал для автоклавирования. А также должны участвовать в идентификации выделенной культуры по полной и сокращенной схемам, постановке биологической пробы.

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ И СОЦИАЛЬНОГО РАЗВИТИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ПИСЬМО
от 14 июля 2011 г. N 16-4/10/2-6874

Министерство здравоохранения и социального развития Российской Федерации направляет сокращенную основную профессиональную образовательную программу среднего профессионального образования по специальности «Стоматология профилактическая» квалификация «Гигиенист стоматологический» для выпускников, имеющих среднее профессиональное медицинское образование по специальности: «Стоматология (базовый уровень)», рекомендованную для использования Координационным советом по медицинскому и фармацевтическому образованию Минздравсоцразвития России.

Заместитель Министра
В.И.СКВОРЦОВА

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ И СОЦИАЛЬНОГО РАЗВИТИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ МОСКОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИКО-СТОМАТОЛОГИЧЕСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ МИНЗДРАВСОЦРАЗВИТИЯ РОССИИ

СОКРАЩЕННАЯ ОСНОВНАЯ ПРОФЕССИОНАЛЬНАЯ ОБРАЗОВАТЕЛЬНАЯ ПРОГРАММА СРЕДНЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ ПО СПЕЦИАЛЬНОСТИ 060205 — «СТОМАТОЛОГИЯ ПРОФИЛАКТИЧЕСКАЯ» КВАЛИФИКАЦИЯ «ГИГИЕНИСТ СТОМАТОЛОГИЧЕСКИЙ» ДЛЯ ВЫПУСКНИКОВ, ИМЕЮЩИХ СРЕДНЕЕ ПРОФЕССИОНАЛЬНОЕ МЕДИЦИНСКОЕ ОБРАЗОВАНИЕ ПО СПЕЦИАЛЬНОСТЯМ: 0404 СТОМАТОЛОГИЯ БАЗОВЫЙ УРОВЕНЬ

Организация-разработчик:
Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Московский государственный медико-стоматологический университет (ГОУ ВПО МГМСУ Минздравсоцразвития России). Разработчики:
Кузьмина Э.М. — профессор, доктор медицинских наук, заведующая кафедрой профилактики стоматологических заболеваний МГМСУ. Козичева Т.А. — кандидат медицинских наук, доцент кафедры профилактики стоматологических заболеваний МГМСУ.

ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

1.1. Настоящая сокращенная основная профессиональная образовательная программа среднего профессионального образования по специальности 060205 Стоматология профилактическая (далее — Программа) представляет собой совокупность программ образовательных дисциплин и профессиональных модулей, а также требований к условиям реализации обучения при освоении Федерального государственного образовательного стандарта лицам, имеющим среднее профессиональное медицинское образование по специальности 0404 «Стоматология» базовый уровень. 1.2. Право на реализацию основной профессиональной образовательной программы по специальности среднего профессионального образования имеют образовательные учреждения среднего профессионального и высшего профессионального образования при наличии соответствующей лицензии.

2. ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ СОКРАЩЕНИЯ

В Программе используются следующие сокращения: СПО — среднее профессиональное образование; ФГОС СПО — федеральный государственный образовательный стандарт среднего профессионального образования; ОУ — образовательное учреждение;
ОПОП — основная профессиональная образовательная программа по специальности; ОК — общая компетенция;
ПК — профессиональная компетенция;
ПМ — профессиональный модуль;
МДК — междисциплинарный курс.

3. ХАРАКТЕРИСТИКА ПОДГОТОВКИ ПО СПЕЦИАЛЬНОСТИ

3.1. Нормативные сроки освоения сокращенной основной профессиональной образовательной программы при очной форме получения образования и присваиваемая квалификация приводятся в таблице 1.

Таблица 1

     Образовательная база        Наименование          Нормативный срок                 приема           квалификации базовой   освоения Программы при                                    подготовки        очной форме получения                                                            образования                                                                                      На базе профессионального  Гигиенист                     3 месяца

медицинского образования стоматологический по специальности 0404 «Стоматология» (базовый уровень)

Срок освоения Программы по очно-заочной (вечерней) форме получения образования увеличивается на 1,5 месяца:

4. ХАРАКТЕРИСТИКА ПРОФЕССИОНАЛЬНОЙ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ ВЫПУСКНИКОВ

4.1. Область профессиональной деятельности выпускников: оказание профилактической стоматологической помощи пациентам лечебно-профилактических учреждений и контингенту организованных коллективов. 4.2. Объектами профессиональной деятельности выпускников являются: детское и взрослое население, нуждающееся в оказании профилактической стоматологической помощи; первичные трудовые коллективы.
4.3. Гигиенист стоматологический готовится к следующим видам деятельности: 4.3.1. Диагностика и профилактика стоматологических заболеваний. 4.3.2. Проведение индивидуальной и профессиональной гигиены полости рта. 4.3.3. Санитарно-гигиеническое просвещение в области профилактики стоматологических заболеваний.

5. ТРЕБОВАНИЯ К РЕЗУЛЬТАТАМ ОСВОЕНИЯ ПРОГРАММЫ

5.1. Гигиенист стоматологический должен обладать общими компетенциями, включающими в себя способность: ОК 1. Понимать сущность и социальную значимость своей будущей профессии, проявлять к ней устойчивый профессиональный интерес. ОК 2. Организовывать собственную деятельность, выбирать типовые методы и способы выполнения профессиональных задач, оценивать их качество и эффективность. ОК 3. Принимать решения в стандартных и нестандартных ситуациях и нести за них ответственность. ОК 4. Осуществлять поиск и использование информации, необходимой для профессионального и личностного развития с целью эффективного выполнения профессиональных задач. ОК 5. Использовать информационно-коммуникационные технологии в профессиональной деятельности. OK 6. Работать в коллективе и команде, эффективно общаться с коллегами, руководством, потребителями. ОК 7. Брать на себя ответственность за работу членов команды (подчиненных) и результат выполнения заданий. ОК 8. Самостоятельно определять задачи профессионального и личностного развития, заниматься самообразованием, осознанно планировать повышение квалификации. ОК 9. Ориентироваться в условиях частой смены технологий в профессиональной деятельности. ОК 10. Бережно относиться к историческому наследию и культурным традициям народа, уважать социальные, культурные и религиозные различия. ОК 11. Быть готовым брать на себя нравственные обязательства по отношению к природе, обществу и человеку. ОК 12. Оказывать первую (доврачебную) медицинскую помощь при неотложных состояниях. ОК 13. Организовывать рабочее место с соблюдением требований охраны труда, производственной санитарии, инфекционной и противопожарной безопасности. ОК 14. Вести здоровый образ жизни, заниматься физической культурой и спортом для укрепления здоровья, достижения жизненных и профессиональных целей. 5.2. Гигиенист стоматологический должен обладать профессиональными компетенциями, соответствующими основным видам профессиональной деятельности: 5.2.1. Диагностика и профилактика стоматологических заболеваний. ПК 1.1. Регистрировать данные эпидемиологического стоматологического обследования населения. ПК 1.2. Осуществлять сбор данных о состоянии здоровья населения пациента и проводить осмотр полости рта. ПК 1.3. Выявлять факторы риска возникновения стоматологических заболеваний. ПК 1.4. Проводить профилактику стоматологических заболеваний. ПК 1.5. Вести медицинскую документацию. ПК 1.6. Соблюдать установленные требования к хранению и использованию средств гигиены и профилактики, правилам работы и контролю за состоянием медицинского стоматологического оборудования, инструментария. ПК 1.7. Оказывать первую медицинскую помощь при неотложных состояниях. 5.2.2. Проведение индивидуальной и профессиональной гигиены полости рта. ПК 2.1. Оценивать состояние тканей пародонта и гигиены полости рта. ПК 2.2. Обучать пациентов уходу за полостью рта и применению средств гигиены, оценивать эффективность проводимых мероприятий. ПК 2.3. Осуществлять индивидуальный подбор средств гигиены полости рта в зависимости от возраста и состояния здоровья пациента. ПК 2.4. Осуществлять профессиональную гигиену полости рта. 5.2.3. Санитарно-гигиеническое просвещение в области профилактики стоматологических заболеваний. ПК 3.1. Проводить мероприятия по стоматологическому просвещению населения. ПК 3.2. Консультировать работников школьно-дошкольных, образовательных учреждений и семью по вопросам профилактики основных стоматологических заболеваний. ПК 3.3. Оценивать эффективность мероприятий по стоматологическому просвещению. ПК 3.4. Формировать мотивацию к здоровому образу жизни.

6. ТРЕБОВАНИЯ К СТРУКТУРЕ ПРОГРАММЫ

6.1. Программа предусматривает изучение профессионального учебного цикла, учебной практики и государственной (итоговой) аттестации (подготовки и защиты выпускной квалификационной работы): Профессиональный цикл состоит из общепрофессиональных дисциплин и профессиональных модулей в соответствии с основными видами деятельности. В состав профессионального модуля входит один или несколько междисциплинарных курсов. При освоении обучающимися профессиональных модулей проводятся учебная практика (производственное обучение). 6.2. Программа включает в себя 70 процентов обязательной части и 30 процентов вариативной части расширяющей и углубляющей подготовку определяемую содержанием обязательной части.

Таблица 2

Структура сокращенной основной профессиональной образовательной программы среднего профессионального образования

  Индекс Наименование циклов,    Всего     В т.ч. часов     Индекс и         Коды               разделов, модулей,  максимальной обязательных   наименование    формируемых              требования к       учебной      учебных       дисциплин,     компетенций           знаниям, умениям,     нагрузки     занятий    междисциплинарных                      практическому опыту  обучающегося                курсов (МДК)                                                                                                               Обязательная часть       648          432                                             циклов ОПОП                                                                                                                                                          П.00   Профессиональный         648          432                                             цикл                                                                                                                                                                 ОП.00  Общепрофессиональные      26           18                                             дисциплины                                                                                                                                                                  В результате              26           18      ОП.04.            ОК 1-13              изучения                                       Клиническое       ПК 1.1               обязательной части                             материаловедение  ПК 1.2               цикла обучающийся по                                             ПК 1.5-1.7           общепрофессиональным                                             ПК 2.3               дисциплинам должен:                                              ПК 2.4               уметь:                                                                                организовать работу                                                                   профилактического                                                                     кабинета в                                                                            учреждениях                                                                           здравоохранения и                                                                     организованных                                                                        коллективах;                                                                          применять                                                                             стоматологическое                                                                     оборудование,                                                                         инструменты и                                                                         материалы в своей                                                                     работе в                                                                              соответствии с                                                                        правилами их                                                                          использования;                                                                        осуществлять                                                                          основные мероприятия                                                                  по санитарно-                                                                         эпидемиологическому                                                                   и гигиеническому                                                                      режиму в                                                                              профилактическом                                                                      кабинете лечебно-                                                                     профилактических                                                                      учреждений;                                                                           применять средства и                                                                  предметы                                                                              индивидуальной                                                                        защиты на                                                                             стоматологическом                                                                     приеме;                                                                               знать:                                                                                санитарно-                                                                            эпидемиологический и                                                                  гигиенический режим                                                                   лечебно-                                                                              профилактических                                                                      учреждений                                                                            здравоохранения;                                                                      средства и предметы                                                                   санитарной                                                                            обработки,                                                                            дезинфекции и                                                                         стерилизации                                                                          стоматологического                                                                    материала и                                                                           инструментария;                                                                       барьерные средства                                                                    защиты на                                                                             стоматологическом                                                                     приеме, меры                                                                          предосторожности при                                                                  приеме ВИЧ-, гепатит                                                                  инфицированных                                                                        пациентов:                                                                            современные                                                                           стоматологические                                                                     материалы, их                                                                         свойства и способы                                                                    применения;                                                                           средства гигиены                                                                      полости рта и                                                                         профилактики                                                                          стоматологических                                                                     заболеваний;                                                                          виды обезболивания в                                                                  стоматологии и                                                                        возможные осложнения                                                                  при проведении                                                                        анестезии;                                                                            основы эргономики                                                                                                                                                    ПМ.00  Профессиональные         622          414                                             модули                                                                                                                                                               ПМ.01  Диагностика и            342          228      МДК.01.01.        ОК 1-11              профилактика                                   Стоматологические ОК 13                стоматологических                              заболевания и их  ПК 1.1-1.6           заболеваний                                    профилактика                           В результате                                                                          изучения                                                                              профессионального                                                                     модуля обучающийся                                                                    должен:                                                                               иметь практический                                                                    опыт:                                                                                 проведения                                                                            стоматологических                                                                     осмотров пациентов                                                                    различных возрастных                                                                  групп и выявления                                                                     нуждающихся в                                                                         стоматологическом                                                                     лечении;                                                                              диагностики основных                                                                  стоматологических                                                                     заболеваний твердых                                                                   тканей зубов и                                                                        тканей пародонта;                                                                     применения методов и                                                                  средств профилактики                                                                  стоматологических                                                                     заболеваний;                                                                          ведения медицинской                                                                   документации;                                                                         получения,                                                                            использования и                                                                       хранения средств                                                                      гигиены и                                                                             профилактики;                                                                         использования                                                                         стоматологического                                                                    оборудования,                                                                         инструментария и                                                                      подготовки рабочего                                                                   места;                                                                                применять принципы                                                                    эргономики в                                                                          профессиональной                                                                      деятельности;                                                                         соблюдения                                                                            санитарно-                                                                            эпидемиологического                                                                   и гигиенического                                                                      режима лечебно-                                                                       профилактических                                                                      учреждений;                                                                           уметь:                                                                                выявлять факторы                                                                      риска возникновения                                                                   стоматологических                                                                     заболеваний;                                                                          проводить                                                                             диагностику                                                                           стоматологических                                                                     заболеваний твердых                                                                   и мягких тканей                                                                       полости рта,                                                                          зубочелюстных                                                                         аномалий у пациентов                                                                  всех возрастов и в                                                                    случае необходимости                                                                  направлять пациента                                                                   к соответствующим                                                                     специалистам;                                                                         планировать,                                                                          разрабатывать и                                                                       осуществлять схемы                                                                    проведения                                                                            профилактических                                                                      мероприятий,                                                                          направленных на                                                                       предупреждение                                                                        возникновения                                                                         основных                                                                              стоматологических                                                                     заболеваний;                                                                          применять методы и                                                                    средства повышения                                                                    резистентности                                                                        эмали;                                                                                регистрировать                                                                        данные                                                                                стоматологического                                                                    статуса во время                                                                      проведения                                                                            эпидемиологического                                                                   обследования                                                                          населения;                                                                            осуществлять                                                                          аппликационную                                                                        анестезию;                                                                            применять средства                                                                    защиты пациента и                                                                     персонала от                                                                          рентгеновского                                                                        излучения;                                                                            знать:                                                                                порядок и методы                                                                      стоматологического                                                                    обследования                                                                          пациента;                                                                             этиологию и                                                                           патогенез основных                                                                    стоматологических                                                                     заболеваний;                                                                          общие принципы                                                                        диагностики, лечения                                                                  и профилактики                                                                        стоматологических                                                                     заболеваний;                                                                          организацию                                                                           стоматологической                                                                     помощи населению;                                                                     цели и задачи                                                                         эпидемиологического                                                                   стоматологического                                                                    обследования                                                                          населения;                                                                                                                                                           ПМ.02  Проведение               190          126      МДК.02.01.        ОК 1-11              индивидуальной и                               Гигиена полости   ОК 13                профессиональной                               рта               ПК 2.1-2.4           гигиены полости рта                                                                   В результате                                                                          изучения                                                                              профессионального                                                                     модуля обучающийся                                                                    должен:                                                                               иметь практический                                                                    опыт:                                                                                 оценки                                                                                гигиенического                                                                        состояния полости                                                                     рта пациента с                                                                        помощью                                                                               гигиенических                                                                         индексов;                                                                             определения                                                                           состояния тканей                                                                      пародонта;                                                                            обучения пациентов                                                                    различных возрастных                                                                  групп методикам                                                                       использования                                                                         индивидуальных                                                                        средств и предметов                                                                   гигиены полости рта;                                                                  индивидуального                                                                       подбора средств и                                                                     предметов гигиены                                                                     полости рта в                                                                         зависимости от                                                                        возраста и состояния                                                                  полости рта                                                                           пациента;                                                                             подбора                                                                               инструментария,                                                                       средств и материалов                                                                  для проведения                                                                        мероприятий по                                                                        профессиональной                                                                      гигиене полости рта;                                                                  проведения                                                                            мероприятий по                                                                        профессиональной                                                                      гигиене полости рта;                                                                  уметь:                                                                                оценивать состояния                                                                   тканей пародонта;                                                                     планировать и                                                                         осуществлять                                                                          гигиенические                                                                         мероприятия в                                                                         зависимости от                                                                        состояния твердых                                                                     тканей зубов, тканей                                                                  пародонта, слизистой                                                                  оболочки полости рта                                                                  и возраста пациента;                                                                  разрабатывать                                                                         тактику и схемы                                                                       проведения                                                                            гигиенических                                                                         мероприятий по уходу                                                                  за полостью рта для                                                                   пациентов,                                                                            пользующихся                                                                          съемными/несъемными                                                                   ортопедическими/                                                                      ортодонтическими                                                                      конструкциями;                                                                        использовать                                                                          стоматологические                                                                     приборы и                                                                             оборудование в                                                                        соответствии с                                                                        правилами                                                                             технической                                                                           эксплуатации;                                                                         знать:                                                                                организацию и                                                                         специфику                                                                             гигиенического                                                                        обучения пациентов в                                                                  условиях                                                                              стоматологической                                                                     поликлиники,                                                                          организованных                                                                        детских и взрослых                                                                    коллективов;                                                                          цели и задачи                                                                         индивидуальной и                                                                      профессиональной                                                                      гигиены полости рта;                                                                  классификацию и                                                                       механизм образования                                                                  зубных отложений;                                                                     средства и предметы                                                                   индивидуальной и                                                                      профессиональной                                                                      гигиены полости рта                                                                                                                                                  ПМ.03  Санитарно-                90           60      МДК.03.01.        ОК 1-11              гигиеническое                                  Стоматологическое ПК 3.1-3.4           просвещение в                                  просвещение                            области профилактики                                                                  стоматологических                                                                     заболеваний                                                                           В результате                                                                          изучения                                                                              профессионального                                                                     модуля обучающийся                                                                    должен:                                                                               иметь практический                                                                    опыт:                                                                                 проведения                                                                            стоматологического                                                                    просвещения среди                                                                     детей дошкольного и                                                                   школьного возраста и                                                                  их родителей;                                                                         проведения                                                                            анкетирования и                                                                       опроса населения;                                                                     уметь:                                                                                проводить                                                                             индивидуальные и                                                                      групповые беседы о                                                                    методах сохранения                                                                    здоровья полости рта                                                                  среди пациентов                                                                       лечебно-                                                                              профилактических                                                                      учреждений,                                                                           работников                                                                            организованных                                                                        коллективов;                                                                          составлять планы                                                                      проведения "уроков                                                                    здоровья", тексты                                                                     бесед, памяток,                                                                       лекций по                                                                             профилактике                                                                          стоматологических                                                                     заболеваний с учетом                                                                  специфики обучаемого                                                                  контингента;                                                                          анализировать                                                                         результаты                                                                            анкетирования;                                                                        планировать                                                                           мероприятия по                                                                        сохранению и                                                                          укреплению здоровья                                                                   населения;                                                                            знать:                                                                                цели, задачи и формы                                                                  стоматологического                                                                    просвещения;                                                                          роль                                                                                  стоматологического                                                                    просвещения в                                                                         профилактике                                                                          стоматологических                                                                     заболеваний;                                                                          особенности                                                                           проведения                                                                            стоматологического                                                                    просвещения среди                                                                     различных возрастных                                                                  групп населения;                                                                      критерии оценки                                                                       эффективности                                                                         стоматологического                                                                    просвещения;                                                                                                                                                                Всего часов обучения                                                                  по циклам ОПОП                                                                                                                                                       УП.00  Учебная практика                                                 ОК 1-14                                                                               ПК 1.2-1.7                                                                            ПК 2.1-2.4                                                                            ПК 3.1-3.4                                                                                          ГИА.00 Государственная         1 нед.                                                        (итоговая)                                                                            аттестация

ГИА.01 Подготовка выпускной 0,5 нед.

         квалификационной                                                                      работы                                                                                                                                                               ГИА.02 Защита выпускной       0,5 нед.                                                       квалификационной                                                                      работы

Таблица 3

Нормативный срок освоения Программы при очной форме получения образования составляет 12 недель, в том числе:

Обучение по учебным циклам 12 нед.

Учебная практика 10 нед.

Государственная (итоговая) аттестация 1 нед.

Итого 13 нед.

7. ТРЕБОВАНИЯ К УСЛОВИЯМ РЕАЛИЗАЦИИ СОКРАЩЕННОЙ ОСНОВНОЙ ПРОФЕССИОНАЛЬНОЙ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЙ ПРОГРАММЫ

7.1. Конкретные виды профессиональной деятельности, к которым в основном готовится выпускник, должны определять содержание его образовательной программы, разрабатываемой образовательным учреждением совместно с заинтересованными работодателями. При формировании ОПОП образовательное учреждение: имеет право ежегодно обновлять Программу (в части состава дисциплин и профессиональных модулей, установленных учебным заведением в учебном плане, и (или) содержания рабочих программ учебных дисциплин и профессиональных модулей, программ учебной и производственной практик, методических материалов, обеспечивающих реализацию соответствующей образовательной технологии) с учетом запросов работодателей, особенностей развития региона, науки, культуры, экономики, техники, технологий и социальной сферы в рамках, установленных настоящим федеральным государственным образовательным стандартом; обязано в рабочих учебных программах четко формулировать требования к результатам их освоения: компетенциям, приобретаемому практическому опыту, знаниям и умениям; обязано обеспечивать эффективную самостоятельную работу обучающихся в сочетании с совершенствованием управления ею со стороны преподавателей; обязано обеспечивать обучающимся возможность участвовать в формировании индивидуальной образовательной программы; обязано формировать социокультурную среду, создавать условия, необходимые для всестороннего развития и социализации личности, сохранения здоровья обучающихся; должно предусматривать в целях реализации компетентностного подхода, использование в образовательном процессе активных и интерактивных форм проведения занятий (компьютерных симуляций, деловых и ролевых игр, разбора конкретных ситуаций, психологических и иных тренингов, групповых дискуссий) в сочетании с внеаудиторной работой для формирования и развития общих и профессиональных компетенций обучающихся. 7.2. Обучающиеся имеют следующие права и обязанности: в целях воспитания и развития личности, достижения результатов при освоении Программы в части развития общих компетенций обучающиеся могут участвовать в развитии, работе общественных организаций, спортивных и творческих клубов; обучающиеся обязаны выполнять в установленные сроки все задания, предусмотренные Программой; обучающимся должна быть предоставлена возможность оценивания содержания, организации и качества образовательного процесса. 7.3. Максимальный объем учебной нагрузки обучающегося составляет 54 академических часа в неделю, включая все виды аудиторной и внеаудиторной (самостоятельной) учебной работы по освоению основной профессиональной образовательной программы. 7.4. Максимальный объем аудиторной учебной нагрузки при очной форме получения образования составляет 36 академических часов в неделю. 7.5. Максимальный объем аудиторной учебной нагрузки при очно-заочной (вечерней) форме получения образования составляет 16 академических часов в неделю. 7.6. Выполнение курсового проекта (работы) рассматривается как вид учебной работы по дисциплине (дисциплинам) профессионального цикла и (или) профессиональному модулю (модулям) профессионального цикла и реализуется в пределах времени, отведенного на ее (их) изучение. 7.7. Консультации для обучающихся очной формы получения образования предусматриваются образовательным учреждением в объеме 100 часов на учебную группу на весь период обучения. Формы проведения консультаций (групповые, индивидуальные, письменные, устные) определяются образовательным учреждением. 7.8. Практика является обязательным разделом Программы. Она представляет собой вид учебных занятий, обеспечивающих практико-ориентированную подготовку обучающихся. Учебная практика проводится образовательным учреждением при освоении студентами профессиональных компетенций в рамках профессиональных модулей и может реализовываться как концентрированно в несколько периодов, так и рассредоточенно, чередуясь с теоретическими занятиями в рамках профессиональных модулей. Цели и задачи, программы и формы отчетности практики определяются образовательным учреждением. 7.9. Реализация Программы обеспечивается педагогическими кадрами, имеющими высшее образование, соответствующее профилю преподаваемой дисциплины (модуля). Опыт деятельности в организациях соответствующей профессиональной сферы является обязательным для преподавателей, отвечающих за освоение обучающимся профессионального цикла, эти преподаватели должны проходить стажировку в профильных организациях не реже 1 раза в 3 года. 7.10. Программа обеспечивается учебно-методической документацией по всем дисциплинам, междисциплинарным курсам и профессиональным модулям. 7.11. Внеаудиторная работа должна сопровождаться методическим обеспечением и обоснованием времени, затрачиваемого на ее выполнение. Реализация Программы обеспечивается доступом каждого обучающегося к базам данных и библиотечным фондам, формируемым по полному перечню дисциплин (модулей) основной профессиональной образовательной программы. Во время самостоятельной подготовки обучающиеся должны быть обеспечены доступом к сети Интернет. Каждый обучающийся должен быть обеспечен не менее чем одним учебным печатным и/или электронным изданием по каждой дисциплине профессионального цикла и одним учебно-методическим печатным и/или электронным изданием по каждому междисциплинарному курсу (включая электронные базы периодических изданий). Библиотечный фонд должен быть укомплектован печатными и/или электронными изданиями основной и дополнительной учебной литературы по дисциплинам всех циклов, изданной за последние 5 лет. Библиотечный фонд, помимо учебной литературы, должен включать официальные, справочно-библиографические и периодические издания в расчете 1-2 экземпляра на каждые 100 обучающихся. Каждому обучающемуся должен быть обеспечен доступ к комплектам библиотечного фонда, состоящего не менее чем из 3 наименований отечественных журналов. Образовательное учреждение должно предоставить обучающимся возможность оперативного обмена информацией с отечественными образовательными учреждениями, организациями и доступ к современным профессиональным базам данных и информационным ресурсам сети Интернет. Для освоения Программы рекомендуется использовать литературу: Основная литература:
1. Леонтьев В.К., Пахомов Г.Н. Профилактика стоматологических заболеваний / М. 2006. — 416 с. 2. Кузьмина Э.М. Профилактика стоматологических заболеваний. / М., МГМСУ, 2003. — 214 с. 3. Кузьмина Э.М. Гигиенист стоматологический. Учебное пособие / М., 2005. — 230 с. 4. Максимовский Ю.М., Максимовская Л.Н., Орехова Л.Ю. Терапевтическая стоматология. Учебник / М., «Медицина», 2002 — 640 с. 5. Персин Л.С., Елизарова В.М., Дьякова С.В., Стоматология детского возраста. Учебник. / М., «Медицина», 2006. — 639 с. Дополнительная литература:
1. Дональд А., Фэлэйс С. Экстренная помощь в стоматологии. / М., Медицинская литература, 2001. — 435 с. 2. Заболевания пародонта: Атлас / Под ред. Н.Ф.Данилевского М., Медицина, 1993. — 320 с. 3. Кузьмина И.Н. Профилактическая стоматология. Учебное пособие. / М., 2009-188 с. 4. Кузьмина Э.М. с соавт. Основы индивидуальной гигиены полости рта. / М., 2008. — 116 с. 5. Леус П.А. Профилактическая коммунальная стоматология. / М., Медицинская книга, 2008. — 444 с. 6. Международная классификация стоматологических болезней на основе МКБ-10. 3-е изд-е. / ВОЗ, Женева, 1997. — 248 с. 7. Садовский В.В. «Стоматология в 4 руки» / М., ООО «Стоматология», 1999. — 103 с. 8. Стоматологическая заболеваемость населения России. Состояние тканей пародонта и слизистой оболочки рта. / под ред. Янушевича О.О., Москва, 2009. — 228 с. 9. Стоматологическая заболеваемость населения России. Состояние твердых тканей зубов. Распространенность зубочелюстных аномалий. Потребность в протезировании / под ред. Кузьминой Э.М. Москва, 2009. — 236 с.

7.12. Совет образовательного учреждения при введении ОПОП утверждает общий бюджет реализации соответствующих образовательных программ. Финансирование реализации ОПОП должно осуществляться в объеме не ниже установленных нормативов финансирования государственного образовательного учреждения. 7.13. Реализация Программы по специальности среднего профессионального образования, обеспечивается материально-технической базой. Материально-техническая база должна соответствовать действующим санитарным и противопожарным нормам. 7.14. Реализация Программы обеспечивает: выполнение обучающимся практических занятий с использованием персональных компьютеров; освоение обучающимся профессиональных модулей в условиях созданной соответствующей образовательной среды в образовательном учреждении или в организациях в зависимости от специфики вида профессиональной деятельности. 7.15. При использовании электронных изданий образовательное учреждение должно обеспечить каждого обучающегося рабочим местом в компьютерном классе в соответствии с объемом изучаемых дисциплин. Образовательное учреждение должно быть обеспечено необходимым комплектом лицензионного программного обеспечения. 7.16. Перечень кабинетов, лабораторий, мастерских и других помещений: стоматологических заболеваний и их профилактики; стоматологического просвещения;
клинического материаловедения;
компьютерный класс;
фантомный класс;
библиотека;
читальный зал с выходом в сеть Интернет.

8. ТРЕБОВАНИЯ К ОЦЕНИВАНИЮ КАЧЕСТВА ОСВОЕНИЯ СОКРАЩЕННОЙ ОСНОВНОЙ ПРОФЕССИОНАЛЬНОЙ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЙ ПРОГРАММЫ

8.1. Оценка качества освоения Программы включает текущий контроль знаний, государственную (итоговую) аттестацию обучающихся. 8.2. Конкретные формы и процедуры текущего контроля знаний по каждой дисциплине и профессиональному модулю разрабатываются образовательным учреждением самостоятельно и доводятся до сведения обучающихся в течение первого месяца от начала обучения. 8.3. Для аттестации обучающихся на соответствие их персональных достижений поэтапным требованиям соответствующей Программы создаются фонды оценочных средств, позволяющие оценить знания, умения и освоенные компетенции. Фонды оценочных средств для текущей аттестации разрабатываются и утверждаются образовательным учреждением самостоятельно, а для государственной (итоговой) аттестации — разрабатываются и утверждаются образовательным учреждением после предварительного положительного заключения работодателей. Образовательным учреждением должны быть созданы условия для максимального приближения программ текущей аттестации обучающихся по дисциплинам и междисциплинарным курсам профессионального цикла к условиям их будущей профессиональной деятельности — для чего, кроме преподавателей конкретной дисциплины (междисциплинарного курса), в качестве внешних экспертов должны активно привлекаться работодатели, преподаватели, читающие смежные дисциплины. 8.4. Оценка качества подготовки обучающихся и выпускников осуществляется в двух основных направлениях: оценка уровня освоения дисциплин;
оценка компетенций обучающихся.
8.5. Необходимым условием допуска к государственной (итоговой) аттестации является представление документов, подтверждающих освоение обучающимся компетенций при изучении теоретического материала и прохождении практики по каждому из основных видов профессиональной деятельности. 8.6. Государственная (итоговая) аттестация включает подготовку и защиту выпускной квалификационной работы (дипломная работа, дипломный проект). Обязательное требование — соответствие тематики выпускной квалификационной работы содержанию одного или нескольких профессиональных модулей. Требования к содержанию, объему и структуре выпускной квалификационной работы определяются образовательным учреждением на основании порядка проведения государственной (итоговой) аттестации выпускников по программам СПО, утвержденного федеральным органом исполнительной власти, осуществляющим функции по выработке государственной политики и нормативно-правовому регулированию в сфере образования, определенного в соответствии со статьей 15 Закона Российской Федерации «Об образовании» от 10 июля 1992 г. N 3266-1. Государственный экзамен вводится по усмотрению образовательного учреждения.